厄洛替尼在大鼠腦脊液和血漿中濃度與其療效的相關(guān)性研究

李曉琴　王秀麗　朱紅革　展翼翼　劉春玲

830011 新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院

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厄洛替尼在大鼠腦脊液和血漿中濃度與其療效的相關(guān)性研究

李曉琴王秀麗朱紅革展翼翼劉春玲

830011 新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院

【摘要】目的檢測(cè)厄洛替尼在大鼠腦脊液和血漿中的濃度，并對(duì)其與NSCLC患者療效間的相關(guān)性進(jìn)行分析。方法隨機(jī)選取40只健康大鼠，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)前1日禁食12 h，實(shí)驗(yàn)當(dāng)日分別按照10 mg/kg的劑量注入大鼠尾靜脈。另外選取2011年1月至2014年12年收治的110例NSCLC患者作為研究對(duì)象，對(duì)其臨床資料進(jìn)行回顧性分析。對(duì)比大鼠1、4、12、24 h的腦脊液和血漿中厄洛替尼濃度水平，并對(duì)兩者間相關(guān)性進(jìn)行分析；參照評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)將110例NSCLC患者分為CR組、PR組、SD組及PD組，對(duì)比不同組間的血漿厄洛替尼濃度，并對(duì)臨床療效與血漿厄洛替尼濃度的相關(guān)性進(jìn)行分析。結(jié)果大鼠1、4、12、24 h腦脊液和血漿中的厄洛替尼濃度水平存在顯著性差異，隨著時(shí)間的推移，其在腦脊液和血漿中的濃度逐漸降低(P<0.05)。不同時(shí)刻的大鼠腦脊液與血漿中的厄洛替尼濃度間均呈顯著正相關(guān)(P<0.05)。不同療效患者組間血漿中厄洛替尼濃度存在顯著性差異(P<0.05)，組間多重比較結(jié)果顯示不同組間血漿濃度由高至低依次為CR組> PR組> SD組> PD組(P<0.05)。結(jié)論厄洛替尼在大鼠腦脊液和血漿中的濃度呈顯著正相關(guān)，且患者療效與其血漿中藥物濃度具有相關(guān)性，血漿濃度越高，療效越好，故厄洛替尼在治療非小細(xì)胞肺癌腦轉(zhuǎn)移中具有重要的臨床意義，可作為放療等治療手段的有力補(bǔ)充。

【關(guān)鍵詞】厄洛替尼；腦脊液；血漿；療效；相關(guān)性

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:353～355)

肺癌是臨床最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)占到80%左右[1]，其中30%的病例會(huì)在疾病不同階段發(fā)生腦轉(zhuǎn)移[2]。近年來(lái)隨著肺部原發(fā)病灶治療手段的日趨完善，腦轉(zhuǎn)移病灶的局控率成為臨床研究的熱點(diǎn)[3]。患者常出現(xiàn)原發(fā)灶穩(wěn)定或好轉(zhuǎn)，而顱內(nèi)病灶治療失敗的異質(zhì)性現(xiàn)象[4]。本研究擬在使用高效液相色譜法測(cè)定大鼠體內(nèi)血漿中與腦脊液中厄洛替尼含量，其數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比，以分析厄洛替尼的療效、毒性作用及在腦脊液和血漿中濃度的差異，從而解釋NSCLC腦轉(zhuǎn)移患者在臨床治療中所出現(xiàn)的異質(zhì)性現(xiàn)象，為臨床用藥提供參考依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)選取40只健康大鼠，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)前1日禁食12 h，實(shí)驗(yàn)當(dāng)日將厄洛替尼按照10 mg/kg的劑量注入大鼠尾靜脈。

1.1.2臨床資料選取2011年1月至2014年12年我院收治的110例NSCLC患者作為研究對(duì)象，對(duì)其臨床資料進(jìn)行回顧性分析。所有患者均經(jīng)組織病理或細(xì)胞學(xué)確診為NSCLC，并經(jīng) CT或MRI檢查證實(shí)存在腦轉(zhuǎn)移。110例患者中男性42例，女性68例；年齡31～75歲，平均年齡(55.45±6.84)歲；其中腺癌97例、大細(xì)胞癌13例。所有患者均進(jìn)行厄洛替尼口服治療，并在治療過(guò)程中進(jìn)行厄洛替尼血漿濃度檢測(cè)。治療2個(gè)月后進(jìn)行療效分析，參照RECIST評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，將臨床療效分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、病灶穩(wěn)定(SD)及疾病進(jìn)展(PD)。

1.2檢測(cè)方法

選取10只大鼠(5雄5雌)分別于1、4、12、24 h后取靜脈血和腦脊液。將標(biāo)本5 000 r/min 進(jìn)行離心10 min，提取上清液，于-20 ℃保存。用于高效液相色譜測(cè)取厄洛替尼含量。大鼠及NSCLC患者血漿厄洛替尼含量測(cè)定：取400 μL血漿置肝素抗凝管中，加100 μL內(nèi)標(biāo)溶液，5 mL混合溶液(乙腈一二氯甲烷=1∶4，v/v)，振蕩混合10 min，3 000 r/min離心10 min。取上清液于45 ℃氮?dú)獯蹈桑瑲堅(jiān)?00 μL流動(dòng)相復(fù)溶，過(guò)微孔濾膜(0.45 μm)，取20 μL進(jìn)HPLC分析。腦脊液不需抗凝劑，其他同上。

1.3研究方法

對(duì)比大鼠1、4、12、24 h的腦脊液和血漿中厄洛替尼濃度水平；并對(duì)兩者間相關(guān)性進(jìn)行分析。回顧性分析110例NSCLC患者的臨床資料，參照評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)將其分為CR組、PR組、SD組及PD組，對(duì)比不同組間的血漿厄洛替尼濃度，并對(duì)臨床療效與血漿厄洛替尼濃度的相關(guān)性進(jìn)行分析。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2結(jié)果

2.1大鼠1、4、12、24 h的腦脊液和血漿中厄洛替尼濃度水平比較及相關(guān)性分析

大鼠1、4、12、24 h腦脊液和血漿中的厄洛替尼濃度水平存在顯著性差異，隨著時(shí)間的推移，其在腦脊液和血漿中的濃度逐漸降低(P<0.05)。見(jiàn)表1。不同時(shí)刻的大鼠腦脊液與血漿中的厄洛替尼濃度間呈顯著正相關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1　大鼠1、4、12、24 h的腦脊液和血漿中厄洛替尼濃度

2.2不同療效患者組間血漿中厄洛替尼濃度比較

不同療效患者組間血漿中厄洛替尼濃度存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，組間多重比較結(jié)果顯示不同組間血漿濃度由高至低依次為CR組>PR組>SD組>PD組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2　不同療效患者組間血漿中厄洛替尼

3討論

非小細(xì)胞肺癌一旦發(fā)生腦轉(zhuǎn)移后則中位生存時(shí)間較短，預(yù)后較差。一般認(rèn)為，由于血腦屏障的存在，在肺癌腦轉(zhuǎn)移時(shí)，絕大部分化療藥物均無(wú)法在腦脊液中達(dá)到有效的藥物濃度，因此對(duì)腦轉(zhuǎn)移灶作用有限[5]。隨著研究的進(jìn)展，小分子酪氨酸激酶抑制劑(TKI)逐漸受到人們關(guān)注。厄洛替尼是目前臨床上治療表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)敏感突變的非小細(xì)胞肺癌的一線用藥[6]。作為1種新型小分子EGFR-TKI，能透過(guò)血腦屏障，在EGFR過(guò)量表達(dá)的實(shí)體瘤細(xì)胞中穿過(guò)細(xì)胞膜，與ATP競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合EGFR胞內(nèi)部分，并與腦內(nèi)EGFR分子的酪氨酸結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合，阻斷信號(hào)傳導(dǎo)，進(jìn)而抑制酪氨酸激酶活性，降低腫瘤細(xì)胞黏附能力、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡[7-8]。與吉非替尼相比，厄洛替尼與表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶區(qū)ATP結(jié)合的親和力更高、特異性更強(qiáng)[9]。

本研究中，對(duì)大鼠1、4、12、24 h的腦脊液和血漿中厄洛替尼濃度水平比較，結(jié)果顯示大鼠1、4、12、24 h腦脊液和血漿中的厄洛替尼濃度水平存在顯著性差異，隨著時(shí)間的推移，其在腦脊液和血漿中的濃度逐漸降低(P<0.05)，且不同時(shí)刻的大鼠腦脊液與血漿中的厄洛替尼濃度間均呈顯著正相關(guān)(P<0.05)。符合藥物的代謝動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)。此外對(duì)不同療效患者組間血漿中厄洛替尼濃度進(jìn)行比較，結(jié)果顯示組間存在顯著性差異(P<0.05)，組間多重比較結(jié)果顯示不同組間血漿濃度由高至低依次為CR組> PR組> SD組> PD組(P<0.05)。提示患者的治療療效與其血漿中的厄洛替尼濃度呈正相關(guān)，血漿中濃度越高，療效越好，進(jìn)一步印證了厄洛替尼在殺滅腫瘤細(xì)胞中的積極作用。而對(duì)于厄洛替尼治療顱內(nèi)轉(zhuǎn)移失敗者，可采用高劑量脈沖式的給藥方法，以提高腦脊液濃度，縮小腦部轉(zhuǎn)移病灶[10]。

綜上所述，厄洛替尼在大鼠腦脊液和血漿中的濃度呈顯著正相關(guān)，且患者療效與其血漿中藥物濃度具有相關(guān)性，血漿濃度越高，療效越好，故厄洛替尼在治療非小細(xì)胞肺癌腦轉(zhuǎn)移中具有重要的臨床意義，可作為放療等治療手段的有力補(bǔ)充。

參考文獻(xiàn)

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[6]劉姣.厄洛替尼在Lewis肺癌小鼠時(shí)辰藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及相關(guān)代謝酶晝夜節(jié)律性的研究〔D〕.青島大學(xué)，2014.

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[9]周迪.厄洛替尼聯(lián)合全腦放療治療非小細(xì)胞肺癌腦轉(zhuǎn)移的臨床研究〔D〕.吉林大學(xué)，2013.

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(編輯：甘艷)

Concentration of Erlotinib in Rat Cerebrospinal Fluid and Plasma and its Correlation with Efficacy

LIXiaoqin，WANGXiuli，ZHUHongge，etal.

AffiliatedTumorHospitalofXinjiangMedicalUniversity，Urumqi，830011

【Abstract】ObjectiveTo detect the concentration of Erlotinib in rat cerebrospinal fluid and plasma and its correlation with efficacy.Methods40 healthy rats were selected，half male and half female rats.Before testing，the rats took absolute diet for 12 h.10 mg/kg of Erlotinib were separately injected into the tail vein of rats.The clinical data of 110 NSCLC patients were reviewed.The concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma in 1 h，4 h，12 and 24 h were compared and their correlations were analyzed；according to evaluation criterion，110 NSCLC patients were divided into CR group，PR group，SD group and PD group.The concentration of Erlotinib of the 3 groups were compared.The correlation of clinical effects with the concentration of Erlotinib in plasma was analyzed.ResultsThe concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma in 1 h，4 h，12 h and 24 h were significantly different.As time passed，the concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma was gradually reduced(P<0.05)；at different moments，the concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma had a significant positive correlation (P<0.05)；the concentration levels of Erlotinib in plasma was significantly different(P<0.05)；based on the multiple comparisons，the plasma concentration was arranged from high to low：CR group> PR group > SD group > PD group (P<0.05).ConclusionThe concentration levels of Erlotinib in cerebrospinal fluid and plasma have a significant positive relationship while the clinical efficacy is correlated with the concentration of Erlotinib in plasma.The higher concentration is，the better the clinical efficacy is.Erlotinib has an important clinical significance in the treatment of NSCLC metastasis and can be supplementary to radiation treatment and others.

【Key words】Erlotinib；Cerebrospinal fluid；Plasma；Curative effect；Correlation

(收稿日期2015-05-07修回日期 2015-09-10)

中圖分類號(hào)：R734.2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1001-5930(2016)03-0353-03

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2016.03.002

通訊作者：劉春玲

基金項(xiàng)目：新疆醫(yī)科大學(xué)創(chuàng)新基金課題(編號(hào)：XJC201282)；吳階平醫(yī)學(xué)基金會(huì)臨床科研專項(xiàng)資助基金(編號(hào)：320.6750.13136)