CXCR7在膠質瘤中的表達及其與預后的相關性

李新星　陳亮宇　王文卿　刁宏宇　劉云會

(中國醫科大學附屬盛京醫院神經外科，遼寧　沈陽　110004)

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CXCR7在膠質瘤中的表達及其與預后的相關性

李新星陳亮宇王文卿刁宏宇劉云會

(中國醫科大學附屬盛京醫院神經外科，遼寧沈陽110004)

〔摘要〕目的探討CXCR7在膠質瘤中的表達及其與預后的相關性。方法收集89例不同病理級別膠質瘤，應用免疫組化方法檢測CXCR7在膠質瘤中的表達。結果23例患者的CXCR7呈強陽性染色()，24例呈中度陽性染色()，17例呈弱陽性染色(+)，25例呈陰性染色(-)，且CXCR7在膠質瘤組織中的表達與膠質瘤的病理級別呈正相關。較強的CXCR7染色患者的存活時間較短。結論CXCR7可以做為膠質瘤病理級別分類及預后判斷的生物學標記物。

〔關鍵詞〕膠質瘤；CXCR7；預后

膠質母細胞瘤由于其超強的侵襲性，生長和浸潤速度極快，生存期只有8~15個月〔1〕。膠質瘤預后差，不僅是因為它具有侵襲性強和抗藥性的本質特征，還有部分原因是缺少預后標記物和分子靶向腫瘤標記物。趨化因子是帶有多種生物功能的趨化細胞因子族，直接作用于腫瘤轉化、腫瘤生長、腫瘤細胞存活、腫瘤侵襲和腫瘤轉移，影響腫瘤的發展〔2〕。趨化因子受體(CXCR7)與膠質瘤的發生發展存在密切關系〔3〕。本研究通過檢測膠質瘤樣本中CXCR7的蛋白質表達，評估它和臨床病理特征以及患者預后的關系。

1資料與方法

1.1一般資料選取我院2010年1月至2015年1月經過病理切片證實的89例膠質瘤患者標本進行研究。女37例，男52例，其中低級別膠質瘤42例，高級別47例。既往有免疫系統疾病及其他系統癌癥病史者均被排除在外，而且所有患者手術前均沒有接受放射治療或化療。所有參與者在研究前都知情同意，研究方案由中國醫科大學盛京醫院倫理委員會批準。

1.2免疫組化實驗所有切片在0.5%H2O2甲醇封閉10 min之前，用二甲苯脫蠟，梯度乙醇脫水。切片免洗，放在4℃的PBS中，置于潮濕的盒子里，用小鼠單克隆抗體CXCR7 (1∶100)培養。陰性控制組采用免疫原血清代替原發性抗體。生物素化二抗體(1∶400，Sigma)切片在室溫下培養1 h，用鏈親合素復合物檢測。室溫下，用0.1%3，3-二甲基聯苯胺放在0.05%H2O2的磷酸鹽緩沖液(PBS)中培養5 min，如果變為棕色說明過氧化物酶獲得活性。在光學顯微鏡(Leica DMD 108，Leica)下觀察呈像。

1.3染色評估CXCR7染色情況分別由兩位病理學家在不知曉臨床病理狀態的情況下觀察。先用低功率放大查看整個組織樣本，再用大功率(200倍)進行確認，評估載片上CXCR7的表達。應用免疫反應評分(IRS)系統：(1)陽性染色細胞數<5%為0分，6%~25%為1分，25%~50%為2分，51%~75%為3分，>75%為4分。(2)染色程度：無色0分，淡黃色1分，黃色2分，棕色3分。將(1)和(2)的得分相乘。根據陽性染色癌細胞的比例和密度，將染色評分分為不同等級：-(0分，無)，+(1~4分，弱)，(5-8分，中)，(9~12分，強)。如果兩位病理學家給出的分數相差>3，則重新為樣本評分。

1.4統計學方法應用Stata12.0軟件，采用Mann-Whitney檢驗和Kruskal-Wallis檢驗分析CXCR7表達和臨床病理特征之間的關系。

2結果

針對不同WHO等級的膠質瘤，CXCR7染色呈陽性的比率隨膠質瘤級別增高而增高，表明CXCR7染色與膠質瘤的WHO等級有顯著聯系(見表1)。KPS<80的患者CXCR7表達較KPS≥80的患者高(P<0.05)；CXCR7的陽性比率與患者性別(P=0.412)及年齡(P=0.381)無明顯相關性。見表1。

89例患者均在術后進行隨訪，直至死亡或至2015年1月31日。89例膠質瘤患者中32例死亡。陰性(-)、弱陽性(+)、中度陽性()和強陽性()患者的平均存活期分別為42、33、26、11個月。

圖1　膠質瘤組織中CXCR7免疫組化染色樣品(×200)

指標n-+P值性別 男5215813160.412 女3712799年齡(歲) <506117915200.381 ≥502810675KPS(分) <80330212190.023 ≥80562713106WHO分級 Ⅰ25250000.001 Ⅱ1721500 Ⅲ2400222 Ⅳ2300023

3討論

CXCR7被認作是基質細胞衍生因子-1α(SDF-1α)的第二受體，該受體最初是基于它的帶G-蛋白耦聯受體的保守結構域同源克隆的，并以“RDC1”命名〔4〕。系統發育研究和染色體定位研究揭示了RDC1孤兒受體和CXC趨化因子受體結構上具有相似性。SDF-1α被指出親和力很高，通過孤兒受體RDC1傳遞信息，使得受體被命名為CXCR7〔5〕。CXCR7在血管內皮細胞、T細胞、樹突細胞、B細胞、腦源性細胞和腫瘤細胞上進行表達，該表達在人類微血管內皮細胞中以缺氧方式提高表達。CXCR7在某些癌癥，諸如乳腺癌、肺癌和前列腺癌中發揮重要作用〔6~9〕。轉移性黑色素瘤切片的免疫組織化學染色表明CXCR7在腫瘤細胞上染色，該受體被認為在腫瘤細胞生長、黏著、存活、血管生成和侵襲方面起重要作用〔10〕。體內腫瘤生長研究中，CXCR7小分子拮抗劑的使用與異種移植和同系移植中腫瘤體積縮小有關〔11〕。

本研究結果表明，與正常腦組織中的CXCR7蛋白質表達相比，膠質瘤中的CXCR7蛋白質表達有所增加，這與之前的研究結果相吻合〔12〕。這些結果證明了CXCR7在人類膠質瘤中起致癌作用。本組患者中高級膠質瘤中可以檢測到強CXCR7染色，CXCR7表達與膠質瘤的病理級別相關，說明CXCR7的表達隨膠質細胞瘤級別的增高而增高，表現出膠質瘤不同病理級別間的差異，部分解釋了高級膠質瘤侵襲和轉移能力增強的原因。針對患者其他的臨床病理特征，研究還證實了CXCR7表達與患者的卡氏功能評分量表(KPS)評分有關，表明CXCR7的功能可能會影響膠質瘤患者的臨床表現。不過，研究并沒有發現CXCR7與患者性別或年齡的關系。

進一步分析了CXCR7對膠質瘤患者的存活期的預后作用，結果表明，較強的CXCR7染色患者的存活時間較短。這些發現證明，對膠質瘤患者來說，CXCR7可能是預后的不利因素。此外，年齡、KPS評分和遞增的病理級別等臨床特征也被證實與患者較差的存活期有關。這些結果表明CXCR7可能是膠質瘤患者的一個預后標記物，陽性患者的膠質瘤更有可能復發，更應該接受積極治療。但是，為了給每位病人提供相應的治療方法，還需要一些前瞻性研究來確定CXCR7在膠質瘤患者預后預測方面的準確性和有效性。

4參考文獻

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10Liu Y，Carson-Walter E，Walter KA，etal.Targeting chemokine receptor CXCR7 inhibits glioma cell proliferation and mobility〔J〕.Anticancer Res，2015；35(1)：53-64.

11Birner P，Tchorbanov A，Natchev S，etal.The chemokine receptor CXCR7 influences prognosis in human glioma in an IDH1-dependent manner〔J〕.J Clin Pathol，2015；68(10)：830-4.

12Hattermann K，Mentlein R.An infernal trio：the chemokine CXCL12 and its receptors CXCR4 and CXCR7 in tumor biology〔J〕.Ann Anat，2013；195(2)：103-10.

〔2015-12-15修回〕

(編輯袁左鳴)

Expression and significance of CXCR7 in human gliomas

LI Xin-Xing, CHEN Liang-Yu, WANG Wen-Qing,etal.

Department of Neurosurgery, Shengjing Hospital of China Medical University, Shenyang 110004, Liaoning, China

【Abstract】ObjectiveTo analyze the expression and clinical significance of CXCR7 in human glioma tumor tissue.Methods89 cases of glioma were selected and the expressions of CXCR7 were detected by immunohistochemistry methods in glioma tissue.ResultsAmong all the 89 cases of glioma specimens investigated, there were 23 cases strong positive staining() of CXCR7, 24 cases moderate positive staining(), 17 cases weak positive staining(+) and 25 cases negative staining (-) respectively. The expression level of CXCR7 was positively correlated with glioma malignancy.ConclusionsThe expression of CXCR7 is closely correlated to development and prognosis of human glioma.

【Key words】Glioma; CXCR7;Prognosis

〔中圖分類號〕R739.41

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)07-1639-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.07.046

通訊作者：劉云會(1962-)，男，博士，教授，主要從事膠質瘤基因治療研究。

基金項目：國家自然科學基金資助項目(No.81372484)

第一作者：李新星(1979-)，男，碩士，講師，主要從事膠質瘤基因治療研究。