茯苓復方結合有氧運動對老齡高脂血癥大鼠動脈粥樣硬化的影響

鞏清波

(重慶文理學院體育學院，重慶　402160)

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茯苓復方結合有氧運動對老齡高脂血癥大鼠動脈粥樣硬化的影響

鞏清波

(重慶文理學院體育學院，重慶402160)

〔摘要〕目的觀察有氧運動結合茯苓復方制劑對老齡高脂血癥大鼠血清脂代謝以及可溶性細胞間黏附分子(sICAM)-1濃度的影響，探討高脂血癥對動脈粥樣硬化形成的影響以及有氧運動和中藥預防效果。方法40只SPF級SD老齡大鼠，隨機分成空白對照組、高脂血癥組、中藥干預組、聯合干預組4組，每組10只。實驗16 w后，測定血清總膽固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)以及sICAM-1的濃度。結果復方茯苓制劑、茯苓制劑聯合有氧運動可以提高脂質代謝能力，下調sICAM-1的表達。結論復方茯苓制劑、有氧運動都能對高脂飲食誘導的高脂血癥大鼠LDL-C 、TG有一定的治療效果，但茯苓復方制劑結合有氧運動的干預效果最好。茯苓復方制劑、茯苓復方制劑聯合有氧運動都可以減少主動脈壁sICAM-1的表達，其中有氧運動加中藥聯合干預比單純運動和單純藥物干預效果好，提示對高脂血癥的治療應采取多因素協同的方法以提高治療的效果。

〔關鍵詞〕茯苓復方制劑；有氧運動；高脂血癥；脂質水平；黏附分子

高脂血癥是動脈粥樣硬化(AS)的誘發因素之一，在眾多的導致AS的因素中處于首位〔1〕，作為預防和治療AS的手段，體育鍛煉和中醫中藥有很好的發展前景。研究表明中等強度的有氧運動可使高脂血癥大鼠血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、載脂蛋白B(ApoB)等水平降低，同時可以促進血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、載脂蛋白AI(ApoAI) 水平升高，使得血脂和血漿ApoB發生轉變以利于對抗AS的發生〔2〕。此外，還有實驗證明，通過有氧運動還能夠在其降血脂的作用之外，提高機體抗氧化能力來達到抑制脂質過氧化的作用，從而起到抗AS的作用〔3〕。中藥方面學者也從現代醫學角度對中藥復方及某些單味中藥防治 AS 的作用及機制進行了探討〔4〕。目前將運動與中藥有機結合，共同防治AS的研究較少，未見運動與茯苓復方制劑聯合防治AS的相關報道。本研究觀察有氧運動結合茯苓復方制劑對高脂血癥老齡大鼠血清脂代謝以及可溶性細胞間黏附分子(sICAM)-1濃度的影響，探討高脂血癥對動脈粥樣硬化形成的影響機制以及有氧運動和中藥預防效果。

1材料與方法

1.1實驗動物及分組第三軍醫大學實驗動物中心提供的雄性SD老齡大鼠40只，平均體重(220±18)g。適應性喂養1 w，按體重均勻分成4組，每組10只。①空白對照組(C組)：給予普通飼料喂養；②高脂模型組(H組)：給予高脂飼料喂養；③服藥組(M組)：給予高脂飼料+復方茯苓制劑(0.4 ml/只)喂養；④聯合干預組(ME組)：高脂飼料+復方茯苓制劑(0.4 ml/只)+游泳訓練(從20 min/d開始，1 w內逐漸增為60 min/d，并維持該運動量至實驗結束)。全部大鼠喂養16 w，禁食24 h后采血，分離血清。

1.2材料與試劑TG、TC、HDL-C、LDL-C、sICAM-1均購自博士德生物工程有限公司。普通飼料由第三軍醫大學實驗動物中心提供；高脂飼料自制參照已有研究自行配制備用。

1.3復方茯苓制劑由茯苓12 g、半夏10 g、厚樸6 g、甘草3 g組成，購自重慶中藥藥材材公司。將上述四種藥物浸泡在冷水中1~1.5 h，待藥材混合變軟時，用大火煎熬30 min后再改用文火煎20~30 min，過濾之后冷卻備用。

1.4大鼠高脂模型復制依照參考文獻〔5〕的高脂飼料配置方法進行喂養，連續處理16 w。

1.5觀察指標及方法實驗至16 w末所有大鼠4%的戊巴比妥鈉麻醉，心尖采血，離心后取上層血清，雷杜半自動生化分析儀測定血清TG、 TC、LDL-C和HDL-C。ELISA測定血清sICAM-1濃度，方法嚴格按試劑盒說明進行。

1.6統計學方法采用SPSS15.0軟件行單因素方差分析。

2結果

2.1各組大鼠血清TG、TC、HDL-C、LDL-C的變化與C組相比，H組TG、TC、LDL-C水平上升較高，且與其余3組相比有非常顯著差異(P<0.01)，其HDL-C與C組相比無明顯差異(P>0.05)，說明高血脂模型造模成功。ME組、M組大鼠血清TG、TC、LDL-C水平增加幅度明顯降低，與H組相比有非常顯著差異(P<0.01)，且ME組TG、LDL-C顯著低于M組(P<0.05)；ME組HDL-C水平顯著高于其他各組(P<0.05)。見表1。

表1　各組大鼠血清血脂水平的變化

與H組比較：1)P<0.01；與ME組比較：2)P<0.05

2.2各組大鼠黏附分子sICAM-1的變化與C組sICMA-1水平〔(313.40±82.42)μg/L〕相比，H組sICAM-1水平上升較高〔(926.55±107.72)μg/L,P<0.01〕；ME組上升幅度較低〔(365.37±100.25)μg/L〕，與H組相比有顯著差異(P<0.01)，與C組、M組相比無顯著差異(P>0.05)；M組sICAM-1水平上升較大〔(496.02±118.57)μg/L〕，與C組相比有顯著差異(P<0.05)，與H組相比有非常顯著差異(P<0.01)。

3討論

冠狀動脈心臟疾病中風和其他許多疾病都是以AS為主要的病因和病理基礎，而誘發AS的因素有很多，例如血脂異常、高血壓、吸煙、雌激素減少、糖尿病、年齡、性別以及遺傳等因素。其中最重要的影響因素或者誘因還是高脂血癥和血管內皮細胞損傷，尤其是血管內皮細胞功能障礙，可以用來解釋為什么在血管內皮細胞的形態學變化之前出現功能異常。因此，預防和治療AS和血栓性疾病的主要措施就是減少高脂血癥以及保護血管內皮細胞的功能。

根據中醫的辯證理論，AS屬本虛標實之證，為血瘀痰濁的范疇即痰瘀同病。若嗜食肥甘厚味可使機體脾運失司，傷及脾胃，導致水濕運化不利引起痰的產生；痰的生成又可阻滯血脈，氣血不暢從而引起血瘀之癥。故中醫對AS的治療多從健脾益氣、活血化瘀以及祛痰降濁角度進行治療。茯苓入脾經，可利水滲濕，活血化瘀，其藥性平和祛濕而不傷正氣；半夏歸脾、胃、肺經，可燥濕化痰、和中健胃；厚樸入脾、胃、大腸經，有燥濕除滿、行氣消積之功效；甘草歸十二經，有補脾益氣、調和百藥之功效。將這四種藥材做成復方能有效地提高健脾化痰、化瘀活血之功效，且有關茯苓單方治療高脂血癥已有臨床報道，故復方制劑治療從化瘀、除濕、祛痰、健脾等方面治療高脂血癥具有可靠的理論基礎。

復方茯苓制劑可有效降低高脂血癥大鼠血清中TG、TC、LDL-C含量。根據復方中藥物的現代藥理作用推斷其產生機制可能有幾點：①茯苓復方中的一些成分可能抑制高脂血癥大鼠從對脂類物質的吸收；②茯苓復方制劑中的一些藥物成分，如β-茯苓聚糖、厚樸堿、甘草酸可加速機體脂類物質尤其是膽固醇的分解，從而促進機體體內的脂質代謝水平，最終表現為體內脂質總體水平和TG、TC的含量降低；③阻止了脂類物質向動脈血管內膜的滲透，如茯苓聚糖、黃酮甙等物質可以保護動脈血管的內皮細胞使其免受脂質氧化導致的損傷，從而減輕了動脈粥樣硬化發展；④降壓作用，茯苓提取物、厚樸堿、半夏蛋白等物質都具有降低血壓的作用，提示有氧運動聯合復方茯苓制劑對高脂血癥具有更好的治療效果。

本文提示中等強度的有氧運動可以引起高脂血癥大鼠血清HDL-C的升高。推測其產生的機制可能是由于運動訓練提高了高脂血癥大鼠肌肉和脂肪組織內的脂蛋白脂肪酶(LPL)的活性，促使脂蛋白分解代謝增強，使得膽固醇與高密度脂蛋白結合，最終導致血清HDL-C升高。其具體產生機制還有待進一步研究。

有學者研究了血脂異常和ICAM表達之間的關系，無論是體外實驗還是體內實驗都發現高脂血癥可以促進細胞間黏附分子的表達和白細胞與VEC的黏附。Smalley等〔6〕人的研究中報道，濃度為180 mg/dl的天然LDL可使體外培養血管內皮細胞的ICAM-1表達增加2.2倍之多，同時單核細胞(monocyte)與血管內皮細胞的黏附力也增加了2倍。Jeng等〔7〕的研究中表明氧化修飾低密度脂蛋白(OX-LDL)可使血管內皮細胞表面ICAM-1表達強度增加，并使巨噬細胞黏附數值增加2.2倍，在該研究中還證實了OX-LDL促進ICAM-1的表達作用可以是直接影響，也可以通過刺激血管壁細胞產生白細胞介素l、腫瘤壞死因子Q等介質間接調控。此外，有氧運動還可能通過其他獨立因素對AS的表達產生影響。根據過往的研究結果，大部分學者認為運動影響AS表達可能是因為運動應激會引起體內激素水平的變化和(或)細胞因子表達水平變化。

本實驗結果表明，茯苓復方制劑以及茯苓復方制劑聯合有氧運動干預高脂血癥大鼠可以顯著降低血清中sICAM-1的含量，本實驗還觀察到，ICAM-I表達程度的趨勢與各組血脂水平的增高程度大致相符，故此可以推斷，ICAM-l的大量表達可能與LDL-C和TG水平的異常具有密切關系，而茯苓和有氧運動對ICAM-1表達的下調也可能是通過改善血脂途徑和提高抗氧化能力發揮作用的。

4參考文獻

1蔡海江.動脈粥樣硬化基礎與臨床〔M〕.南京：江蘇科技出版社，1996:7-25.

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3Stergioulas A，Tripolitsioti A，Messinis D，etal.The efforts of endurance training on selected coronary risk factors in children〔J〕.Acta Paediatrica，1998；87(4)：401-4.

4趙江紅，滄海，李靜瓊.桂枝茯苓丸治療心腦血管疾病的藥理研究進展〔J〕.河南中醫學院學報，2005；20(4)：85-6.

5溫進坤，韓梅，杜瑋南，等.一種快速建立大鼠動脈粥樣硬化模型的實驗方法〔J〕.中國老年學雜志，2001；21(1)：50-2.

6Samlley DM，Lin JHC，Curtis ML，etal.Native LDL increases endothelial cell adhesiveness by inducing intercellular adhesion molecule-1〔J〕.Arterioscler Thromb Vasc Biol，1996；16(4)：585-90.

7Jeng JR，Chang CH，Shieh SM，etal.Oxidized low-density lipoprotein enhances monocyte-endothelial cell binding against shear-stress-induced detachment.〔J〕.Biochim Biophys Acta，1993；1178(2)：221-7.

〔2014-10-19修回〕

(編輯趙慧玲/曹夢園)

〔中圖分類號〕R285.5

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)07-1592-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.07.024

基金項目：重慶文理學院重點資助項目(No.Z2011TY09)

第一作者：鞏清波(1982-),男，講師，碩士，主要從事中醫與運動康復研究。