紫蘇子油對衰老小鼠記憶力和對正常小鼠鎮靜作用的影響

王亞萍　陳　鍇　符兆英　秦妮娜　白　娜

(延安大學醫學院，陜西　延安　716000)

?

紫蘇子油對衰老小鼠記憶力和對正常小鼠鎮靜作用的影響

王亞萍陳鍇1符兆英秦妮娜1白娜

(延安大學醫學院，陜西延安716000)

〔摘要〕目的探討紫蘇子油對衰老小鼠記憶力的增強作用和對正常小鼠的鎮靜作用。方法昆明種雌性小鼠，用D-半乳糖建立亞急性衰老模型，隨機分為紫蘇子油高、中和低劑量組，每組10只，用Morris水迷宮研究紫蘇子油對小鼠記憶力的影響，用光電管法測定紫蘇子油對小鼠自主活動的影響。結果紫蘇子油能縮短衰老小鼠水迷宮登臺潛伏期，并隨用藥時間的延長作用逐漸明顯。紫蘇子油還能減低正常小鼠的自主活動(即有鎮靜作用)，并無耐受現象。紫蘇子油還有對抗中樞神經系統興奮劑和增強中樞神經系統抑制劑的作用。結論紫蘇子油具有增強衰老小鼠記憶力的作用并對正常小鼠有鎮靜作用。

〔關鍵詞〕紫蘇子油；記憶力；自主活動；衰老

紫蘇子油(Perilla oil)是從唇形科藥用植物紫蘇(Perilla frutesccns)的種子中提取得到的一種天然油脂，含α-亞麻酸、亞油酸、油酸、棕櫚酸、維生素E及多種微量元素，其中α-亞麻酸含量最高，達60%以上〔1〕。α-亞麻酸是人體必需脂肪酸，有“陸地上的深海魚油”之稱，在體內可轉化為生命活性因子EPA和DHA，后者大量存在于大腦皮層和視網膜中，能促進腦神經細胞突觸生長，改善記憶力〔2〕。本文研究紫蘇子油對衰老模型小鼠記憶力的影響和對正常小鼠的鎮靜作用。

1材料與方法

1.2水迷宮試驗檢測紫蘇子油對衰老小鼠記憶力的影響健康雌性昆明種小鼠50只，按體重分層，隨機分組，共分為5組，每組10只，分別為：紫蘇子油高劑量組(5 ml/kg)、紫蘇子油中劑量組(2.5 ml/kg)、紫蘇子油低劑量組(1.25 ml/kg)、模型組和對照組(給藥組和模型組在實驗前1個月即開始注射D-半乳糖120 mg/kg)。均行灌胃給藥(模型組和對照組給予相應體積的生理鹽水)，每日1次，連續給藥30 d。 在給藥前1 d(D0)和第19天(D19)開始的每隔3 d，在給藥60 min后做Morris水迷宮訓練/試驗(注意水迷宮期間給藥不間斷)。將水迷宮水池分為4個象限，在第1象限正中離池壁33 cm處，放入直徑10 cm、高15 cm的一個站臺，站臺頂比水面低1 cm。迷宮帶有攝像機，同步記錄小鼠運動軌跡。每只小鼠每天訓練4次，整個訓練期迷宮室內墻上和迷宮壁上有參照物，參照物位置在試驗全程保持不變。每次將小鼠從不同象限放入水池，觀察小鼠從入水開始至找到并登上站臺所需時間(登臺潛伏期)，小鼠找到站臺后容許其在站臺上停留15 s。如果超過了80 s小鼠仍找不到站臺，則將其引導到站臺上，并容許停留15 s。記錄登臺潛伏期。

1.3光電管法測定紫蘇子油對小鼠自主活動的影響健康雌性昆明種小鼠50只，按體重分層，隨機分組，共分為5組，每組10只。分別為：紫蘇子油高劑量組(5 ml/kg)、中劑量組(2.5 ml/kg)、低劑量組(1.25 ml/kg)、安定注射液組(3 ml/kg)和對照組(等體積的生理鹽水)。均行灌胃給藥，實驗的第1、2、3、6、10天(D1、D2、D3、D6、D10)每日給藥1次，用光電管法測定紫蘇子油對小鼠自主活動的影響。在固定時間(上午9∶00，給藥60 min后)用YLS-1A小鼠自主活動記錄儀記錄各組小鼠15 min內的自主活動次數。

1.4紫蘇子油對中樞興奮或抑制小鼠的自主活動的影響雌性小鼠50只，按體重分層，隨機分組，共分為5組，每組10只。紫蘇子油高、中、低劑量組給藥方法與劑量同1.2；對照組、模型組給予等體積生理鹽水。60 min后除對照組小鼠腹腔注射生理鹽水外，其余各組分別給予腹腔注射硫酸苯丙胺注射液3 mg/kg、安鈉咖注射液8.6 mg/kg、苯巴比妥鈉注射液40 mg/kg，注射后30 min用YLS-1A小鼠自主活動記錄儀分別記錄各組小鼠在15 min內的自主活動次數。

1.5統計學方法采用SPSS17.0統計軟件進行方差分析、LSD-t檢驗。

2結果

2.1紫蘇子油對衰老小鼠記憶力的保護與改善作用用藥前紫蘇子油各劑量組與模型組小鼠登臺潛伏期比較差異無統計學意義(P>0.05)，但與對照組比較差異均有統計學意義(P<0.01)，說明小鼠衰老模型造模成功。隨著紫蘇子油給藥天數進展，紫蘇子油縮短各給藥劑量組小鼠登臺潛伏期的作用逐漸顯現，與模型組比較有顯著差異，從第21天(D21)以后與對照組相比亦有統計學意義(P<0.05)。紫蘇子油各用藥組隨用藥時間的延長，登臺潛伏期逐漸縮短，以用藥后第30天(D30)作用最明顯，在低、中、高3種劑量組中，以中、高劑量組的作用較好，說明紫蘇子油對衰老小鼠的空間學習與記憶能力有保護或改善作用，并有時間和劑量的依賴性(P<0.05,P<0.01)。見表1。

2.2紫蘇子油與安定注射液比較對小鼠的鎮靜作用安定注射液組小鼠與對照組相比，用藥第1天自主活動減少最為明顯，但連續用藥2 d后，其作用效果即開始明顯減弱，表示小鼠對安定注射液出現了耐受。紫蘇子油中劑量組與高劑量組小鼠從用藥第2天開始均出現自主活動減少，于用藥第6天以后作用更為明顯。紫蘇子油使小鼠自主活動減少的作用不僅沒有耐受現象，而且效果隨用藥時間的延長而增強，說明紫蘇子油對正常小鼠有鎮靜安神作用，而且其效果優于安定注射液(P<0.05,P<0.01)。見表2。

表1　紫蘇子油對衰老小鼠水迷宮登臺潛伏期的影響±s,s，n=10)

與同時點對照組比較：1)P<0.05；與同時點模型組比較：2)P<0.05，3)P<0.01

表2　紫蘇子油對小鼠自主活動的影響，次/15 min)

與同時點對照組比較：1)P<0.05，2)P<0.01；與同組D0比較：3)P<0.05，4)P<0.01；與安定注射液組D1比較：5)P<0.05，6)P<0.01

2.3紫蘇子油對中樞興奮或抑制小鼠自主活動的影響苯丙胺和安鈉咖都有中樞神經系統興奮作用，可以使小鼠的自主活動增加，但應用了紫蘇子油的小鼠的自主活動次數均顯著減少，說明紫蘇子油具有對抗中樞神經系統興奮劑的作用；苯巴比妥鈉是中樞抑制藥，它可使小鼠的自主活動減少，而應用了紫蘇子油的小鼠的自主活動更加減少，說明紫蘇子油能使中樞神經系統抑制藥的鎮靜作用增強(P<0.05,P<0.01)，見表3。

表3　紫蘇子油對中樞興奮或抑制小鼠自主活動的

與對照組比較：1)P<0.05，2)P<0.01；與模型組比較：3)P<0.05，4)P<0.01

3討論

紫蘇又名白蘇、赤蘇、香蘇、蘇麻等，是唇形科一年生草本植物，在我國各地均有分布，是我國傳統的藥、食兩用植物，是國家首批批準的藥、食兩用植物。紫蘇子油中不飽和脂肪酸含量可達90%以上，其中以亞麻酸為主，含量最高可達65%，是目前已知植物油類中α-亞麻酸含量最高的植物油，其次為亞油酸和油酸，含量均為16%~17%〔3〕。紫蘇子油具有多種藥理作用和保健功效〔4〕，有文獻報道哺乳動物發育期補充紫蘇子油有助于提高動物的學習與記憶能力〔5〕。本研究結果發現，紫蘇子油能提高衰老小鼠記憶能力，并能降低正常小鼠自主活動(即有鎮靜作用)，還能對抗中樞神經系統興奮劑和中樞神經系統抑制劑的作用。

紫蘇子油提高小鼠記憶力的機制可能與其所含的大量α-亞麻酸以及維生素E有關。α-亞麻酸是人體必需脂肪酸，在體內可轉化為生命活性因子DHA，后者大量存在于大腦皮層和視網膜中，能促進腦神經細胞突觸生長，能增加乙酸膽堿的釋放，參與調節LTP和突觸可塑性，故可改善學習與記憶能力〔5,6〕。實驗動物表明，DHA為腦發育和學習記憶功能所必需〔2,7~9〕。維生素E是定位于膜上的非酶性抗氧化劑，是體內主要的抗氧化劑〔10〕，其作用機制是：①捕獲和清除體內各種反應產生的活性自由基，降低脂質過氧化，防止不飽和脂肪酸被氧化成氫過氧化物，從而保護細胞膜免受氧化損傷〔11,12〕。②自由基可誘導神經細胞發生凋亡，而維生素E能對抗自由基引起損傷，減少神經細胞的凋亡〔13〕。③維持細胞膜脂質雙分子層的穩定，維護細胞膜結構。文獻報道，維生素E可以改善慢性間斷性缺氧和阿爾茨海默病所導致的認知障礙和記憶力障礙〔14,15〕。

4參考文獻

1國家藥典委員會.中華人民共和國藥典〔M〕.北京:化學工業出版社，2005:237.

2Feng Z,Zou X,Jia H,etal.Maternal docosahexaenoic acid feeding protects against impairment of learning and memory and oxidative stress in prenatally stressed rats:possible role of neuronal mitochondria metabolism〔J〕.Antioxid Redox Signal,2012;16(3):275-89.

3Zhao ML,Tang L,Zhu XM,etal.Enzymatic production of zero-transplastic fat rich in α-linolenic acid and medium-chain fatty acids from highly hydrogenated soybean oil,Cinnamomum camphora seed oil,and perilla oil by lipozyme TL IM〔J〕.J Agric Food Chem,2013;61(6):1189-95.

4金安娜，陳軼玉，丁晶晶，等.紫蘇油對衰老小鼠腦組織氧化還原物質的影響〔J〕.中國老年學雜志，2004;24(7):648-50.

5Zhao T,Hong SI,Lee J,etal.Impact of roasting on the chemical composition and oxidative stability of perilla oil〔J〕.J Food Sci，2012;77(12):1273-8.

6Das UN.Long-chain polyunsaturated fatty acids in growth and development of brain and memory〔J〕.Nutrition，2003;19:62-7.

7Chaung HC,Chang CD,Chen PH,etal.Docosahexaenoic acid and phosphatidylserine improves the antioxidant activities in vitro and in vivo and cognitive functions of the developing brain〔J〕.Food Chem,2013;138(1):342-7.

8Connor S,Tenorio G,Clandinin MT,etal.DHA supplementation enhances high-frequency,stimulation-induced synaptic transmission in mouse hippocampus〔J〕.Appl Physiol Nutr Metab,2012;37(5):880-7.

9Feng Z,Zou X,Jia H,etal.Maternal docosahexaenoic acid feeding protects against impairment of learning and memory and oxidative stress in prenatally stressed rats:possible role of neuronal mitochondria metabolism〔J〕.Antioxid Redox Signal,2012;16(3):275-89.

10Xiaoyuan Wang，Peter J Quinn.The location and function of vitamin E in membranes(Review)〔J〕.Mol Mem Biol，2000;17：143-56.

11Tamagno E，Parola M，Guglielmotto M，etal.Multiple signaling events in amyloid beta-induced，oxidative stress-dependent neuronal apoptosis〔J〕.Free Radic Biol Med，2003;35(1)：45-58.

12Alzoubi KH,Khabour OF,Salah HA,etal.Vitamin E prevents high-fat high-carbohydrates diet-induced memory impairment:the role of oxidative stress〔J〕.Physiol Behav,2013;119:72-8.

13孔亞坤，焦潤生，盧長柱，等.維生素E對老年雌性大鼠抗氧化能力及海馬神經元凋亡的影響〔J〕.哈爾濱醫科大學學報，2007;41(3)：199-201.

14徐雁，李舜偉，左萍萍，等.維生素E對慢性間斷性缺氧大鼠學習記憶的作用〔J〕.中國行為醫學科學，2003;12(2)：146-52.

15Takatsu H,Owada K,Abe K,etal.Effect of vitamin E on learning and memory deficit in aged rats〔J〕.J Nutr Sci Vitaminol(Tokyo),2009;55(5):389-93.

〔2014-12-30修回〕

(編輯安冉冉/曹夢園)

〔中圖分類號〕R962

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)07-1544-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.07.004

通訊作者：陳鍇(1975-)，男，碩士，副主任醫師，主要從事基礎醫學與臨床病理研究。

1延安大學附屬醫院

第一作者：王亞萍(1975-)，女，碩士，講師，主要從事基礎醫學與臨床病理研究。