地錦草對心肌缺血再灌注損傷大鼠血清心肌酶活力的影響

馬寶慧 　高永勝 　徐繼輝 　呂軍 　齊瑞芳 　王立軍

【摘 要】 目的：觀察地錦草對心肌缺血再灌注大鼠血清心肌酶活力的影響。方法：60只Wistar大鼠隨機分為6組：假手術組、模型組、陽性對照組、地錦草低、中、高劑量（50、100、200 mg/kg）組，每組10只。陽性對照組給予復方丹參片600mg·kg-1·d-1灌胃，地錦草組給予低、中、高劑量（50、100、200mg·kg-1·d-1）地錦草灌胃，其它組給予生理鹽水灌胃。各組均灌胃14d后，除假手術組外其余各組大鼠心臟左前降支結扎30min后再灌注120 min，建立心肌缺血再灌注模型。測定各組大鼠血清天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CKMB）的活力。結果：地錦草可降低心肌缺血再灌注大鼠血清AST、CK、CKMB活力。結論：地錦草對缺血再灌注損傷心肌具有一定的保護作用。

【關鍵詞】 地錦草；心肌酶；心肌缺血再灌注損傷；大鼠

【中圖分類號】R285.5 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2016）06-0044-02

地錦草為大戟科植物地錦（Euphorbian humifusa uilld）或斑地錦（Euphorbia maculata L.）的干燥全草，是常用的中藥材，也是一種蒙藥材（蒙文名為馬拉根-扎拉-烏布斯），具有清熱解毒、活血止血的功效。常以單方或復方入藥，用于治療肝炎、急慢性支氣管炎等。地錦草主要含有黃酮類、鞣質類等化合物，如槲皮素、山奈酚、芹菜素、木犀草素等。研究表明地錦草具有抗菌、抗氧化、抗炎、抗過敏、免疫調節、保肝、活血止血等多種生物活性[1]。研究觀察地錦草對心肌缺血再灌注損傷大鼠心肌酶的影響。

1 儀器與材料

1.1 動物 健康雄性Wistar大鼠60只，體重180～220g，SPF級，許可證號：SCKK（京）2011-0012，購自北京芳元緣養殖中心。

1.2 材料 復方丹參片（批號：12126626，北京同仁堂科技發展股份有限公司）；天門冬氨酸氨基轉移酶（AST，批號：13010705）、肌酸激酶（CK，批號：13040203）、肌酸激酶同工酶（CKMB，批號：13040304）試劑盒為武漢長立生物有限責任公司生產；地錦草（自制水煎劑）：取一定量的地錦草，加水浸泡30 min，先以武火煎開，再以文火煎煮30 min濾取煎液，以同樣的方法煎煮第2、第3次，將3次取得的煎液合并，靜置24 h，過濾去掉沉淀，濃縮。

1.3 儀器 東芝全自動生化分析儀。

2 方法

2.1 動物分組及給藥 隨機分為6組：假手術組、模型組、陽性對照組、地錦草低、中、高劑量組，每組10只。陽性對照組給予復方丹參片600mg·kg-1·d-1灌胃，地錦草組給予低、中、高劑量（50、100、200mg·kg-1·d-1）地錦草灌胃，其它組給予生理鹽水灌胃。各組均灌胃14d。

2.2 造模方法 將大鼠麻醉后于左側第3或第4肋間打開胸腔，輕壓將心臟擠出胸腔，剪開心包，左心耳根部下1～2mm處，用無創傷縫合線結扎冠脈，造成左心室室壁缺血。迅速將心臟送回胸腔，用長嘴止血鉗將胸部皮膚和肌肉以及心臟掛線夾緊，防止發生氣胸。30min后，放松掛線，再灌注120min，制成心肌缺血再灌注模型。同時記錄Ⅱ導心電圖。缺血心肌壁呈現發紺、膨出，心肌收縮減弱，同時心電圖示S-T段明顯上抬，T波高聳，造成心肌缺血，30min后復灌120min，心電圖示S-T段回落1/2以上，表示心肌缺血再灌注模型制備成功[2]。其中假手術組只穿線不結扎冠狀動脈。

2.3 標本留取方法 右頸總動脈取血5 ml，4000 rpm離心，取血清。

2.4 酶的測定方法 利用全自動生化分析儀測定AST、CK、CKMB活力。相對酶活力=（除假手術組外的其它組酶活力/假手術組酶活力）×100 %。

2.5 統計分析 采用SPSS 12.0統計軟件進行處理，計量資料用x±s表示，采用t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，P<0.05表示差異有統計學意義。

3 結果

由表1可知，與假手術組相比，模型組大鼠血清AST、CK、CKMB活力增加。與模型組相比，地錦草組大鼠血清AST、CK、CKMB活力降低，除地錦草低劑量組CKMB活力無顯著性差異外，其余各組大鼠血清AST、CK、CKMB活力與模型組相比有統計學意義（P<0.05）。

4 討論

心肌缺血再灌注損傷是由于冠狀動脈發生閉塞后再通，造成供血急劇減少或中斷后血流恢復，使心肌細胞生物膜損傷、通透性增加、心肌酶逸出[3]。其中比較重要的有AST、CK、CKMB。AST在心肌細胞中含量最高，臨床一般常作為心肌缺血再灌注和心肌炎的輔助檢查。CK有三種同工酶，其中CKMB主要存在于心肌，含量高達40 %以上，對心肌具有相對較高的特異性和敏感性。