葡萄胎組織中CK-8表達(dá)觀察

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葡萄胎組織中CK-8表達(dá)觀察

蔡鴻寧，張玨，胡俊波，高晗，吳緒峰

(湖北省婦幼保健院，武漢430070)

葡萄胎是胚胎外層滋養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生水腫變性、絨毛水腫而形成的水泡狀胎塊，具有惡變傾向。葡萄胎患者清宮后，主要依靠連續(xù)監(jiān)測(cè)血HCG、臨床癥狀及體征診斷侵襲性葡萄胎。但有些患者術(shù)后未及時(shí)監(jiān)測(cè)HCG，給診斷增加困難。尋找葡萄胎生物學(xué)特性的有效預(yù)測(cè)指標(biāo)對(duì)于存在惡變潛能的葡萄胎患者有重要意義。細(xì)胞角蛋白8(CK-8)被發(fā)現(xiàn)與細(xì)胞增殖及凋亡調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、腫瘤發(fā)生發(fā)展等有關(guān)。本研究觀察并比較了早孕絨毛、葡萄胎、侵蝕性葡萄胎組織中CK-8的表達(dá)變化，探討CK-8與葡萄胎惡變的關(guān)系。

臨床資料：2008年1月~2013年12月收治的葡萄胎患者60例，年齡18~38歲，中位孕周8周。患者清宮標(biāo)本經(jīng)病理檢查確診，其中部分性葡萄胎26例、完全性葡萄胎34例。葡萄胎患者清宮后均進(jìn)行隨訪，根據(jù)宋鴻釗[1]提出的侵蝕性葡萄胎診斷標(biāo)準(zhǔn)，將60例葡萄胎患者分為良性轉(zhuǎn)歸組38例、惡變組22例。葡萄胎患者的受檢標(biāo)本來自初次清宮后病理科留存石蠟塊，良性轉(zhuǎn)歸組中位年齡28歲，中位孕周8.5周；惡變組中位年齡25歲，中位孕周9.2周。選取來院人工流產(chǎn)的健康孕婦20例為對(duì)照組，中位年齡26歲，中位孕周8周，收集絨毛組織。

方法：采用免疫組化SP法檢測(cè)惡變組、良性轉(zhuǎn)歸組葡萄胎組織及對(duì)照組絨毛組織中的CK-8。各組標(biāo)本經(jīng)10%甲醛固定，石蠟包埋，連續(xù)切片，按操作說明書進(jìn)行SP法染色，DAB，顯色，以PBS代替一抗作陰性對(duì)照，相同條件下已知陽性切片作陽性對(duì)照。用HIPAS-1000高清晰度彩色病理圖像免疫組化測(cè)量系統(tǒng)進(jìn)行分析。CK-8陽性為細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒，光鏡高倍鏡下每張切片隨機(jī)選取5個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，計(jì)算陽性細(xì)胞百分比。陽性細(xì)胞百分比<25%為+，25%~50%為++，>50%為+++，+~+++為標(biāo)本CK-8表達(dá)陽性。采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用秩和檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果：惡變組葡萄胎組織、良性轉(zhuǎn)歸組葡萄胎組織、對(duì)照組絨毛組織中CK-8陽性表達(dá)率分別為82.82%(18/38)、47.37%(17/38)、35.00%(7/20)，三組兩兩相比，P均<0.05。見圖1。

注：A為對(duì)照組；B為良性轉(zhuǎn)歸組；C為惡性組。

圖1葡萄胎組織及正常絨毛組織中CK-8表達(dá)

討論：CK-8屬于細(xì)胞骨架蛋白家族，是上皮細(xì)胞表達(dá)的中間絲蛋白之一，在維持上皮細(xì)胞形態(tài)中發(fā)揮重要作用[2，3]。CK-8屬Ⅱ型細(xì)胞角蛋白，要表達(dá)于上皮細(xì)胞和上皮源性的腫瘤細(xì)胞中。有研究顯示，CK-8是上皮細(xì)胞的特征性標(biāo)志物，可能成為癌癥治療的新靶點(diǎn)[4]。CK-8翻譯后的修飾影響其穩(wěn)定性與活性，其翻譯后修飾包括磷酸化、糖基化及泛素化[5]。CK-8糖基化影響中間絲重組、亞細(xì)胞定位，糖基化異常可致細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化和腫瘤轉(zhuǎn)移[6]；CK-8泛素化與不溶性聚集物形成有關(guān)[7]，還與乳腺癌侵襲性相關(guān)，CK-8表達(dá)缺失或功能受損提示乳腺癌預(yù)后不良[4]。CK-8在部分上皮源性腫瘤中存在異常表達(dá)，如乳腺癌和胰腺癌等[8]；其也可在部分非上皮來源性的腫瘤中異常表達(dá)，如神經(jīng)膠質(zhì)瘤、黑色素瘤和肉瘤[9]。CK-8高表達(dá)可改變上皮細(xì)胞表型，促進(jìn)上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化[10，11]。有研究顯示，多數(shù)頭頸部鱗狀細(xì)胞癌和轉(zhuǎn)移癌均存在CK-8高表達(dá)[12]。

本研究結(jié)果顯示，正常絨毛組織、良性葡萄胎組織、惡變葡萄胎組織中CK-8陽性表達(dá)率逐漸增高，兩兩相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由此推測(cè)，CK-8在葡萄胎發(fā)生及惡性轉(zhuǎn)化中可能發(fā)揮一定作用，通過檢測(cè)CK-8可預(yù)測(cè)葡萄胎的發(fā)展趨勢(shì)，即高表達(dá)CK-8的葡萄胎惡變可能較大，而不表達(dá)CK-8的葡萄胎發(fā)生惡變的可能性較小。因此，我們認(rèn)為CK-8可作為預(yù)測(cè)葡萄胎轉(zhuǎn)歸趨勢(shì)的標(biāo)志物。

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(收稿日期：2015-11-02)

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.07.040

通信作者：高晗(E-mail: gaohan720204@163.com)

基金項(xiàng)目：武漢市中青年醫(yī)學(xué)骨干人才培養(yǎng)資助項(xiàng)目(220934012)。