三種白腐菌生物學特性與木質纖維素酶基因遺傳多樣性

楊立霞, 馬欣然, 王玉英, 閆紹鵬, 王秋玉,*

1 東北林業大學生命科學學院，哈爾濱　150040 2 呼倫貝爾學院生命與環境科學學院，呼倫貝爾　021000

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三種白腐菌生物學特性與木質纖維素酶基因遺傳多樣性

楊立霞1,2, 馬欣然1, 王玉英1, 閆紹鵬1, 王秋玉1,*

1 東北林業大學生命科學學院，哈爾濱150040 2 呼倫貝爾學院生命與環境科學學院，呼倫貝爾021000

摘要:以采自東北林業大學帽兒山實驗林場的3種白腐真菌——木蹄層孔菌(Fomesfomentarius)、鮑姆鮑姆木層孔菌(Phellinusbaumiibaumii)和火木層孔菌(Phellinusigniarius)為材料，用菌落直徑測量法比較3種白腐菌在馬鈴署葡萄糖固體培養基上的生長速度，采用菌絲體干重法比較其在馬鈴署葡萄糖液體培養基中的生物量變化。結果顯示：馬鈴薯葡萄糖固體培養基上3種白腐菌均為快速生長類型，其生長速度木蹄層孔菌>火木層孔菌>鮑姆鮑姆木層孔菌；馬鈴署葡萄糖液體培養基中生物量增長速度木蹄層孔菌>鮑姆鮑姆木層孔菌>火木層孔菌。用比色法測量其木質纖維素酶活性，結果顯示：木蹄層孔菌產錳過氧化物酶和漆酶量較高，鮑姆鮑姆木層孔菌和火木層孔菌產木質素過氧化物酶量較高；木蹄層孔菌、鮑姆鮑姆木層孔菌和火木層孔菌3種白腐菌的3種主要木質素酶(錳過氧化物酶、漆酶和木質素過氧化物酶)的表達量，種間差異顯著(F=3.75*、5.20**、3.01*)，白樺木屑誘導處理與對照間差異顯著(F=3.84*、4.19*、5.28*)；兩種主要纖維素酶(葡聚糖內切酶、葡聚糖外切酶)的表達量，種間差異不顯著，受碳源影響作用顯著(F=3.99*、4.04*)。篩選29對引物組合，對3種白腐菌幾種主要木質纖維素酶基因進行TRAP-PCR分子標記檢測，比較3菌種間遺傳差異，擴增總條帶數為357條，多態性條帶數為255條，多態性條帶的比例為71.43%，其中木質素降解酶基因總多態位點比率為73.77%，纖維素降解酶基因總多態位點比率為68.97%。3種白腐菌的木質纖維素降解酶基因在種間均存在較高的遺傳差異。因此，特定基因的TRAP分子標記可以用于木腐菌的遺傳變異分析。

關鍵詞：白腐菌；木質纖維素降解酶；TRAP分子標記；遺傳差異

木腐菌是生態系統中森林微生物的重要組成部分，其分泌的多種酶能降解木材中的纖維素、半纖維素和木質素，將木纖維分解為簡單的碳水化合物，營木質有機物腐生[1- 2]。按其對木纖維降解類型不同，木腐菌分為白腐菌、褐腐菌和軟腐菌三類[3]。白腐菌因腐朽木材呈白色而得名，屬于擔子菌門的真菌，在長期的生物進化過程中形成了一套獨特的木質素降解系統，是自然界中木質素的最有效降解物[4]。

早期木腐菌研究主要集中于形態學與分類學，側重于從自然界中篩選和人工誘變選育高酶活菌株[5]。隨著生物化學和分離技術的發展，有關木腐菌的木質纖維素酶組分的分離和降解機制研究逐漸展開，目前對結晶纖維素的水解機制已有初步了解[6- 9]。但由于天然木材中半纖維素和木質素與纖維素間緊密相連的特殊結構，天然木質纖維素難被降解的原因仍未被闡明[10- 12]。20世紀80年代初Kirk和Gold分別從白腐菌模式菌種——黃孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)中發現木質素過氧化物酶(簡稱LiP酶)和錳過氧化物酶(簡稱MnP酶)，提出白腐真菌在降解木質素過程中，需要纖維素或葡萄糖作為木質素的共底物，是木質素生物降解研究的突破。LiP酶、MnP酶與后來發現的漆酶(簡稱Lac酶)，共同構成了白腐菌的木質素降解酶系。因白腐菌具有木質纖維素降解特性，故在生物質能源利用、農業廢棄物循環利用、造紙廢液處理和環境保護、生物制漿、紡織印染、洗滌劑生產、食品飲料加工等領域擁有廣闊的應用前景[13- 17]。

隨著現代分子生物學技術的發展，白腐菌作為重要林木病原真菌，其群體遺傳學的研究已進入分子水平，包括同工酶分析、氨基酸序列測定以及DNA序列變異分析等。分子標記技術為大規模進行林木病原真菌的遺傳變異研究創造了有利的條件。靶位區域擴增多態性(Target Region Amplification Polymorphism，TRAP)分子標記，是由Hu和Vick在SRAP分子標記基礎上提出的新型分子標記技術[18- 19]。TRAP分子標記基于已知基因的cDNA或EST序列信息設計錨定引物，選擇性擴增靶基因序列，隨機引物富含AT或GC堿基，可與模板DNA中內含子或外顯子區域配對，擴增產物可對靶基因序列進行多態性標記。該技術操作簡單、多態性高、重復性好、共顯性高、費用低、靶基因區域針對性強，是遺傳多樣性研究中較為理想的分子標記技術[20- 21]。

本研究以帽兒山采集的木蹄層孔菌(Fomesfomentarius)、鮑姆鮑姆木層孔菌(Phellinusbaumiibaumii)和火木層孔菌(Phellinusigniarius)為對象，測定其生長速度、生物量變化以及木質纖維素相關酶活性，為木材腐朽機理研究和工業生產菌株選擇提供基礎數據；采用TRAP分子標記技術對3種白腐菌的木質纖維素酶相關基因多態性進行檢測，為從特定基因水平上研究木腐菌遺傳變異提供有用的信息。

1材料與方法

1.1實驗材料與處理

本試驗所用3種白腐菌為木蹄層孔菌、鮑姆鮑姆木層孔菌和火木層孔菌，采自黑龍江省東北林業大學帽兒山實驗林場，三者均為白色腐朽菌類型[22]，基本特征如表1所示。

無菌條件下，以75%酒精清洗腐朽菌子實體表面，用解剖刀分離出菌種子實體內部污染較少、生長旺盛的小菌塊，用75%的酒精溶液消毒1 min，無菌水清洗3次，濾紙吸干后接種于馬鈴薯葡萄糖固體平板培養基，23℃氣候箱中避光培養，待菌絲長滿培養基表面，選擇無雜菌污染的菌絲連續轉接2次，轉接入含白樺木屑或麥麩試管內，23℃氣候箱繼續培養，待菌絲長滿試管，4℃冰箱內保存待用[23]。

1.2菌絲生長特性比較

采用菌落直徑法和菌絲干重法比較3種白腐菌的生物學特性[24]。分別將3種白腐菌純菌絲點種在馬鈴薯葡萄糖固體培養基(90 mm徑培養皿)平板中央位置，28℃氣候箱避光倒置培養；每12 h測量菌落直徑變化，直至菌絲長滿平板。分別將3種白腐菌菌餅(直徑90 mm)接種于100 mL三角瓶內的40 mL馬鈴署葡萄糖液體培養基中，28℃ 150 r/min恒溫振蕩培養；每48 h取菌絲體，濾紙過濾得到粗菌絲體，用蒸餾水沖洗3次，100℃干燥箱中烘干至恒重，稱量干重，比較3種白腐菌菌絲體生物量變化。每處理3次重復。

1.3酶活性鑒定

1.3.1木質素降解酶活性的測定

木質素降解酶粗酶液制備：無菌操作條件下，將3種白腐菌菌餅接種于100 mL三角瓶內40 mL 馬鈴薯葡萄糖液體培養基中，每個菌種2個處理，處理樣中加白樺木屑，對照樣無木屑；28℃ 150 r/min恒溫振蕩培養，定期取菌樣培養液，4℃ 15000 r/min離心10 min取上清液，得木質素降解相關酶粗酶液[25]。每3d取1次菌樣測定酶活，連續取7次測定，每次測定每個處理取3個重復菌樣。每個處理中分別測定3種酶活，錳過氧化物酶(MnP酶)活性測量見參考文獻[26]、漆酶(Lac酶)的活性測量見參考文獻[27]、木質素過氧化物酶(LiP酶)活性測量見參考文獻[28]。

1.3.2纖維素降解酶活性的測定

產纖維素酶固體培養基配置：向50 mL三角瓶中加入1 g碳源物質和10 mL培養液，每個菌種2個處理，其碳源物質分別為白樺木屑和麥麩；培養液中各種無機鹽的質量百分含量分別為：2% (NH4)2SO4、0.1% KH2PO4、0.5% MgSO4·7H2O、0.01% CaCl2、0.01% NaCl、0.005% FeSO4·7H2O、0.0016% MnSO4·H2O、0.0014% ZnSO4·7H2O、0.002% CoCl2。纖維素降解酶粗酶液制備：無菌操作條件下，將3種白腐菌接種于產纖維素酶固體培養基，28℃氣候箱中培養，定期取菌樣制備粗酶液，向培養瓶中加入5倍質量的蒸餾水浸泡12h，雙層紗布過濾得濾液，4℃ 15000 r/min離心10 min取上清液，所得為纖維素降解相關酶粗酶液。每隔4d取1次菌樣測定酶活，連續取7次測定，每次測定每個處理取3個重復菌樣。每個處理中分別測定2種酶活，葡聚糖內切酶(EG酶)和葡聚糖外切酶(EC酶)，活性測定見參考文獻[29]。

1.4木質纖維素降解相關酶基因TRAP標記遺傳變異檢測

采用改良的CTAB法提取3種白腐菌的總DNA[30]。以來自NCBI數據庫的木質纖維素降解相關酶基因為靶標基因序列，設計固定引物，引物信息如表2所示。篩選具有較好擴增條帶多態性的引物對，用于3菌種TRAP-PCR分子標記檢測，每個處理3次重復。PCR最佳反應條件：反應體系20 μL,模板DNA 100 ng、固定引物(10 μmol/L) 2.0 μL、隨機引物(10 μmol/L) 2.0 μL、dNTP (2 mmol/L) 2.0 μL、MgCl2(25mmol/L) 2.0 μL、1×Buffer (含K+，不含Mg2+) 2.0 μL、Taq DNA聚合酶0.15 μL、ddH2O 7.85 μL,PCR程序為：94℃ 5 min；94℃ 1min，35℃ 1 min，72℃ 1 min，5個循環；94℃ 1 min，56℃ 1 min，72℃ 90 s，35個循環；72℃ 7 min。PCR擴增產物經1×TAE緩沖液，1.8%瓊脂糖凝膠，100 V緩沖電壓電泳，UPS凝膠成像系統 (Universal HoodⅡ, BioRad) 檢測電泳結果。

1.5數據處理與統計分析方法

采用SPSS17.0統計學軟件，對3種白腐菌的幾種主要木質纖維素酶活性進行種間和處理間方差及顯著性分析。

多態性百分率是描述群體遺傳變異量的參數，是指群體內多態性基因座的比例:

P=k/n×100%

式中,P為多態位點百分比，k為多態位點數，n為測定的位點總數。

2結果與分析

2.13種白腐菌菌絲生長速度和生物量變化

馬鈴薯葡萄糖固體培養基中，在16d培養過程中,3種白腐菌菌落直徑變化如圖1所示。3菌種菌絲生長速度均勻，木蹄層孔菌和火木層孔菌的生長速度較快，菌絲的平均生長速度分別是7.5 mm/d和6.9 mm/d，鮑姆鮑姆木層孔菌生長速度相對較慢，菌絲的平均生長速度是5.6 mm/d，三者之間生長速度差異不明顯，均屬于快速生長的類型。

馬鈴薯葡萄糖液體培養條件下，3種白腐菌的菌絲生物量變化如圖1所示。生長14 d后，木蹄層孔菌生物量最高，達到6.14 g/L，其次為鮑姆鮑姆木層孔菌，達到5.02 g/L，為同期木蹄層孔菌的81.75%，火木層孔菌生物量最低，為2.31 g/L，僅為同期木蹄層孔菌的37.62%。木蹄層孔菌和鮑姆鮑姆木層孔菌的生長調整期相對較短，時間為6 d，對數期的生長速度相對較快。火木層孔菌的生長調整期相對較長，時間為10d，對數期的生長速度相對較慢。

火木層孔菌在液體培養基中的生長速度比鮑姆鮑姆木層孔菌快，而在固體培養基中的生物量卻比鮑姆鮑姆木層孔菌小，由此可見火木層孔菌可能更適合在液體培養基中生長。

2.2木質纖維素降解酶活性變化

2.2.13種白腐菌木質素降解酶活性變化

不同培養條件下3種白腐菌產木質素降解相關酶活性變化如圖2所示。培養初期3種菌產LiP酶、MnP酶、Lac酶量低，經6—9 d調整期后進入對數生長期，酶的表達量開始增加，18—21 d后進入衰退期，產酶量逐漸下降。

木蹄層孔菌產MnP酶、Lac酶量高于鮑姆鮑姆木層孔菌和火木層孔菌，并隨著誘導時間的延長而增高；鮑姆鮑姆木層孔菌和火木層孔菌產LiP酶量高于木蹄層孔菌；3種白腐菌MnP酶、Lac酶、LiP酶的表達量種間差異顯著(F=3.75*、5.20**、3.01*)。

3菌種的MnP酶、Lac酶、LiP酶的表達量在處理與對照間差異顯著(F=3.84*、4.19*、5.28*)。圖2顯示木蹄層孔菌的MnP酶和Lac酶活性木屑誘導組略高于對照組；鮑姆鮑姆木層孔菌表達Lac酶活性極低，處理間差異不明顯；火木層孔菌屑誘導組的MnP酶、Lac酶活性木高于對照組，白樺木屑對MnP酶、Lac酶誘導作用的種間差異顯著(F=3.85*、5.27**)。木蹄層孔菌白樺誘導組LiP酶活性高于對照組，鮑姆鮑姆木層孔菌和火木層孔菌的對照組LiP酶活性高于白樺誘導組，白樺木屑誘導促進木蹄層孔菌LiP酶表達，抑制鮑姆鮑姆木層孔菌和火木層孔菌LiP酶表達，白樺木屑對LiP酶表達誘導作用的種間差異顯著(F=4.16*)(圖2)。

2.2.23種白腐菌纖維素降解酶活性變化

不同培養底物誘導下，3種白腐菌產纖維素降解相關酶活性變化如圖3所示。3菌種在培養初期均開始產葡聚糖內切酶(EG)和葡聚糖外切酶(EC)，酶的表達量逐漸增加，對數生長期達到峰值后逐漸下降，但麥麩培養基中火木層孔菌的EC酶活性，在測量后期仍繼續增長。麥麩作為碳源的培養基中3種白腐菌的酶活峰值出現時間晚于木屑做碳源的培養基。

3菌種的EG酶、EC酶表達量的種間差異不明顯(F=1.63、1.65，P<0.05)。碳源影響纖維素降解相關酶的表達量，白樺木屑作為碳源的培養基中，3菌種表達的EG酶和EC酶活性較低，活性變化較小，菌種長勢一般；麥麩作為碳源的培養基中，3菌種表達的兩種酶活性較高，活性變化較大，菌種長勢旺盛，EG酶、EC酶活性處理間差異顯著(F=3.99*、4.04*)。

2.3木質纖維素降解酶基因TRAP標記遺傳變異

2.3.1TRAP引物篩選結果

根據來自NCBI數據庫的木質纖維素降解相關酶基因設計固定引物，通過TRAP-PCR預實驗篩選針對7個木質纖維素酶基因的引物對，結果從64對引物中篩選出擴增條帶清晰、多態性較好的引物對29對。其中以木質素降解酶基因為靶基因的引物對有15對，可標記MnP基因的1對，標記Lac基因的6對，LiP基因的8對；以纖維素降解酶基因為靶基因的引物對有14對，可標記CBH基因的引物10對，標記CDH基因的3對，標記EG基因的1對。所篩選引物對如表3所示。

2.3.23種白腐菌木質纖維素降解酶基因TRAP標記的遺傳多態性

圖4為3菌種木質纖維素相關酶基因TRAP-PCR擴增產物的部分電泳結果，表4為各酶基因的擴增條帶的多態性統計。以3菌種的LiP酶基因為靶基因的8對引物擴增共產生94個條帶，多態性條帶為67條，木蹄層孔菌多態性比率為74.29%，鮑姆鮑姆木層孔菌多態性比率為73.53%，火木層孔菌多態性比率為64.00%，該基因總多態性條帶比率為為71.27%；以MnP酶基因為靶基因的1個引物對共擴增3個條帶，多態性條帶為2條，該基因總多態性條帶比率為66.67%； 以Lac酶基因為靶基因的6個引物對共擴增80個條帶，多態性條帶為62條，木蹄層孔菌多態性比率為72.73%，鮑姆鮑姆木層孔菌多態性比率為79.31%，火木層孔菌多態性比率為79.31%，該基因總多態性條帶比率為77.50%； 以CBHⅠ酶基因為靶基因的4個引物對共擴增58個條帶，多態性條帶為40條，木蹄層孔菌多態性比率為66.67%，鮑姆鮑姆木層孔菌多態性比率為71.43%，火木層孔菌多態性比率為68.42%，該基因總多態性條帶比率為68.97%； 以CBHⅡ酶基因為靶基因的6個引物對共擴增65個條帶，多態性條帶為47條，木蹄層孔菌多態性比率為66.67%，鮑姆鮑姆木層孔菌多態性比率為75.00%，火木層孔菌多態性比率為73.91%，該基因總多態性條帶比率為72.31%； 以CDHⅠ酶基因為靶基因的3個引物對共擴增40個條帶，多態性條帶為25條，木蹄層孔菌多態性比率為58.33%，鮑姆鮑姆木層孔菌多態性比率為70.59%，火木層孔菌多態性比率為54.55%，該基因總多態性條帶比率為62.5%； 以EG2酶基因為靶基因的1個引物對共擴增11個條帶，多態性條帶為8條，木蹄層孔菌多態性比率為80.00%，鮑姆鮑姆木層孔菌多態性比率為66.67%，火木層孔菌多態性比率為66.67%，該基因總多態性條帶比率為72.73%；由此可見，除MnP酶基因外，3種白腐菌的木質纖維素降解酶基因在種間均存在較高的遺傳差異。

3討論

白腐菌既可以表達木質素酶也可以表達纖維素酶，用于木質纖維素的降解。但不同的菌種間各種酶的表達存在很大差異，差異主要表現在表達量和表達時間上。

本研究的3種白腐菌分泌的3種主要木質素酶在表達量和表達時間上，種間存在很大差異。從表達量上看，木蹄層孔菌的Lac酶表達量很高，而鮑姆鮑姆木層孔菌的Lac酶表達量極低，不論是木屑誘導還是對照都幾乎不表達；木蹄層孔菌偏好產MnP酶、Lac酶，鮑姆鮑姆木層孔菌和火木層孔菌偏好產LiP酶。白樺木屑對3種白腐菌中MnP酶、Lac酶表達有誘導促進作用，對鮑姆鮑姆木層孔菌和火木層孔菌產LiP酶有誘導抑制作用，誘導作用種間差異顯著。從表達時間上看，白樺木屑誘導作用在種間差異顯著，白樺木屑誘導作用在不同菌種的不同酶中出現或早或晚，到達產酶峰值出現時間或促進或延遲，種間差異顯著。原因可能是不同菌種間的遺傳差異以及對誘導物的響應各不相同所致。

本研究的3種白腐菌產纖維素降解酶能力的種間差異不明顯，但酶的表達量和表達時間受碳源影響明顯，不同處理間差異顯著。原因可能在于纖維素降解酶系是多組分酶系，與其他的酶促反應有很大的區別，各組分之間存在復雜的協同反應關系，進而影響了EG酶和EC酶的表達量和活性變化。

以來自NCBI數據庫的木質纖維素降解相關酶基因為靶標基因序列，設計固定引物，通過TRAP-PCR篩選能產生多態性條帶的引物以用于菌種間遺傳變異研究。針對7個木質纖維素酶相關基因使用篩選出的29對引物，對3種白腐菌進行TRAP-PCR擴增，產生總條帶數為357條，多態性條帶數為255條，平均每對引物擴增出的條帶數為12.31條，條帶的大小范圍在100—2000 bp之間。其中以木質素降解相關酶基因為靶基因的15個引物對，共擴增183個條帶，135條為多態性條帶，木蹄層孔菌多態性比率為73.33%，鮑姆鮑姆木層孔菌多態性比率為75.76%，火木層孔菌多態性比率為71.93%，木質素降解酶基因總多態位點比率為73.77%；以纖維素降解相關酶基因為靶基因的14個引物對共擴增174個條帶，120條為多態性條帶，木蹄層孔菌多態性比率為66.04%，鮑姆鮑姆木層孔菌多態性比率為72.31%，火木層孔菌多態性比率為67.86%，纖維素降解酶基因總多態位點比率為68.97%。本研究表明3種白腐菌均顯示較高的木質素和纖維素降解酶基因的遺傳多態性。因此，特異基因的TRAP分子標記方法可用于木材腐朽菌種間遺傳變異研究。

從形態分類學角度看，火木層孔菌和鮑姆鮑姆木層孔菌均為銹革菌科木層孔菌屬菌種，而木蹄層孔菌為多孔菌科層孔菌屬菌種。但從它們木質纖維素酶的胞外表達量和表達趨勢，以及7個木質纖維素酶靶基因擴增產物電泳結果上看，火木層孔菌與木蹄層孔菌多態性條相似度高，木蹄層孔菌與鮑姆鮑姆木層孔菌的條帶相似程度低；而鮑姆鮑姆木層孔菌的特異性條帶多，火木層孔菌與木蹄層孔菌特異性條帶少。原因可能與火木層孔菌與木蹄層孔菌具有相同的寄主有關；同時，從基因進化關系上，木蹄層孔菌與火木層孔菌可能更近，與鮑姆鮑姆木層孔菌進化關系較遠。

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Biological characteristics of three white-rot fungi and genetic diversity of lignocellulose enzyme related genes

YANG Lixia1,2, MA Xinran1, WANG Yuying1, YAN Shaopeng1, WANG Qiuyu1,*

1CollegeofLifeScience,NortheastForestryUniversity,Harbin150040,China2BiologyandEnvironmentalDepartmentHulunbuirCollege,Hulunbuir021000,China

Key Words:white-rot fungi； lignocellulose degradation enzymes； TRAP molecular marker； genetic variation

Abstract：We used three types of white-rot fungi, namely,Fomesfomentarius,Phellinusbaumiibaumii, andPhellinusigniarius, as the study materials. The colony diameters and mycelial dry weights in different culture media were measured to compare their growth characteristics. Further, the activities of five lignocellulose degradation enzymes of the fungi were detected using colorimetry. The results showed that all the fungi were fast growing types: colony growth ofP.baumiibaumiiin Potato Dextrose Agar medium was faster than that ofP.igniariusandF.fomentarius, but mycelial biomass accumulation ofF.fomentariusin liquid Potato Dextrose medium was the highest, followed byP.baumiibaumiiandP.igniarius. The manganese peroxidase (MnP) and laccase (Lac) productions ofF.fomentariuswere higher than that of the other two species, while the lignin peroxidase (Lip) yields ofP.baumiibaumiiandP.igniariuswere higher than that ofF.fomentarius. TheF-test value of three ligninolytic enzymes expressions among the three fungi species was 3.75*, 5.20**and 3.01*for lignin peroxidase, manganese peroxidase and laccase respectively, and the value for manganese peroxidase reaching a highly significant level. The wood chip induced treatment had significant difference from the control, andF-test value for lignin peroxidase, manganese peroxidase and laccase was 3.84*, 4.19*and 5.28*respectively. No clear variations among fungi species for the expressions of endoglucanase and exoglucanase were noted, while the expressions were obviously affected by the carbon source in the medium, and theF-test value was 3.99*and 4.04*for endoglucanase and exoglucanase respectively, both values reached a significant level. Target region amplification polymorphism (TRAP) was used to analyze the lignocellulose degradation enzyme gene polymorphisms in the three white-rot fungi by using 29 sets of selected primers. By using TRAP, we amplified 357 bands, including 255 polymorphic bands, with 71.43% of the total polymorphic loci percentage, where the polymorphic loci percentage of the lignin and cellulose degradation enzyme genes reached 73.77% and 68.97%, respectively. This result indicated that the lignocellulose degradation enzyme genes of the three white-rot fungi have high interspecific variations. Thus, we showed that TRAP molecular markers are useful for the analysis of variations among species of wood-rot fungi at the gene level.

基金項目:國家基礎科學人才培養基金——科研訓練及科研能力提高項目(015-41312309)

收稿日期:2014- 09- 27;

修訂日期:2015- 05- 04

*通訊作者

Corresponding author.E-mail: wqyll@sina.com

DOI:10.5846/stxb201409271911

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