豬丹毒的實驗室診斷及防制

李天立鄭 麗徐明波

（1.吉林省通榆縣動物檢疫站，吉林通榆 137200；2.吉林省通榆縣新華鎮畜牧獸醫站，吉林通榆 137200）

豬丹毒的實驗室診斷及防制

李天立1鄭 麗2徐明波2

（1.吉林省通榆縣動物檢疫站，吉林通榆 137200；2.吉林省通榆縣新華鎮畜牧獸醫站，吉林通榆 137200）

豬丹毒是由紅斑丹毒絲菌感染引起的豬的一種急性熱性傳染病。該傳染病廣泛流行于全世界所有養豬國家，我國也存在。

豬丹毒；防制；診斷

1 病原特征

豬丹毒的病原體為紅斑丹毒菌絲，習慣上又稱為豬丹毒桿菌，是一種革蘭氏染色陽性的纖細的小桿菌。本菌在固體培養基上培養24h，在45°折射光下用實體顯微鏡觀察生長的菌落，有光滑型、粗糙型和介于兩者之間的中間型之分。光滑型菌落表面光滑細致，菌落較小，邊緣整齊，有微藍色虹光；粗糙型，菌落較大，表面粗糙，邊緣不整，呈土黃色。中間型菌落呈金黃色，毒力介于光滑型和粗糙型之間。

2 病理性特征

豬感染紅斑丹毒菌絲的特征性病理變化為急性型的敗血癥全身變化，亞急性型的特征性疹塊變化及慢性型關節炎、心內膜炎和皮膚壞死等。

3 病原學診斷

病原學檢查是診斷豬丹毒較為可靠的方法，可用于病豬的生前和死后檢查。

3.1 病料的采集及處理

無菌采取發病豬的耳靜脈血和切開疹塊擠壓出的血液或滲出液，或者病死豬的心血、肝、脾、腎及淋巴結，慢性病例的心瓣膜增生部和關節液，作為病原檢查的材料，可現地涂片或將病料于冰瓶中送到實驗室做細菌學檢查。

3.2 細菌學檢查

涂片鏡檢：制成的涂片，用瑞特氏或革蘭氏染色法染色，鏡檢。紅斑丹毒絲菌是一種纖細的革蘭氏陽性小桿菌，菌體平直或稍彎，陳舊的培養物可出現革蘭氏染色陰性。在血涂片上，可見到散在于紅細胞之間的菌體，有的出現叢集，還能見到被白細胞吞噬的現象。在臟器的抹片中，菌體常單獨、成對或叢狀排列。在瓣膜增生的纖維組織和關節液涂片中，見到的紅斑丹毒絲菌呈長絲狀，構成絲狀菌團。本菌所表現的絲狀形態與霉菌不同，不分枝。

3.3 細菌分離與鑒定

（1）培養檢查：將上述病料接種于pH 7.6～7.8含有5%健康馬血清的馬丁肉湯培養液、馬丁瓊脂培養基或血液瓊脂培養基，在37℃恒溫箱中培養24～48h。紅斑丹毒絲菌在液體培養基中生長，使培養液變混濁，在4℃冰箱中放置2～3d后，在管底部有乳白色沉淀，輕輕將試管振動，沉淀物似絮狀懸浮于液體中，有絲綢光澤。在馬丁瓊脂培養基上，形成直徑約為0.8～1.0mm的透明呈露滴狀的小菌落，繼續培養至4d以后，少數菌落發生變異，菌落邊緣呈現不規則狀。在血液瓊脂培養基上，培養48h可形成直徑約為1～2mm邊緣整齊的菌落，稍帶藍色光澤，初代分離的菌落呈現輕度的α-溶血。（2）生化特性：將分離到的可疑菌落進行純培養后，做進一步的生化特性等檢查。明膠穿刺培養2～3d后，可沿穿刺線橫向生長，看似試管刷狀，不能液化明膠。接種含1%蛋白胨水和5%馬血清的各種糖類培養基，培養48～96h后觀察結果。可發酵葡萄糖、乳糖、半乳糖和果糖，產酸而不產氣；木糖和蜜二糖可能產酸；一般不發酵蜜三糖、蔗糖、海藻糖、松三糖、鼠李糖、山梨醇、甘露醇、肌醇、甘油、棉子糖、淀粉、菊糖、水楊苷等；能產生硫化氫，不產生靛基質，不分解尿素，石蕊牛乳不發生變化，MR和VP試驗陰性，硝酸鹽還原試驗亦呈陰性。（3）動物試驗：當細菌學檢查做診斷有困難時，可做動物接種試驗做出診斷。小鼠和鴿子對紅斑丹毒絲菌最敏感，而豚鼠頓感。取血液、脾、肝、腎等臟器或病變組織，用生理鹽水制成1：5或1：10的懸液，或用24h肉湯培養物做接種材料。分別以0.2ml經皮下接種小鼠、以1ml的劑量經胸肌接種鴿子，同時以1ml量皮下接種豚鼠作為對照。在接種后2～5d，如果被接種的小鼠和鴿子發生死亡，并從其心血和實質臟器中檢出大量紅斑丹毒絲菌，而同樣接種的豚鼠則不死，也不反應，則證明被檢材料為紅斑丹毒絲菌感染，可做出確診。

5 血清學診斷

用于豬丹毒診斷的血清學方法有多種，如平板、試管、微量凝集試驗和生長凝集試驗，間接血凝、血凝抑制試驗、ELISA和免疫熒光試驗，但現在還沒有一種有效的血清學試驗可用于急性豬丹毒和區別野毒感染和疫苗免疫豬的診斷。這里只就生長凝集試驗和免疫熒光試驗作一概略介紹。

（1）生長凝集試驗 用生長培養物作為凝集原的試驗，其具體作法是在培養豬丹毒液體培養基中按1：40～1：80加入豬丹毒高免血清，再加入卡那霉素400μg/ml及萬古霉素25μg/ml（亦可用0.05%疊氮鈉及0.005%結晶紫代替）作為豬丹毒血清診斷液。取病豬耳尖血1滴或病死豬肝、脾、心血少許，接種其中，37℃培養14～24h。當發現管底出現凝集顆粒或團塊即為陽性反應。

（2）免疫熒光試驗 用異硫氰酸熒光黃標記豬丹毒免疫球蛋白制成熒光抗本，可與病料涂片中的本菌發生特異性結合，在熒光顯微鏡下觀察可見呈亮綠色的菌體。

6 防控措施

預防。疫苗接種：在高發區域及高發季節時，在肉豬斷奶后接種豬丹毒弱毒凍干苗或滅活苗，間隔一個月再接種一次。加強飲水消毒和管理，防止病從口入，特別是使用自然水和淺表水的養殖戶，以及喀斯特地貌的區域也要注意水源的消毒，包括沖欄用水。注意飼料的清潔和衛生，確保飼料無丹毒污染，平時盡量不用濕料。加強舍內衛生的清理，減少沖欄，做好防暑降溫工作，避免出現高溫高濕。加強豬舍周邊雜草及雜物的清理以及消毒，做好滅蠅滅蚊工作，減少吸血昆蟲的傳播。注意病豬和病死豬的處理，防止傳播病原。高危地區適當增加青霉素類藥物的保健。提高警惕，平時仔細巡欄，及時發現及時處理。對豬場的種豬或養戶中大豬突然出現發燒、減料等癥狀的，可直接肌注青霉素400萬單位/頭做治療性診斷。

治療。首選治療藥物為青霉素，藥效快。如果發病豬為急性型，應采用短效青霉素大劑量注射，400～600萬單位/頭（即3～4支/頭），每日注射兩次，持續四天。如非急性發病，可采用注射長效青霉素，兩天一次，連續三次，豬群可全群用1000～1200PPM阿莫西林飲水或拌料。四環素對本病也有一定的效果，500ppm的劑量拌料可用于預防保健。

［1］ 王曉虎，范秀波，袁寶.豬丹毒的診斷及防制［J］.吉林畜牧獸醫，2006，27（11）：36-37.