急性腦梗死患者血漿內(nèi)源性硫化氫、同型半胱氨酸水平變化

馮亞忠，李威，陳嬌，宋熙文，杜金龍，吳秀娟

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院奉城分院，上海 201411)

急性腦梗死患者血漿內(nèi)源性硫化氫、同型半胱氨酸水平變化

馮亞忠，李威，陳嬌，宋熙文，杜金龍，吳秀娟

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院奉城分院，上海 201411)

目的 觀察急性腦梗死患者血漿內(nèi)源性硫化氫(H2S)、同型半胱氨酸(Hcy)水平的變化，并探討其意義。方法 106例急性腦梗死患者(腦梗死組)在入院后次日、第3天、第8天清晨空腹采集肘靜脈血，90例健康體檢者(對(duì)照組)在體檢日清晨空腹采集肘靜脈血；采用 ELISA測(cè)檢測(cè)血漿H2S，采用循環(huán)酶法檢測(cè)血漿Hcy。結(jié)果 腦梗死組入院后次日、第3天、第8天血漿H2S水平分別為(31.72 ±5.39)、(24.35±4.31)、(33.35±5.42)μmol /L，與對(duì)照組的(52.68 ±8.73)μmol /L相比，P均<0.05。腦梗死組入院后次日、第3天、第8天血漿Hcy水平分別為(23.12±6.45)、(30.12±6.53)、(22.12±6.41)μmol /L，與對(duì)照組的(10.86±2.37)μmol /L 相比，P均<0.01。腦梗死組入院后第3天血漿H2S水平最低，與另兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的H2S水平相比，P均<0.05。腦梗死組入院后第3天血漿Hcy水平最高，與另兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的Hcy水平相比，P均<0.05。腦梗死組三個(gè)時(shí)間點(diǎn)的血漿H2S水平與Hcy水平呈負(fù)相關(guān)(r分別為- 0.637 2、 - 0.631 1、- 0.629 8,P均<0.01 )。結(jié)論 急性腦梗死患者血漿H2S水平明顯降低, Hcy水平明顯升高，以入院后第3天為著。血漿H2S水平降低可能參與了高同型半胱氨酸血癥致急性腦梗死的發(fā)病過程。

腦血管病；腦梗死；硫化氫；同型半胱氨酸

外源性硫化氫(H2S)是一種具有臭雞蛋氣味的無色有毒氣體。近年來研究[1，2]發(fā)現(xiàn)，機(jī)體自身還可以產(chǎn)生H2S,即內(nèi)源性H2S。內(nèi)源性H2S主要是由胱硫醚-β-合酶(CBS) 、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和半胱氨酰轉(zhuǎn)移酶催化L-半胱氨酸生成，其中CBS 是中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生H2S 的酶。L-半胱氨酸是在同型半胱氨酸(Hcy)代謝過程中產(chǎn)生的，缺血性腦血管病患者多存在高同型半胱氨酸血癥(HHcy)。目前研究[ 3 ， 4 ]發(fā)現(xiàn), H2S具有舒張血管平滑肌、降低血壓、抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖及抗氧化應(yīng)激等多種效應(yīng) ,參與多種心腦血管病的病理生理過程，被認(rèn)為是繼一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)之后的另一種新型氣體信號(hào)分子[5,6]。本研究觀察了急性腦梗死患者血漿H2S、Hcy水平的變化。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2013年3 ～2015年12月上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院奉城分院收治的急性腦梗死患者106例(腦梗死組),男56例,女50例；年齡為(65.5±8.1)歲；發(fā)病72 h之內(nèi)；均符合全國(guó)第四屆腦血管病會(huì)議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7],并經(jīng)顱腦CT或MRI檢查證實(shí)。健康體檢者90例(對(duì)照組),為同期在本院接受健康體檢者,男48例, 女42例；年齡為(62.4±7.3)歲。兩組性別、年齡有可比性。

1.2 標(biāo)本采集 腦梗死組在入院后次日、第3天、第8天清晨空腹采血，對(duì)照組在體檢日清晨空腹采血，均采集肘靜脈血4 mL，4 000 r/min 離心5 min，取血漿，-70 ℃冰箱保存待檢。

1.3 血漿H2S測(cè)定 采用ELISA法。試劑盒由上海江萊生物科技有限公司提供。使用全自動(dòng)酶標(biāo)儀，于450 nm波長(zhǎng)處讀取吸光度值,并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到相應(yīng)血漿H2S水平。

1.4 血漿Hcy測(cè)定 采用循環(huán)酶法。檢測(cè)儀器用美國(guó)雅培公司生產(chǎn)的C16000 全自動(dòng)生化分析儀。試劑由北京九強(qiáng)金斯?fàn)柟咎峁?/p>

2 結(jié)果

腦梗死組入院后次日、第3天、第8天血漿H2S水平分別為(31.72±5.39)、(24.35±4.31)、(33.35±5.42)μmol /L，與對(duì)照組的(52.68±8.73)μmol /L相比，P均<0.05。腦梗死組入院后次日、第3天、第8天血漿Hcy水平分別為(23.12±6.45)、(30.12±6.53)、(22.12±6.41)μmol /L，與對(duì)照組的(10.86 ±2.37)μmol /L 相比，P均<0.01。腦梗死組入院后第3天血漿H2S水平最低，與另兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的H2S水平相比，P均<0.05。腦梗死組入院后第3天血漿Hcy水平最高，與另兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的Hcy水平相比，P均<0.05。腦梗死組三個(gè)時(shí)間點(diǎn)的血漿H2S水平與Hcy水平呈負(fù)相關(guān)(r分別為-0.637 2、-0.631 1、-0.629 8,P均< 0.01)。

3 討論

在生理狀態(tài)下人腦組織中即可檢測(cè)到H2S[8]，提示H2S 可能參與了生理狀態(tài)下機(jī)體腦功能的調(diào)節(jié)。H2S 為具有類似NO和CO特征的氣體信號(hào)分子：可自由通過細(xì)胞膜，發(fā)揮作用不依賴質(zhì)膜受體；可由特定內(nèi)源性酶催化合成，受不同代謝途徑的調(diào)控；具有特定細(xì)胞和分子作用的靶點(diǎn)。H2S 已經(jīng)被確認(rèn)為繼NO 和CO 之后的第三種氣體信號(hào)分子，尤其是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，越來越多的證據(jù)表明H2S是一種新型的神經(jīng)調(diào)節(jié)因子和信號(hào)傳遞分子[9]。內(nèi)源性H2S 主要由 CBS 和 CSE催化合成，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中CBS /H2S 廣泛表達(dá)，并通過清除氧自由基、抗氧化應(yīng)激、擴(kuò)張腦血管等作用參與神經(jīng)元的保護(hù)[10]。但H2S 在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的作用研究仍處于初始階段[11]。

本研究發(fā)現(xiàn),腦梗死組的血漿H2S水平較對(duì)照組明顯低 , 而血漿Hcy水平則明顯高，與文獻(xiàn)[ 12 ]報(bào)道一致。文獻(xiàn)[ 12 ]報(bào)道血漿H2S水平的降低不僅與腦梗死的病情嚴(yán)重程度、血管動(dòng)脈粥樣硬化病變情況相關(guān),而且與腦梗死危險(xiǎn)因素高血壓、糖尿病密切相關(guān),有望成為缺血性腦血管病新的臨床監(jiān)測(cè)指標(biāo)。腦梗死患者血漿Hcy水平升高已經(jīng)被認(rèn)為是腦血管疾病的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因素,可促進(jìn)血管動(dòng)脈粥樣硬化和血栓的形成[13]。

作為影響急性腦梗死的兩個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因素，高血壓和高Hcy水平在H型高血壓患者身上具有協(xié)同作用。這是因?yàn)楦哐獕夯颊逪cy水平的升高導(dǎo)致氧化反應(yīng)增強(qiáng)，生成的H2O2直接導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞損傷和動(dòng)脈粥樣硬化的加劇。另外，高Hcy水平可激發(fā)血小板功能，加速血栓的形成。再者，Hcy水平的升高還會(huì)造成腦細(xì)胞缺血缺氧、腦細(xì)胞線粒體功能障礙的加重[14]。Hcy是蛋氨酸的中間代謝產(chǎn)物,而H2S是蛋氨酸代謝的終產(chǎn)物,二者都與CBS的活性及表達(dá)有關(guān)。HHcy多是由于Hcy代謝過程中的輔酶葉酸、維生素B12及維生素B6缺乏所引起, 部分HHcy是由于CBS基因突變酶活性降低所致。其中維生素B6是Hcy轉(zhuǎn)硫途徑生成H2S的輔酶,因而當(dāng)維生素B6缺乏時(shí),血漿Hcy降解受阻的同時(shí), H2S生成也會(huì)減少。因此,腦梗死患者血漿H2S水平的降低可能與維生素B6缺乏、HHcy有關(guān)。此外, 腦缺血再灌注過程中NO大量生成, NO可結(jié)合到CBS的亞鐵血紅素部分,抑制酶的活性,從而使H2S生成減少[15]。對(duì)于大面積腦梗死患者，腦組織大量壞死，包括神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞壞死，CBS減少，也可導(dǎo)致腦組織H2S的生成減少。推測(cè)H2S在參與抗氧化應(yīng)激神經(jīng)保護(hù)作用過程中也會(huì)被部分消耗。而部分患者血漿H2S水平升高，考慮可能為機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)所致，實(shí)際上腦組織H2S的生成仍是減少的[16]。本研究發(fā)現(xiàn),腦梗死組在入院后的8 d內(nèi)，入院后第3天血漿H2S水平最低、Hcy水平最高，可能與此時(shí)腦缺血再灌注損傷較重，前述代謝障礙加重有關(guān)。而入院后第8天，病程已過急性期，進(jìn)入亞急性期，血漿H2S、Hcy 水平逐步恢復(fù)到入院后次日水平(但仍未達(dá)到健康對(duì)照組水平)，說明腦組織代謝功能逐步恢復(fù)，這與腦組織缺血缺氧后自我修復(fù)的時(shí)限一致。

本研究還發(fā)現(xiàn),腦梗死患者入院后次日、第3天、第8天的血漿H2S水平與Hcy 水平均呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。這一結(jié)果提示低血漿H2S水平可能參與了HHcy導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化和血栓形成的過程[17]。有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[18]發(fā)現(xiàn)，給予外源性H2S可明顯升高大鼠腦組織H2S水平，縮小大鼠腦梗死體積，表明外源性H2S對(duì)大鼠局灶性腦缺血損傷具有治療作用。我們推測(cè)，補(bǔ)充葉酸、維生素B6，可能會(huì)降低機(jī)體Hcy 水平，提高其血漿H2S水平,進(jìn)一步降低急性腦梗死的患病風(fēng)險(xiǎn)。

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上海市奉賢區(qū)科委科技發(fā)展資金資助項(xiàng)目(20121103)。

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.43.017

R743.3

B

1002-266X(2016)43-0055-03

2016-07-25)