miRNAs與RAS-MAPK信號通路在腫瘤發生發展中的研究進展

丁 苗，涂 萍

(1.江西中醫藥大學2014級研究生，南昌 330004； 2.南昌市第三醫院內分泌代謝科，南昌 330009)

miRNAs與RAS-MAPK信號通路在腫瘤發生發展中的研究進展

丁 苗1，涂 萍2

(1.江西中醫藥大學2014級研究生，南昌 330004； 2.南昌市第三醫院內分泌代謝科，南昌 330009)

miRNAs參與廣泛的生理和病理過程,如個體發育，細胞增殖、凋亡、周期、遷移、侵襲等，其在物種進化中相當保守。許多miRNAs被認為在腫瘤中存在差異表達。高度保守的單體小分子三磷酸鳥苷酶-絲裂原活化蛋白激酶(RAS-MAPK)信號途徑涉及廣泛的細胞過程，包括細胞的分化、增殖和存活。miRNAs調控RAS-MAPK在腫瘤發生發展中起著重要作用，但具體機制未被完全闡明。miRNAs可考慮作為潛在的遺傳診斷、預后或作為藥物靶點治療的標志物。

RAS-MAPK信號通路； miRNAs； 腫瘤

1 RAS-MAPK信號通路與腫瘤

1.1 RAS-MAPK信號通路概述

絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)是一組能被不同的細胞外刺激，如細胞因子、神經遞質、激素、細胞應激及細胞黏附等激活的絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶。MAPK通路的基本組成是一種從酵母到人類都保守的三級激酶模式，包括MAPK激酶激酶(MAP kinase kinase kinase，MKKK)、MAPK激酶(MAP kinase kinase，MKK)和MAPK，這三種激酶能依次被激活，共同調節著細胞的生長、分化，對環境的應激適應、炎癥反應等多種重要的細胞生理病理過程[1]。RAS-RAF-MEK1/2-ERK1/2 MAPK途徑是其最經典最重要的信號轉導途徑之一，其活化過程也是根據 MAPK 三級激酶模式進行的。首先，單體小分子三磷酸鳥苷酶(RAS)與三磷酸鳥苷(GTP)結合，轉化為激活型RAS，再與絲氨酸/蘇氨酸特異性蛋白激酶(RAF)結合并使之磷酸化,活化了的RAF再激活絲裂原活化蛋白激酶(MEK)，MEK經磷酸化最后激活胞外信號調節激酶(ERK)，活化絲裂原活化蛋白激酶的ERK入核,啟動相應轉錄子的轉錄。細胞外刺激信號借此途徑傳至細胞內,引起一系列細胞反應,從而調控細胞的增殖、分化、凋亡和轉移等功能。

1.2 RAS-MAPK信號通路與腫瘤

RAS-MAPK信號通路(也稱為RAS-RAF-MEK-ERK通路)在細胞的分裂、存活、遷移以及腫瘤侵襲能力等方面有重要的調節作用,主要參與各種生長因子、細胞因子、絲裂原以及激素受體活化后的信號轉導,參與多種腫瘤細胞的生存和增殖。這一途徑的異常激活常見于人類腫瘤中。30%的腫瘤類型存在RAS基因突變，突變在上游調節器和下游效應器也很常見[2]。例如，大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)被證實在超過90%的胰腺導管腺癌(PDAC)中存在體細胞突變[3]。鼠類肉瘤濾過性毒菌致癌同源體B1(BRAF)和成神經細胞瘤鼠肉瘤癌基因(NRAS)在83%的黑色素瘤中有突變出現[4]。67%的早期前體T細胞急性淋巴細胞白血病存在RAS-MAPK信號通路中NRAS、KRAS、BRAF、神經纖維瘤Ⅰ型基因(NF1)和蛋白酪氨酸磷酸酶非受體型11(PTPN11)基因的突變[5]。55%的結腸癌和直腸癌有KRAS、NRAS或BRAF的突變[6]。KRAS、表皮生長因子受體(EGFR)、NF1和BRAF在肺腺癌中突變率分別為27%、17%、11%和3%[7]。

2 miRNAs與腫瘤

miRNAs是分子量在18～24核苷酸高度保守的非蛋白質編碼RNA,具有在翻譯水平調控基因表達的功能。它在物種進化中相當保守，參與廣泛的生理和病理過程,如個體發育，細胞增殖、凋亡、周期、遷移、侵襲，免疫逃避和耐藥性等。許多miRNAs被認為在腫瘤中存在差異表達：上調可作為原癌基因，下調作為腫瘤抑制基因[8-9]。

根據對肺癌患者miRNAs的研究發現，miR-29b[10]、let-7[11]、miR-145[12]、miR-128b[13]等在肺癌中的表達下調，而miR-21表達上調且通過抑制抑癌因子人第10號染色體缺失的磷酸酶(PTEN)起作用。miRNAs的這些功能主要是通過其對靶基因的作用來體現，其調控因子包括表皮生長因子受體(EGFR)、KRAS、細胞周期因子(CCND1)，細胞凋亡因子(BCL2)等。亦有研究[14]表明miR-21在胃癌中是上調的，可促進胃癌細胞的增殖，抑制胃癌細胞的凋亡，通過負調節腫瘤抑癌基因人程序性細胞死亡因子4(PDCD4)的翻譯作用來促進胃癌的發生發展。miR-21還通過作用于抑癌基因原肌球蛋白1(TPM1)促使胃癌向別處發生浸潤和轉移[15]。miR-106a在胃癌中表達上調，并且可作為診斷胃癌的潛在生物標志物，其表達水平與胃癌的發生發展、惡性程度、腫瘤的遠處轉移及預后等有關[16]。Chen 等[17]發現miR-421在鼻咽癌(NPC)中表達上調，并且通過下調下游的叉頭樣轉錄因子04(FOX04)的表達水平可提高NPC細胞增殖活性，并抑制癌細胞的凋亡，它還與人類多種惡性腫瘤的發生發展相關，如胃癌、胰腺癌、肝癌及膽道癌等。因此miR-421有望作為新的治療腫瘤的潛在靶點。

3 miRNAs調控RAS-MAPK信號通路在腫瘤中的作用機制

據統計，15%～20%的肺腺癌存在EGFR突變，表皮生長因子受體靶向酪氨酸激酶抑制劑的相關研制為治療肺腺癌提供了一個新的途徑[18]。有些miRNAs被認為是EGFR直接監管機構，在各種腫瘤類型中可作為腫瘤的抑制基因。Weiss等[19]發現在非小細胞肺癌(NSCLC)中miR-128b能通過靶向作用于EGFR抑制相關信號通路，從而抑制腫瘤的轉移和浸潤，故miR-128b在NSCLC中起到抑癌基因的作用。miR-128b的缺失將相當于失去腫瘤抑制基因，將會促進EGFR的表達，進而導致腫瘤的發生。

當一些腫瘤細胞生長因子(或其受體)的表達或功能出現異常時,生長因子與細胞表面受體結合后，細胞內生長因子受體結合蛋白2(Grb2)可以激活RAS-MAPK通路。與胃正常組織相比胃癌組織中的miR-433下調，并且靶向作用于Grb2[20]。MiR-378也被證實靶向作用于Grb2。miR-378在心肌細胞中過度表達，且可通過抑制RAS-MAPK信號通路來抑制心肌細胞增殖[21]。除了作用于Grb2，miR-378還直接靶向作用于RAS-MAPK信號通路的3個成員：絲裂原活化蛋白激酶1(MAPK1，別名ERK2)、胰島素樣生長因子1受體(IGF1R)和激酶RAS抑制因子1(KSR1)[22]。miR-378在不同類型的腫瘤中表達下調，如前列腺癌[23]和胃癌[24]。MiR-433和miR-378在腫瘤中表達下調，說明它們是通過提高Grb2的活性使RAS-MAPK信號通路的活性被異常激活，從而導致腫瘤的發生。

牛曉兵等[25]研究表明，miR-143可通過調節KRAS、p-ERK1/2和細胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表達抑制RAS-MAPK信號通路激活，從而抑制前列腺癌細胞的增殖和遷徙。miR-124在膠質母細胞瘤(GBM)干細胞與腫瘤中的表達下調。miR-124由mir-124-1，2和3組成，它們從3個不同的染色體位點轉錄，但有相同的種子序列也可能有相同的靶點。miR-124在GBM中靶向NRAS基因，但miR-124也被證明靶向另一個RAS-MAPK信號通路效應器SOS1[26]。miR-143也證明直接靶向NRAS，可能在神經膠質瘤中起著腫瘤抑制作用[27]。

4 miRNAs與RAS-MAPK信號通路在治療腫瘤中的應用

miRNAs與腫瘤之間的聯系為腫瘤的治療提供了一種新方案，改變miRNAs的結構，如敲減或敲除癌基因的相關miRNAs，以抑制其過度表達所致的腫瘤生長；對因miRNAs表達不足所致的腫瘤，可通過將相關miRNAs基因敲入至癌細胞達到抑癌作用。抑制miRNAs的活動可使用microrna抑制劑和寡聚物,包括RNAs、DNA、DNA類似物(microrna的反義療法)、小分子抑制劑、microrna海綿或microrna屏障[28]。明確miRNAs所監管的致癌基因對選擇靶向制劑、開發新型療法,或者發展疾病的早期生物標志物等方面有深遠的意義。

RAS-MAPK作為腫瘤中常見的通路之一，與miRNAs之間的聯系提示miRNAs可通過調節RAS-MAPK信號通路為腫瘤的治療提供新靶點。Jiang 等[29]研究發現，曲古抑菌素A(TSA)可能具有廣譜抗癌作用，且TSA與miR-19a、miR-19b、miR-23b的關聯關系在腫瘤中出現的頻率最高，通過對這3個miRNAs共同的靶基因進行通路分析發現，它們顯著富集在MAPK和哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信號通路中，這提示TSA可能通過調控這兩個信號通路發揮抗癌作用。

5 結語

RAS-MAPK信號通路在腫瘤的發生、發展以及轉移過程都起著至關重要的作用，其信號傳導途徑非常精確和復雜,不同的刺激活化會傳遞不同的訊息,發生不同的生物學效應。miRNAs可作為致癌基因也可作為抑癌基因。臨床上，miRNAs可能作為診斷和評估預后的生物標志物，且血漿中循環的miRNAs可用于早期發現腫瘤。研究miRNAs在RAS-MAPK信號傳導通路中的作用，將有助于進一步了解腫瘤的發生、發展機制，為腫瘤的治療提供科學、準確的思路以及更加有效的方案，為尋找新的抗腫瘤藥物的靶點提供依據。隨著對各種信號通路的深入研究，人類腫瘤的發病機制也逐漸被闡明，相信這些研究都將為腫瘤的治療帶來新的契機。

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(責任編輯：羅芳)

Research Progress in miRNAs and RAS-MAPK Signaling Pathway in Occurrence and Development of Tumors

DING Miao1,TU Ping2

(1.2014GradeofGraduateofJiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Nanchang330004,China; 2.DepartmentofEndocrinologyofNanchangThirdHospital,Nanchang330009,China)

MicroRNAs (miRNAs) are involved in a wide range of physiological and pathological processes, such as individual development, cell proliferation, apoptosis, cycle, migration and invasion. Many miRNAs are thought to be differentially expressed in tumors. The highly conserved RAS-mitogen activated protein kinase (MAPK) signaling pathway is involved in a wide range of cellular processes, including differentiation, proliferation and survival. The miRNAs play an important role in the occurrence and development of tumors by targeting the RAS-MAPK. However, the specific mechanisms leading to miRNAs deregulation and functional consequences have not been fully elucidated. The miRNAs can be considered as potential markers for genetic diagnosis, prognosis or targeting treatment.

RAS-MAPK signaling pathway; miRNAs; tumors

2016-06-17

國家自然科學基金(81260133)；上海市糖尿病重點實驗室開放課題資助項目(SHKLD-KF-1302)

丁苗(1990—)，女，碩士研究生，主要從事內分泌學的研究。

涂萍，主任醫師，E-mail:tuping8877@126.com。

R730.2

A

1009-8194(2016)10-0093-03

10.13764/j.cnki.lcsy.2016.10.036