復(fù)方阿莫西林緩釋干混懸劑的初步穩(wěn)定性及有關(guān)物質(zhì)測定方法研究

●劉暢 李壯 熊曉紅 卜鑫玨 簡白羽 董巖

復(fù)方阿莫西林緩釋干混懸劑的初步穩(wěn)定性及有關(guān)物質(zhì)測定方法研究

●劉暢 李壯 熊曉紅 卜鑫玨 簡白羽 董巖

目的：初步考察自制復(fù)方阿莫西林緩釋干混懸劑的穩(wěn)定性，建立測定該制劑中有關(guān)物質(zhì)的HPLC方法。方法：利用影響因素試驗初步考察高溫、高濕對復(fù)方阿莫西林緩釋干混懸劑穩(wěn)定性的影響；利用自身對照法，色譜柱ODS-C18柱，流動相為A相-B相（75:25），其中A相為0.01mol/l磷酸二氫鉀（pH6），B相為0.01mol/l磷酸二氫鉀-乙腈（20:80），流速：1mL/min，檢測波長239nm，進樣20μL。結(jié)果：高溫、高濕條件下阿莫西林、對乙酰氨基含量下降，雜質(zhì)含量增加。結(jié)論：自制復(fù)方阿莫西林緩釋干混懸劑受濕度、溫度影響較大，本文建立色譜方法可用于復(fù)方阿莫西林緩釋干混懸劑有關(guān)物質(zhì)的測定。

阿莫西林；干混懸劑；穩(wěn)定性；有關(guān)物質(zhì)

0 前言

抗生素是臨床治療化膿性扁桃體炎的主要治療方法[1]，阿莫西林是其中的常用藥，臨床上可聯(lián)合應(yīng)用對乙酰氨基酚可緩解發(fā)病時的高熱癥狀。研究組前期已制備了兩種藥物的復(fù)方緩釋干混懸劑，經(jīng)體外釋放度實驗證實具有明顯的緩釋效果。為進一步保證制劑質(zhì)量本文對該制劑在高溫、高濕條件下的穩(wěn)定性進行考察，并建立用于有關(guān)物質(zhì)測定的HPLC法，用于該制劑的質(zhì)量控制。

1 試藥

阿莫西林（武漢拉那白醫(yī)藥化工有限公司）；對乙酰氨基酚（河北冀衡藥業(yè)有限公司）；乙基纖維素45cp（武漢拉那白醫(yī)藥化工有限公司）；羥丙甲纖維素（安徽山河藥用輔料股份有限公司）；黃原膠（湖北葛店人福藥用輔料有限公司）；其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 復(fù)方阿莫西林緩釋干混懸劑的制備

以EC45cp為載體，按EC：阿莫西林=3:1比例，以丙酮、乙醇為溶劑，利用溶劑-熔融法分別制備阿莫西林、對乙酰氨基酚固體分散體。蒸去溶劑將熔融物倒在冷卻玻璃板上，真空干燥24h，粉碎，過篩，避光低溫保存。將處方量阿莫西林固體分散體、對乙酰氨基酚固體分散體、HPMC（15%）、黃原膠（4%）和乳糖（6%）放入乳缽中，研勻，過篩，即得復(fù)方阿莫西林緩釋干混懸劑，低溫避光保存。

2.2 有關(guān)物質(zhì)的HPLC方法

2.2.1 色譜條件：

色譜柱：ODS-C18柱，流動相為A相-B相（75:25），其中A相：0.01mol/ l磷酸二氫鉀（pH6）；B相：0.01mol/l磷酸二氫鉀-乙腈（20:80），流速：1mL/min，檢測波長239nm，進樣體積20μL。

2.2.2 溶液的制備：

供試品溶液：精密稱取干混懸劑適量（約相當(dāng)于阿莫西林25mg，對乙酰氨基酚8.125mg）， A相溶解定容，制成每1mL中含有阿莫西林0.5mg，對乙酰氨基酚0.1625mg的溶液，過濾。

對照品溶液：精密稱取阿莫西林25mg和對乙酰氨基酚8.125mg，同法配置定容至50mL。

阿莫西林對照品溶液：精密稱取阿莫西林25mg，同法配置定容至50mL。

對乙酰氨基酚對照品溶液的配置：精密稱取乙酰氨基酚8.125mg，同法配置定容至50mL。

2%自身對照溶液的配置：精密量取同一批干混懸劑7mg，同法配置定容至50mL。

空白輔料溶液的配置：精密稱取乙基纖維素198.75mg、HPMC53mg、黃原膠14mg、乳糖18mg，流動相溶解定容至50mL。

2.2.3 測定方法：對照品溶液進樣 20μL，調(diào)節(jié)檢測器靈敏度，使對乙酰氨基酚峰高約為滿量程25%。2%自身對照溶液與樣品各進樣20μL，記錄色譜圖和峰面積，記錄的色譜圖保留時間約為對乙酰氨基酚保留時間的4倍。按外標(biāo)峰面積法計算樣品中雜質(zhì)總的峰面積以及最大單個質(zhì)峰面積與2%自身對照溶液兩個主峰面積和的比值，分別計算總雜質(zhì)和最大雜質(zhì)所占供試品中總峰面積的比例。供試品色譜圖中任何小于對照溶液兩個主峰面積和0.05倍的峰可以忽略不計。

2.2.4 系統(tǒng)適用性試驗： 2%自身對照溶液、供試品溶液、阿莫西林對照品溶液、對乙酰氨基酚對照品溶液及空白輔料溶液各進樣20μL，記錄色譜圖。阿莫西林保留時間2.651min，對乙酰氨基酚保留時間4.351min，分離度良好，且空白輔料無影響。

2.2.5 線性關(guān)系考察：采用自身對照法在假設(shè)所有物質(zhì)響應(yīng)因子相同的前提下，考察有關(guān)物質(zhì)在自身對照溶液濃度附近變化時的線性規(guī)律。取阿莫西林原料藥細粉適量，加A相稀釋后分別制成含阿莫西林1.200μg/ mL～24.00μg/mL的一系列溶液，按上述色譜條件進樣后記錄峰面積。阿莫西林濃度對峰面積作圖，得算線性回歸方程y=10187x+9656.7 （r=0.9997），線性關(guān)系良好，即有關(guān)物質(zhì)濃度在此濃度范圍內(nèi)符合線性關(guān)系。

2.2.6 精密度及穩(wěn)定性試驗：將供試品溶液在上述色譜條件下連續(xù)進樣6次，記錄雜質(zhì)總的峰面積以及最大雜質(zhì)峰面積，并計算平均值及RSD值。將供試品溶液在室溫下依次在 0，1，2，3h 進樣，記錄峰面積，計算3h內(nèi)最大單個雜質(zhì)峰面積、總雜質(zhì)峰面積的平均值及RSD值。RSD值均小于2，表明精密度及穩(wěn)定性良好。

2.3 復(fù)方制劑穩(wěn)定性的考察

2.3.1 高溫對穩(wěn)定的影響：取干混懸劑適量，置于培養(yǎng)皿中攤成薄層，開口置60℃恒溫干燥箱，于第五、十天取樣，與0天供試品比較，外觀變黃有黏結(jié)，隨時間延長主藥含量均下降，有關(guān)物質(zhì)峰面積增大。

2.3.2 高濕對穩(wěn)定的影響：取干混懸劑適量，置于培養(yǎng)皿中攤成薄層，開口置恒濕密閉容器中（濕度：75%±5%；溫度：25±2℃），于第五、十天取樣，與0天的供試品比較，外觀變黃，隨時間延長主藥含量均下降，有關(guān)物質(zhì)峰面積增大

3 討論

在有關(guān)物質(zhì)測定時對色譜條件進行了創(chuàng)新性的改進，由于無系統(tǒng)適用性對照品，故并未對有關(guān)物質(zhì)進行具體確定。由于本制劑為創(chuàng)新制劑，藥典中沒有明確規(guī)定有關(guān)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)，故在穩(wěn)定性的初步考察時對有關(guān)物質(zhì)的考察只與0天同一批干混懸劑進行有關(guān)物質(zhì)含量的比較，由此來判定高溫高濕對制劑穩(wěn)定性的影響。高溫條件對復(fù)方阿莫西林緩釋干混懸劑穩(wěn)定性有影響，且高溫影響更大。尤其是阿莫西林在濕熱條件下很容易降解，樣品外觀顏色開始變化。所以在制劑的儲藏過程中一定要避免高溫、高濕等條件。

（作者單位：齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院）

[1] 陳永超.阿莫西林克拉維酸鉀對小兒化膿性扁桃體炎的療效[J].臨床醫(yī)學(xué), 2016 , 36 (4):115-116.

齊齊哈爾市科技局社會發(fā)展攻關(guān)項目（SFZD-2013019）

劉暢（1982～），女，碩士研究生，講師，研究方向為藥物制劑。