種公雞精液質量檢測規范與選育標準

魏曉冉，石鳳英，張長寶，高長春

（北京市華都峪口禽業有限責任公司，國家蛋雞產業技術體系平谷綜合試驗站，北京平谷101206）

種公雞精液質量檢測規范與選育標準

魏曉冉，石鳳英，張長寶，高長春

（北京市華都峪口禽業有限責任公司，國家蛋雞產業技術體系平谷綜合試驗站，北京平谷101206）

對于蛋種雞企業來說，種公雞的精液質量直接影響著種蛋的受精率、雛雞質量和種雞場的經濟效益。然而種公雞的精液質量在個體之間存在很大差異，據統計只有1/3～1/2（少數品種可達到2/3）的公雞其精液質量是良好的，所以對精液質量進行檢測，挑選優秀的種公雞用于生產，是保證種蛋受精率、雛雞質量的重要措施。對精液質量進行檢測，淘汰精液質量不合格的雞只，降低公母比，降低飼養成本，是保證種雞場經濟效益的必要措施。

目前，精液質量檢測與選育工作在實際生產中并未廣泛推廣使用，究其原因主要有三點：一是精液質量檢測程序復雜，檢測設備要求高，檢測速度慢、成本高，難以進行大規模的推廣；二是精液質量選育項目和選育標準模糊不清，即使對精液質量進行檢測，無法進行選育，失去了精液質量檢測的意義；三是生產單位對精液質量檢測和選育的意義認識不到位，忽略精液質量檢測和選育工作。因此，需要建立精液質量檢測的技術規范以及選育標準，實現精液質量檢測和選育工作在生產中的應用與推廣。

本文介紹一種操作簡單、快速、準確的精液質量檢測規范及選育標準，以供大家參考。

1 精液質量檢測器材

1.1 精液質量檢測與分析系統該系統根據種公雞的精子特點及分析項目專門定制，精子全自動分析軟件對精子圖像數學形態化識別后，可自動對每一個精子分配一個唯一標號，同時采用綠色線對其運動軌跡進行精確跟蹤識別，以取得比較精確的運動參數和統計學參數。檢測項目包括精子密度、精子活力、精子運動軌跡、精子總數等，刪去路徑速度、曲線速度、直線速度，縮短了檢測和分析的時間，提高了檢測和分析效率。同時增加單位有效精子數、是否淘汰等項目，并可分品種、分品系設定精液質量選擇標準，更加科學、嚴謹。

1.2 一次性使用精子計數板計數池深要求為60μm，保證形成單層、獨立的精子細胞，不發生重疊、堆積等現象，使精子在同一焦面上清晰成像，同時又不影響精子水平方向的自由運動。一次性精子計數板相對于普通的載玻片和蓋玻片，具有精子自動均衡吸入的功能,不會產生氣泡，避免手工壓片易產生氣泡、厚度不一致的缺點，易于控制，使精子在同一平面上清晰成像，方便分析。

1.3 其他儀器1.0ml的標準離心管（根據日檢測數量確定使用數量，管重量為0.9g）；14ml玻璃集精管；量程100μl移液器；最小刻度為0.01g的電子秤（稱精液的重量，根據精液重量判斷精液量的多少）。

2 精液質量檢測項目

2.1 精液量用1.0ml離心管收集精液后，用最小刻度為0.01g的電子稱進行稱量，根據精液的重量推測精液量的多少。此方法比使用帶有刻度的移液管進行測量更加簡單，適合生產單位挑選種公雞的精液量。不同品種和個體的公雞，精液量有所差異，同時還受到采精人員、采集手法、公雞使用頻率等多種因素的影響。一般公雞的射精量在0.4ml以上，精液量低于0.4ml的雞只建議淘汰。

2.2 外觀檢查精液采集完成后，需要對精液的外觀進行檢查，并記錄在相應的表格中。正常的精液應該是乳白色、不透明的乳狀液體。若顏色出現異常，不再進行鏡檢。若精液呈黃褐色則是采精過程被糞便污染；精液呈粉紅色，說明精液中混有血液，可能是采集手法、采精力度存在問題，采用過程中需要多加注意；精液中有白色的絮狀物，在精液中混有尿酸鹽；如連續3d出現此種情況，該種公雞建議淘汰。

2.3 精子密度精子密度指每毫升精液中精子的數量。在檢測中多采用粗略鏡檢法，根據顯微鏡下精子群體的形狀，粗略判斷精子密度的方法，此種方法并未對精子進行計數，故在數據統計中存在較大的誤差，為了保證精子密度的準確性和可靠性，不建議采用此種方法，可采用精子計數法，此方法要求對精子進行編號和計數，準確性更高，采用精子質量檢測和分析系統進行統計，方便快捷，可以進行推廣使用。

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2.4 精子活力精子活力是指37℃環境下，前進運動精子數占總精子數的百分比。家禽精子和卵子的受精部位在輸卵管壺腹部，即精子進入生殖道后仍需向受精部位運行，其動力一是依靠生殖道的收縮輔助，另一個是精子自身的活動力，同時也需要經過一個“獲能”的變化，因此要完成上述全部過程，對輸入母雞生殖道內的精液中必須有一定比例生命力強的精子，生命力強的精子在顯微鏡下的表現是呈直線運動，故精子活力是鑒定精液質量最主要的指標之一。

2.5 單位有效精子數1ml精液中含有直線前進運動的精子數，是反映1ml的精液中含有具有授精能力的精子情況，是由精子密度與精子活力乘積直接反應，是鑒定精液質量的最直接指標之一。

3 精液質量檢測流程

3.1 準備集精管和采精離心管將集精管和離心管用80℃的溫水清洗三次，將水滴甩干，烤箱中用75℃的溫度烘烤30min（集精管內壁不出現水氣為止），待烤箱和玻璃管、離心管冷卻后，將集精管和離心管放在密閉良好的收納箱中待用。

3.2 采集精液采集精液前，將2支離心管插入有編號的泡沫板中，并放在保溫盒中；采集公雞精液，將公雞精液采集到離心管（重0.9g）中，封閉離心管，每只公雞一個離心管，并按照雞只編號進行編號，采集2只雞放回到有保溫盒裝的泡沫板中，由專人送到檢測室，檢測室選擇離雞舍近的房間。編號一定要準確，不能出現混淆和錯誤。

3.3 配置稀釋液用量程為10ml的移液器或帶刻度的移液器將8ml的生理鹽水放入集精管中。

3.4 稀釋液預溫將生理鹽水放在水溫為36.5℃的水浴鍋中進行預溫，采用生理鹽水稀釋，保證精子正常滲透壓，保證精子活力。

3.5 稀釋精液用量程為100μl的移液器吸取20μl的精液，移液器滴頭深入稀釋液中，緩慢注入，用密封塞蓋住集精管，晃動6～8次搖勻。稀釋倍數為1：400，稀釋倍數過高，視野中精子數量少，不準確；稀釋倍數低，視野中精子過多，不易讀數。建議稀釋倍數以視野中存在150～200個精子為宜。

3.6 提取精液用100μl的移液器吸取15μl精液滴入計數池中，滴入過程緩慢，保證精子充滿整個計數池。

4 精液質量選育標準模型

在實驗室檢測中，多以精子密度、精子活力、精液量三個標準判斷精液質量，但由于此方法選擇標準多，在上千只種公雞中（例如峪口禽業一個標準化小區飼養2160只公雞，用以滿足12.5萬只母雞的輸精需求）挑選精液質量良好的公雞，實屬不易，故經過實驗建立了精液質量選育標準模型。

4.1 精液量單只種公雞射精量在0.4ml以上。

4.2 精液外觀精液的顏色為乳白色，若出現非人為異常情況，對不合格的種公雞進行淘汰。

4.3 單位有效精子數選擇單位有效精子數在21.5億/ml的種公雞留作種用。

5 注意事項

5.1 時間要求精液從采集到檢測完成，時間不得超過10min，超過10min后精液質量下降較快。

5.2 溫度要求精液采集到送達的過程，需要對精液進行保溫處理，尤其是在外界溫度低于25℃時，需要進行水浴保溫，并將添加精液的精子計數板在恒溫板上放置備用。

5.3 顯微鏡倍數選擇精液與生理鹽水按照1：400倍稀釋時，選擇20倍的低倍鏡進行檢測，成像清楚完整。

5.4 過程嚴謹精液從采集到檢測要嚴格保持無菌操作，所用容器使用高溫滅菌，不得使用消毒液進行消毒，以免影響精子活力。

5.5 檢測時間檢測時間一般選擇在下午進行，保證種公雞正常的采精反射，保證采精量和精液質量。

6 小結

種公雞精液品質的好壞直接影響著種蛋的受精率，而受精率是種雞場關鍵生產指標之一，直接影響著種雞場的盈虧，因此控制好種公雞的精液質量是任何一個種雞場都必須重視的工作，而種公雞精液質量檢測是提高精液質量最直接有效的方法。種公雞精液質量檢測是一項操作簡單、用工量少的常規技術，目前已在育種單位得到了推廣和應用，也必將應用于蛋種雞生產中。在人工授精技術中，不僅要考慮精液的遺傳品質，同時也要考慮到精液的繁殖性狀（包括精液量、精子密度、精子活力、輸入母雞體內的單位有效精子數），故對精液質量進行準確與可靠的檢測，需要規范的檢測技術，同時加大對精液質量檢測和選育過程的監控力度，保證精液質量檢測和選育過程的有效進行。

S831.2

C

1673-1085（2016）03-0021-03

2016-02-23