窒息新生兒臍血胰島素樣生長因子1和免疫球蛋白水平變化*

王旭平　趙麗倩　李東紅　孫子梅　畢勝利,#　任　熙 　張雅莉　安和兵

0313-3022316；E-mail：zchbsl@163.com

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窒息新生兒臍血胰島素樣生長因子1和免疫球蛋白水平變化*

王旭平1趙麗倩2李東紅1孫子梅1畢勝利1,#任熙1張雅莉1安和兵1

0313-3022316；E-mail：zchbsl@163.com

【摘要】目的：觀察窒息新生兒臍血中胰島素樣生長因子1(IGF-1)及其結合蛋白-3(IGFBP-3)和免疫球蛋白IgG、IgM、IgA以及補體C3、C4水平的變化。方法：選擇臨產急性胎兒窘迫孕婦，娩出新生兒正常者30例為窘迫組，娩出新生兒窒息者30例為窒息組，同期剖宮產正常新生兒30例為對照組。采集各組新生兒臍動脈血，用ELISA檢測血清IGF-1和IGFBP-3水平；用免疫比濁法檢測免疫球蛋白IgG、IgM和IgA及補體C3、C4含量。結果：窘迫組和窒息組新生兒臍血IGF-1、IGFBP-3、IgG、IgA水平均顯著對照組(P<0.05)；窒息組新生兒臍血IGF-1、IGFBP-3、IgG、IgM、IgA、C3水平更低于窘迫組(P<0.05)。結論：窒息新生兒IGF-1、IGFBP-3減少，體液免疫功能低下。

【關鍵詞】窒息新生兒；胰島素樣生長因子1；免疫球蛋白；補體

在世界范圍內，每年發生新生兒窒息(Neonatal Asphyxia)大約400萬例，超過100萬患兒由于嚴重缺氧而死亡[1]；即使從急性缺氧階段恢復過來，大部分患兒也可能發展為缺血缺氧性腦病，出現永久性神經系統損害，部分患兒甚至會出現不同器官或系統功能障礙[2]。由于新生兒窒息的病因復雜、缺氧持續時間及個體反應差異顯著，使其愈后難以準確估計。胰島素樣生長因子1(Insulin-like Growth Factor 1，IGF-1)是一種和胰島素原結構高度同源、包括70個氨基酸殘基，分子量約7.6 kD的多肽，分布于肝臟、腦、眼、血液、骨骼等組織和器官以及胚胎組織[3]。研究表明，IGF-1通過內分泌、旁分泌或自分泌方式產生后，與胰島素樣生長因子結合蛋白-3(IGF Binding Protein-3，IGFBP-3)結合，對嬰幼兒骨骼、心血管和腦發育起至關重要的作用。已有研究表明，窒息新生兒外周血及臍帶血IGF-1含量分別明顯低于正常新生兒[4-6]，且與新生兒發生急性腎功能衰竭相關[7]，但對IGFBP-3水平變化未見報道；同時鑒于重度窒息患兒外周血血清免疫球蛋白及補體水平呈明顯降低[8]；考慮臍血中體液免疫指標也可能存在變化。所以，本文檢測分析了窒息新生兒臍血IGF-1和IGFBP-3以及體液免疫指標免疫球蛋白IgG、IgM和IgA以及補體C3、C4的變化，為臨床研究窒息新生兒生長發育和免疫狀態提供實驗室依據。

1資料與方法

1.1對象和分組

2012-09—2014-12，來河北北方學院附屬第二醫院產科分娩孕婦、年齡21-40歲，孕周37-42周；排除存在高血壓、心臟病、營養不良或肥胖、糖尿病以及肝腎功能障礙者。臨產時60例出現急性胎兒窘迫孕婦，娩出正常新生兒30例(窘迫組)，娩出窒息新生兒30例(窒息組)。另選同期正常剖宮產新生兒30例為對照組。急性胎兒窘迫診斷標準(至少符合以下一項)[9]：(1)胎心率>160次/min或<120次/min，晚期減速或重度變異減速；(2)羊水Ⅱ-Ⅲ度胎糞污染；(3)胎動由頻繁至減少甚至消失。新生兒窒息診斷標準：胎兒娩出后，進行1分鐘阿普加(Apgar)評分，評分內容包括皮膚顏色、心搏速率、呼吸、肌張力及運動、反射等五項體征[10]；Apgar評分≤7分，為出現新生兒窒息[11]。

1.2標本采集

胎兒娩出后，迅速采集臍帶動脈血8ml，2 500r/min離心15min，分離血清—70℃冰箱儲藏批檢。

1.3檢測指標和方法

從冰箱取出血清標本，常溫復融后檢測以下指標。

1.3.1IGF-I、IGFBP-3：特異性人IGF-I和IGFBP-3試劑盒購自上海巧伊生物科技公司(批號20130107-20140430)，采用ELISA嚴格按試劑盒說明書檢測血清IGF-I和IGFBP-3含量。

1.3.2體液免疫指標：使用全自動生化分析儀(日本日立7180型)，采用免疫比濁法上機檢測血清IgG、IgM和IgA及補體C3、C4的含量。試劑購自四川邁克生物科技股份有限公司，IgG批號：0312032；IgM批號：1013041；IgA、C3、C4批號：0314021、0315022、0316203。

1.4統計學處理

2結果

2.1各組臍血IGF-1、IGFBP-3水平

組間比較，IGF-1和IGFBP-3差異均有統計學意義(P<0.01)。窘迫組IGF-1、IGFBP-3水平均顯著低于對照組(t=6.021、10.326，P<0.01)；窒息組更低于窘迫組(t=11.087、13.509，P<0.01)。見表1。

表1　各組新生兒臍血IGF-1、IGFBP-3水平均=30)

注：與對照組比較，1)P<0.01；與窘迫組比較，2)P<0.01

2.2各組臍血免疫球蛋白和補體水平

組間比較，IgG、IgM、IgA和補體C3水平差異具有統計學意義(P<0.01)；各組補體C4水平差異無統計學意義(P>0.05)。窘迫組IgG和IgA水平顯著低于對照組(t=2.786、3.601，P<0.01)，IgM和補體C3、C4與對照組無明顯差異(t=0.841、1.826、1.221，P>0.05)；窒息組IgG、IgM、IgA、C3水平較窘迫組更低(t=4.406、8.516、6.399、3.727，P<0.01)。見表2。

表2　各組新生兒臍血IgG、IgM、IgA、C3、C4水平均=30)

注：與對照組比較，1)P<0.01；與窘迫組比較，2)P<0.01

3討論

新生兒窒息是指圍產期各種原因引起宮內窘迫或分娩過程中發生呼吸、循環功能障礙導致出生后1 min內未能建立有效自主呼吸而出現新生兒缺氧性損害，是產科臨床研究的重點之一。為了進一步明確窒息對新生兒的損害，為臨床防治提供實驗室依據，本文檢測分析了窒息新生兒臍血IGF-1及其結合蛋白以及體液免疫指標的變化。

IGF-1是嬰幼兒發育非常重要的一種生長調節激素，與IGFBP-3結合后，半衰期顯著延長，可以更加穩定持久地發揮生物學效應[3]。本研究結果顯示，窒息新生兒臍血IGF-1含量顯著降低，與相關文獻[4-6]報道相一致；更為重要的是，本研究發現窒息新生兒臍血IGFBP-3含量表現出與IGF-1同樣的變化趨勢。而IGFBP-3水平降低可能是IGF-1不能發揮其正常生物學作用的前提。有研究表明，生長激素是IGF-1生成的最重要刺激信號，其與IGF-1協同發揮生物學效用[12]。另有研究發現，窒息新生兒生長激素水平顯著下降，甚至持續到出生后5天[13]，由此提示窒息新生兒IGF-1、IGFBP-3水平降低可能與生長激素的減少有關。但具體機制有待進一步深入探討。

最近，Zhu等[14]研究發現，IGF-1還是機體在生理和應激狀態下體液免疫的重要調節介質，是機體免疫功能的重要保證。已有研究表明，重度窒息新生兒外周血免疫球蛋白和補體水平降低[15]，但能更早反映體液免疫的臍血免疫球蛋白及補體水平如何，未見報道。本文結果表明，窒息新生兒臍血IgG、IgM、IgA和補體C3水平顯著降低，其原因可能與IGF-1的作用有關。研究發現，造血微環境中骨髓間質細胞產生的IGF-1在調節初級B淋巴細胞增殖過程中扮演關鍵性角色[16]；阻斷IGF-1受體后，B淋巴細胞的增殖能力顯著降低，IgM等的產量急劇下降[17]；而且，IGF-1與骨髓、胸腺和各級淋巴結內的淋巴細胞分化、成熟和功能維持有關，并參與成熟B淋巴細胞和間質巨噬細胞免疫球蛋白的產生[18]。因此推測，IGF-1水平降低可能是窒息新生兒出現體液免疫抑制的重要機制。

綜上所述，本文發現窒息新生兒臍血中IGF-1、IGFBP-3水平顯著降低，并且伴隨著以免疫球蛋白IgG、IgM、IgA和補體C3降低為特征的體液免疫抑制。提示臨床，IGF-1水平監測可作為窒息新生兒生長發育和免疫狀態的重要判斷指標，也可能作為干預窒息新生兒免疫低下的新靶點。

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王旭平(1976-)，女，漢族，副主任醫師，從事新生兒窒息的基礎與臨床研究

參考文獻

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Changes of Insulin-like Growth Factor 1 and Immunoglobulin Indices Umbilical Cord Blood from Asphyxia Neonatorum

WANG Xu-ping1, ZHAO Li-qian2, LI Dong-hong1, SUN Zi-men1, BI Sheng-li1，#, REN Xi1, ZHANG Ya-li1, AN He-bing1

1Department of Gynecology and Obstetrics, Affiliated Second Hospital, Hebei North University, Xuanhua 075100, China;2People's Hospital of Jinzhou City, Jinzhou 052260, China；#Corresponding author

【Abstract】Objective: To analyze the changes of insulin-like growth factor 1 (IGF-1) and IGF binding protein-3 (IGFBP-3), immunoglobulin G (IgG), IgM, IgA and complement 3 (C3), C4 and humoral immunity indices in umbilical cord blood of from cases subjected to asphyxia neonatorum.Method: Sixty pregnant women with acute fetal distress were divided into fetal distress group and asphyxia neonatorum group (n=30). In fetal distress group, the neonatus was normal, as well as the neonatus had asphyxiation in asphyxia neonatorum group. Otherwise, thirty normal pregnant women were as control group. After childbirth, the umbilical cord blood was obtained for the detection of IGF-1 and IGF binding protein-3 (IGFBP-3) contents in serum using the method of ELISA, IgG, IgM, IgA and C3, C4 contents in serum using the method of immunoturbidimetry.Results: The contents of IGF-1, IGFBP-3, IgG, and IgA in the asphyxia neonatorum and fetal distress groups were lowered significantly than those of the fetal distress and control groups (P<0.05). Meanwhile, the contents of IGF-1, IGFBP-3, IgG, IgM, IgA, and C3 in the asphyxia neonatorum fetal distress group were lowered significantly than those of the fetal distresscontrol group (P<0.05). Conclusion: There remains asphyxia resulted in the decreases in IGF-1 and IGFBP-3, and humoral immunity down-function in the asphyxia newborns.

【Key words】Asphyxia neonatorum; Insulin-like growth factor 1; Immunoglobulin; Complement

作者簡介：本文第一

[中圖分類號]R722.12

[文獻標識碼]A

[文章編號]1005-1740(2016)01-0053-04

*[基金項目]河北省科學技術研究與發展計劃(1227777135);張家口市科技局指令項目(12110065G-4)

本文2015-10-10收到，2016-01-06修回