血清CYFRA21-1與浸潤性膀胱尿路上皮細胞癌預后的關系

朱曉博，孔朝輝，范小玲，張祥生，丁德剛

(河南省人民醫(yī)院，鄭州430030)

?

·臨床研究·

血清CYFRA21-1與浸潤性膀胱尿路上皮細胞癌預后的關系

朱曉博，孔朝輝，范小玲，張祥生，丁德剛

(河南省人民醫(yī)院，鄭州430030)

摘要：目的探討細胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)與浸潤性膀胱尿路上皮細胞癌預后的關系。方法 47例浸潤性膀胱尿路上皮細胞癌患者中，初發(fā)腫瘤36例、復發(fā)腫瘤11例，臨床分期：T2期34例，T3期9例，T4a期4例。病理分級：G1級9例，G2級22例，G3級16例。采用電化學發(fā)光免疫分析技術檢測術前血清CYFRA21-1水平，以3.5 μg/L為臨界值將上述患者分為高表達組與低表達組，繪制Kaplan-Meier生存曲線，并進行比較。采用χ2檢驗分析CYFRA21-1表達與浸潤性膀胱尿路上皮細胞癌患者臨床病理特征的關系。結果血清CYFRA21-1在T3~4a期中高表達的比例明顯高于T2期，CYFRA21-1在復發(fā)膀胱癌中高表達的比例明顯高于初發(fā)膀胱癌(P均<0.05)。而CYFRA21-1表達的高低與膀胱癌患者的年齡、性別、病理分級等指標無關。CYFRA21-1高表達組膀胱癌患者的平均生存時間、術后3年生存率、術后5年生存率均明顯低于CYFRA21-1低表達組(P均<0.05)。 結論 檢測治療前血清CYFRA21-1水平有助于浸潤性膀胱尿路上皮細胞癌預后的判斷。

關鍵詞：膀胱尿路上皮細胞腫瘤；細胞角蛋白19片段；預后

膀胱癌是泌尿系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，以尿路上皮細胞癌最常見，約占膀胱癌的90%以上[1]。腫瘤標記物在泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤中應用較為廣泛，如前列腺特異性抗原在前列腺癌以及甲胎蛋白、β-人絨毛膜促性腺激素在睪丸腫瘤中已廣泛用于疾病預后的評估。目前膀胱癌仍缺乏一個有效的預后判斷指標。本研究隨訪了本院泌尿外科收治的47例浸潤性膀胱尿路上皮細胞癌患者，對術前患者血清細胞角蛋白(CK)19片段(CYFRA21-1)水平與預后的關系進行了探討。

1資料與方法

1.1臨床資料收集隨訪2001年5月～2012年11月本院收治的浸潤性膀胱尿路上皮細胞癌患者47例，男28例、女19例，年齡43～72歲、中位年齡59歲。初發(fā)腫瘤36例、復發(fā)腫瘤11例，均經(jīng)CT和膀胱鏡活檢確診。47例患者均行回腸膀胱術，術后對患者進行臨床分期及病理分級，臨床分期：T234例，T39例，T4a4例。病理分級：G1(高分化) 9例，G2(中分化) 22例，G3(低分化) 16例。

1.2外周血CYFRA21-1水平的檢測采用電化學發(fā)光免疫分析技術。術前采集患者空腹靜脈血2 mL，用15% K2EDTA 20 μL抗凝，置于專用塑料試管中，3 000 r/min離心分離血漿，置-20 ℃保存，檢測時37 ℃溶解。CYFRA21-1試劑盒購自瑞士羅氏公司，檢測儀器為羅氏公司Elecsys2010儀器，所有操作均按說明書進行。根據(jù)受試者工作特征(ROC)曲線，以3.5 μg/L為臨界值將上述患者分為高表達組25例與低表達組22例。

1.3統(tǒng)計學方法采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料以頻數(shù)或百分比表示，采用χ2檢驗分析CYFRA21-1表達與浸潤性膀胱癌患者臨床病理特征的關系，采用終止點法及用完全數(shù)據(jù)和截尾數(shù)據(jù)表示每例患者隨訪結果，生存曲線采用Kaplan-Meier法繪制、比較采用Log-rank檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1CYFRA21-1表達與浸潤性膀胱尿路上皮細胞癌患者臨床病理特征的關系見表1。術后隨訪15~ 126個月、中位隨訪時間74個月。死亡23 例(48.9%)、死亡時間為術后15~124個月。CYFRA21-1在T3~4a期中高表達的比例為69.2%(9/13)，明顯高于T2期的32.3%(11/34)(P<0.05)。CYFRA21-1在復發(fā)性浸潤性膀胱尿路上皮細胞癌中高表達的比例為72.7%(8/11)，明顯高于初發(fā)性[47.2%(17/36)](P<0.05)。CYFRA21-1表達的高低與浸潤性膀胱尿路上皮細胞癌患者的年齡、性別、病理分級無關(P均>0.05)。

表1　CYFRA21-1表達與浸潤性膀胱尿路上皮細胞癌患者

2.2血清CYFRA21-1表達與膀胱癌患者生存時間的關系CYFRA21-1高表達的膀胱癌患者的平均生存時間為56.4個月，95%CI43.0~69.7；明顯低于CYFRA21-1低表達的膀胱癌患者的平均生存時間82.2個月，95%CI66.7~ 97.6(P<0.05)。

2.3血清CYFRA21-1高、低表達的膀胱癌患者的生存曲線比較CYFRA21-1高表達的膀胱癌患者術后3年生存率(56.1%)、5年生存率(45.6%)均明顯低于CYFRA21-1低表達的膀胱癌患者術后3年生存率(79.3%)、5年生存率(66.7%)(P均<0.05)。見圖1。

圖1　CYFRA21-1高、低表達的膀胱癌患者的生存曲線

3討論

CYFRA21-1 是一種新型的腫瘤標志物，其為CK-19 的全長片段，屬于CK大家族，CK是存在于所有上皮細胞中的細胞結構蛋白，角蛋白水平可敏感地反映細胞分化或腫瘤發(fā)生。CK-19為角蛋白的一個亞基，分子量為40 kD，其可溶性片段上的兩個抗原決定簇可特異性地與兩個單克隆抗體BM19-21、KS19-1相結合，稱之為CYFRA21-1，主要分布在鱗狀上皮和單層上皮細胞中。正常情況下，CYFRA21-1以寡聚物形式存在，含量極低。在惡性上皮細胞腫瘤中，當細胞死亡時，激活的蛋白酶加速了細胞的降解，使得大量的可溶性CK-19 片段釋放出來，造成血液中的可溶性CK-19 片段濃度升高，而CYFRA21-1的濃度可反映CK-19的濃度[2，3]。血清CYFRA21-1在多種腫瘤中有明顯升高，可以通過免疫分析方法進行定量，臨床上通常用于肺癌[4]、卵巢癌[5]、食管癌[6]等惡性腫瘤的診斷及療效觀察。

CYFRA21-1在膀胱癌中應用的報道較少。Pariente等[7]通過檢測尿液中CYFRA21-1的濃度, 證實CYFRA21-1是一個可靠的診斷膀胱癌的腫瘤標記物，靈敏度和特異度分別為96.9%和67.5%。并發(fā)現(xiàn)膀胱癌患者尿中CYFRA21-1水平明顯高于良性前列腺增生、尿路結石和腎功能衰竭患者，且與腫瘤體積相關，但與尿路感染患者間差異沒有統(tǒng)計學意義。Snchez-Carbayo等[8]研究證實，尿中CYFRA21-1的總體靈敏度為83.8%，在pTa期、pT1期、pT2期、pT3~pT4其靈敏度分別為75.0%、86.8%、72.2%和100%。Washino等[9]檢測85例膀胱尿路上皮細胞癌患者外周血中CEA、CA19-9及CYFRA21-1水平時發(fā)現(xiàn)，腫瘤分期和分級越高，血清CYFRA21-1水平越高。Andreadis等[10]研究發(fā)現(xiàn)，CYFRA21-1水平與膀胱腫瘤分化沒有相關性，但與膀胱癌的遠處轉(zhuǎn)移密切相關，并可用于評估膀胱癌化療的治療反應。國內(nèi)目前僅見研究尿液中CYFRA21-1水平與膀胱癌關系的報道[11]，尚無檢測膀胱尿路上皮細胞癌患者外周血中CYFRA21-1水平的相關研究。

目前主要有病理分期、病理分級、有無淋巴結及遠處轉(zhuǎn)移、外科手術方式、術中輸血等與膀胱癌預后相關[12,13]。然而，所有這些都是術后因素，不能在治療前對膀胱癌的預后進行預測。近年來，文獻報道[14~18]通過檢測尿中ImmunoCyt、尿核基質(zhì)蛋白22、膀胱腫瘤抗原、透明質(zhì)酸和透明質(zhì)酸酶、端粒酶、生存蛋白、熒光原位雜交、DNA微衛(wèi)星分析、生存素等進行膀胱癌的診斷和預后評價，但尿液檢測易受尿路感染的干擾。Suyama等[19]報道，目前可靠的術前預測上尿路尿路上皮細胞癌預后的指標為血清CRP。然而，炎癥、感染、急性心肌梗死、惡性腫瘤時，CRP亦會升高，特異性相對較低。我們采用電化學發(fā)光法對47例浸潤性膀胱尿路上皮細胞癌患者術前血清CYFRA21-1水平進行檢測，術后隨訪15~ 126個月，發(fā)現(xiàn)術前血清CYFRA21-1水平與腫瘤臨床分期、病理分級、腫瘤是否復發(fā)有關，長期隨訪結果證實CYFRA21-1高表達的膀胱癌患者的平均生存時間、術后3年生存率、術后5年生存率均明顯低于CYFRA21-1低表達組。因此，檢測血清CYFRA21-1水平可用于術前評估膀胱尿路上皮細胞癌的預后，特別對于不能耐受或不愿接受手術的患者尤有意義。本組病例數(shù)相對較少，尚需進一步進行較大的病例隊列研究證實。同時，相對尿脫落細胞學、膀胱鏡等檢測手段，血清CYFRA21-1檢測特異性有待提高，尚需不斷探索，找到更多的具有更高敏感性和特異性的腫瘤標志物，聯(lián)合進行膀胱癌術前預后的評判。

參考文獻：

[1] 吳階平．泌尿外科學[M]．濟南：山東科學技術出版社，2004:973-926．

[2] Marrakchi R, Ouerhani S, Benammar S, et al. Detection of cytokeratin 19 mRNA and CYFRA 21-1 (cytokeratin 19 fragments) in blood of Tunisian women with breast cancer[J]. Int J Biol Markers, 2008,23(4):238-243.

[3] Koh JM, Kim ES, Ryu JS, et al. Effects of therapeutic doses of131I in thyroid papillary carcinoma patients with elevated thyroglobulin level and negative131I whole-body scan: comparative study[J]. Clin Endocrinol, 2003,58(4):421-427.

[4] Weber DG, Johnen G, Taeger D, et al. Assessment of confounding factors affecting the tumor markers SMRP, CA125, and CYFRA21-1 in serum[J]. Biomark Insights, 2010,5:1-8.

[5] 王建英,程建新,王淑英,等.細胞角蛋白片段抗原21-1檢測對卵巢癌診斷的價值[J].實用癌癥雜志,2004,19(4):377-378,395.

[6] 毛友生,張德超,趙曉航,等.食管癌患者血清CEA、SCC和Cyfra21-1含量檢測及臨床意義[J].中華腫瘤雜志,2003,25(5):457-460.

[7] Pariente JL, Bordenave L, Michel P, et al. Initial evaluation of CYFRA 21-1 diagnostic performances as a urinary marker in bladder transitional cell carcinoma[J]. J Urol, 1997,158(2):338-341.

[8] Sánchez-Carbayo M, Espasa A, Chinchilla V, et al. New electrochemiluminescent immunoassay for the determination of CYFRA 21-1: analytical evaluation and clinical diagnostic performance in urine samples of patients with bladder cancer[J]. Clin Chem, 1999,45(11):1944-1953.

[9] Washino S, Hirai M, Matsuzaki A, et al. Clinical usefulness of CEA, CA19-9, and CYFRA 21-1 as tumor markers for urothelial bladder carcinoma[J]. Urol Int, 2011,87(4):420-428.

[10] Andreadis C, Touloupidis S, Galaktidou G, et al. Serum CYFRA 21-1 in patients with invasive bladder cancer and its relevance as a tumor marker during chemotherapy[J]. J Urol, 2005,174(5):1771-1775.

[11] 周莉莉,高云朝.尿細胞角蛋白CYFRA 21-1濃度檢測對膀胱移行細胞癌的診斷價值[J]. 蘇州大學學報(醫(yī)學版),2008,28(4):620-621.

[12] 曾福華,楊土保,江勃年,等.原發(fā)淺表性膀胱癌預后影響因素分析[J].中華泌尿外科雜志,2004,25(10):669-672.

[13] 陳合群,祖雄兵,陳志勇,等.幾個影響膀胱移行細胞癌復發(fā)因素的臨床分析[J].臨床泌尿外科雜志,2007,22(8):608-609.

[14] Grossman HB, Soloway M, Messing E, et al. Surveillance for recurrent bladder cancer using a point-of-care proteomic assay[J]. JAMA, 2006,295(3):299-305.

[15] Passerotti CC, Bonfim A, Martins JR, et al. Urinary hyaluronan as a marker for the presence of residual transitional cell carcinoma of the urinary bladder[J]. Eur Urol, 2006,49(1):71-75.

[16] Lokeshwar VB, Habuchi T, Grossman HB, et al. Bladder tumor markers beyond cytology: International Consensus Panel on bladder tumor markers[J]. Urology, 2005, 66(6 Suppl 1):35-63.

[17] Frigerio S, Padberg BC, Strebel RT, et al. Improved detection of bladder carcinoma cells in voided urine by standardized microsatellite analysis[J]. Int J Cancer, 2007,121(2):329-338.

[18] Bravaccini S, Sanchini MA, Granato AM, et al. Urine telomerase activity for the detection of bladder cancer in females[J]. J Urol, 2007,178(1):57-61.

[19] Suyama T, Nakajima K, Kanbe S, et al. Prognostic significance of preoperative serum CYFRA 21-1 in patients with upper urinary tract urothelial carcinoma[J]. Int J Urol, 2011,18(1):43-47.

本刊2015年第55卷第5期《乳腺癌組織中E-cadherin和CD105的表達》第一作者陳謙的單位僅為徐州醫(yī)學院附屬醫(yī)院。特此更正。

本刊編輯部

(收稿日期：2015-10-11)

中圖分類號：R737.1

文獻標志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)01-0042-03

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.01.015

通信作者：孔朝輝(E-mail：249813503@qq.com)

基金項目：河南省科技攻關計劃項目(112102310232)。