檢驗技能大賽中革蘭氏染色出現的問題分析及對策探討

韓志紅

（寶雞職業技術學院醫學分院，陜西寶雞721013）

?

檢驗技能大賽中革蘭氏染色出現的問題分析及對策探討

韓志紅

（寶雞職業技術學院醫學分院，陜西寶雞721013）

摘要：革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法，也是微生物檢驗中一個傳統而經典的實驗項目。該方法雖然并不復雜，但由于技能大賽的特殊性，比賽過程中參賽選手容易出現各種各樣的問題或失誤。筆者將革蘭氏染色法（傳統法）這一賽項及選手在競賽過程中出現的問題進行分析整理，并提出解決對策及賽后反思。

關鍵詞：檢驗技能大賽；革蘭氏染色法；選手

2014年、2015年，全國衛生職業院校檢驗技能大賽分別在西安及信陽舉辦。檢驗技能大賽的宗旨是面向臨床崗位需求，體現檢驗基本技能，注重工學結合；深化職業教育教學改革，落實職業教育技能競賽制度化、常態化，進一步推動產教結合、深化校企合作；提高我國檢驗職業教育水平，促進院校交流，加強檢驗專業基本技能訓練；展示全國檢驗專業學生積極進取的精神風貌、熟練的專業技能、良好的職業素質和檢驗教學新成果。隨著大賽的逐步成熟，第二屆比賽項目成果均比第一屆好，但個別項目也出現了一些問題。

革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法，由丹麥醫師、細菌學家漢斯·克里斯蒂安·約阿希姆·革蘭于1884年創立。革蘭氏染色的醫學意義：（1）可以協助鑒定細菌。革蘭氏染色將細菌分成革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌兩大類，初步鑒別細菌，縮小檢驗范圍，有助于進一步選擇鑒定方法。（2）為臨床使用抗生素提供依據。革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在細胞壁結構上有很大差異，對抗生素與化學藥劑的敏感性也不同。革蘭氏陽性菌大多對青霉素、頭孢菌素、紅霉素等藥物敏感；而革蘭氏陰性菌大多對青霉素不敏感，但對鏈霉素、慶大霉素、氯霉素等藥物敏感。臨床上可根據革蘭氏染色性質，合理選擇有效藥物進行治療。（3）有助于分析細菌致病性。大多數革蘭氏陽性菌的致病物質是外毒素，而革蘭氏陰性菌的致病物質主要是內毒素，兩者的性質、致病作用和治療方法均不相同。革蘭氏染色法（傳統法）是微生物檢驗中一個傳統而經典的實驗項目，雖然操作并不復雜，但由于技能大賽的特殊性，比賽過程中參賽選手容易出現各種各樣的問題或失誤。筆者將革蘭氏染色法（傳統法）這一賽項及選手在競賽過程中出現的問題進行分析整理，提出解決對策以及賽后反思。

1　參賽選手現狀與比賽考核說明

選手為各職業院校高職檢驗和中職檢驗專業在校生，經學校選拔確定。比賽前，學校對參賽選手進行了較長時間的強化培訓或一對一針對性訓練，所以其實際技能水平要遠遠高于其他在校學生。選手競賽成績為操作全程評分、操作結果評分和考核時間評分之和。評分標準由賽事專家組集體討論制定，滿分為100分，完成時間為15分鐘。

2　比賽過程中選手易出錯部分及解決對策

2.1賽前準備工作階段

大部分選手雖然賽前經過了嚴格的訓練，但在比賽過程中還是會緊張，表現為：（1）報告參賽項目時緊張、語無倫次、結巴、發抖。（2）漏報參賽項目，將參賽項目準備工作結束誤報成操作結束，擺放實驗器材及物品時反復調整次序，漏擺吸水濾紙和計時器，導致物品準備不全。（3）所用器材沒有按照涂片制作區→染色區→鏡檢區→結果填寫區的順序擺放，導致操作過程中手忙腳亂。（4）染液沒有按照順序擺放，染色過程中耽擱了時間，影響操作速度。

解決對策：賽前選拔選手時，盡量選擇心理素質較好的學生，準備多套訓練方案，最好針對選手的薄弱環節進行有的放矢的訓練，只要認真、反復練習，上述問題就不會出現。

2.2制片階段

（1）在玻片上寫錯組號及工位號、漏寫標本號；拿取玻片時，用手捏住玻片中央部分（涂片區域），之后又未擦凈，或因手套上的粉末、污物沾染玻片，導致鏡下見到少許雜質。（2）點燃酒精燈時只是提了一下燈芯，未達到排氣的目的。（3）制片前沒有對菌落進行詳細觀察；令平皿開口正對操作者面部，缺乏自我防護和無菌意識。（4）接種環滅菌操作不規范，燒灼方向和次數錯誤。（5）沒有選擇單一菌落取菌，菌量挑取過多，涂片太厚。（6）涂片不均勻，未加生理鹽水，涂片面積過大導致切片干燥、染色受影響。（7）反復多次干燥涂片，使涂片過分受熱；用手試溫；干燥涂片時離火焰太遠，沒有達到干燥目的或干燥時間過長。（8）沒有統一的涂片固定方式，可能由教師理解不同所致。

解決對策：制片過程是所有參賽選手出現問題最多和扣分較多的環節，反映出我們在培訓時，沒有將靈活性與規范性有機結合起來。如菌落的挑選、接種環的滅菌、涂片的制備、涂片的干燥和固定等。此外，比賽過程中各校的規范也有所不同，這些操作程序是否應該統一、如何統一，也是擺在我們面前急需解決的問題。

2.3染色階段

染色過程中最容易扣分的是沖洗環節。如先倒染液后沖水，直接沖淋菌膜導致部分菌膜脫落，沖水過大過快污染手指。

解決對策：出現上述問題，主要是因為學生在訓練時不夠細致和規范，操作過程沒有做到精益求精，只要解決這些問題，就不會輕易丟分。

2.4顯微鏡使用階段

這個環節出現的問題是參賽選手普遍存在的共性問題。由于大賽中使用的顯微鏡是組委會指定型號，很多院校并沒有同種型號的顯微鏡，所以暴露出來的問題較多。（1）大部分選手不能正確調整光圈、聚光器及載物臺，調試顯微鏡時耗時太多，這是操作超時最主要的原因。（2）有的選手對油鏡的使用還不太熟練，因未能看到菌體反復在低倍鏡和油鏡間轉換，導致顯微鏡下觀察耗時較多，從而超時。（3）未用低倍鏡，直接使用油鏡尋找視野而丟分。（4）拿取顯微鏡動作粗暴而扣分。（5）不擦拭或沒有正確擦拭油鏡頭，沒有對留待復查的涂片進行正確的脫油處理。

解決對策：以上問題普遍存在，說明顯微鏡的使用是大多數學生的薄弱環節，對顯微鏡基本操作技能掌握不夠理想，在大賽壓力下，選手操作能力普遍下降。日常教學中要求學生系統了解和熟悉顯微鏡的結構、使用原理，掌握正確的操作方法。顯微鏡的使用是一門實打實的操作技能，除了反復練習外沒有捷徑。

2.5結果分析及報告階段

該階段也是參賽選手出現失誤最多的環節之一，甚至有選手因為沒有正確報告結果而對一等獎失之交臂。選手存在的問題主要有：（1）菌體顏色描述不正確，如將革蘭氏陽性菌的紫色描述為藍黑、藍色。（2）鏡下視野效果不好，菌體不清晰、顏色不正、數量過多或過少、分布不均勻。（3）鏡下未找到細菌，僅對菌落性狀作出報告。（4）因緊張將革蘭氏陽性桿菌寫成革蘭氏陰性桿菌。

解決對策：上述問題反映出選手對大賽的嚴肅性認識不足，比較隨意。特別是有的選手鏡下并未找到細菌而想當然地出具了報告。菌體顏色和形態描述失誤可以通過反復練習與強化訓練來糾正，但是由于過度緊張而導致報告結果相反現象則反映出選手心理素質不佳以及操作不細心的問題。

2.6超時

大賽所有賽項都有超時現象，而革蘭氏染色賽項的超時現象最普遍。主要原因：（1）選手壓力較大、高度緊張，導致動作變形影響了操作。（2）顯微鏡使用不熟練，不能在有限的時間內迅速找到細菌。

解決對策：賽前專項訓練中，適當增加抗壓訓練項目，培養學生自信心、嚴謹的作風，以及遇到困難冷靜應對和分析能力；加強顯微鏡操作能力培養。

2.7賽后整理

由于比賽出現了超時現象，導致賽后物品整理、桌面清潔等程序流于形式，很多選手為了節約時間，對整理工作一筆帶過，如桌面只是象征性地用抹布隨便擦一下，而未用消毒液仔細擦拭。由于該環節扣分標準并沒有細化，導致此處扣分不嚴謹。

解決對策：在日常學習和培訓過程中，指導學生合理安排操作時間，避免前松后緊，養成良好的實驗操作習慣。

3　賽后反思及小結

2015年全國檢驗技能大賽已經落下帷幕，我們應反思比賽中選手出現的問題和失誤，從而達到以賽促學、以賽促教的目的?？v觀比賽，在以下方面還有待加強：（1）選手心理素質普遍不強，在大賽壓力下，很多選手因緊張導致比賽結果不理想。如我校選手參賽期間嚴重失眠，甚至一日三餐都難以下咽。（2）學生基本技能較為薄弱，特別是在制片過程中出現了一些不應該出現的問題。（3）選手動手能力普遍薄弱，對陌生型號的顯微鏡不能在短時間內掌握使用方法，提示我們在活學活用這一塊還需下工夫。（4）選手綜合分析、處理結果能力還需進一步提高。如有的選手寫錯了結果，這不僅是因為不仔細，還反映出選手對比賽過程中所用標本（如菌落）的綜合評價分析能力有待提高。

革蘭氏染色操作的考核項繁多且評分標準非常細，這就對操作的規范性和靈活性提出了更高要求，同時也對主辦方提出了更高要求?？偨Y兩年革蘭氏染色法賽項的評分標準，我們發現以下問題有待與同行商榷。（1）個別扣分點設置不合理。比如，著白大褂、帽、口罩、手套并按要求佩戴參賽簽與儀表端莊、頭發符合要求重復。（2）由于比賽過程中選手所用的器材及試劑已由主辦方工作人員準備充分且大部分擺放合理，所以實驗準備階段的正確擺放試劑一項扣分點形同虛設。（3）部分扣分點設置模棱兩可，評委在評分的尺度上不好掌握。如有選手賽后清理臺面，但未清理干凈，標準上卻無該扣分項。（4）部分環節的操作規范各院校不一致，需要檢驗專業同行統一認識，使得革蘭氏染色法更加合理化、規范化，有利于教學工作的開展。（5）成績公布不及時，比賽的公開、公平、公正性有待加強。（6）建議評分標準更加細化和合理，最好是與臨床工作結合起來，使學生更適應臨床一線崗位要求。

隨著全國檢驗技能大賽的逐步發展以及檢驗界同行的共同努力，相信在不久的將來我們的大賽會更上一層樓。

中圖分類號：G424.31

文獻標識碼：B

文章編號：1671－1246（2016）05－0111－02