魯利萍,時紅星
(1.商丘市畜產品質量監測檢驗中心,河南 商丘 476000;2.商丘市動物衛生監督所)
禽霍亂與新城疫混合感染的診治
魯利萍1,時紅星2
(1.商丘市畜產品質量監測檢驗中心,河南 商丘 476000;2.商丘市動物衛生監督所)
禽霍亂又稱禽巴氏桿菌病、禽出血性敗血癥,是由多殺性巴氏桿菌引起的多種禽類的傳染病,多在高溫、高濕季節發生,雞、鴨、鵝等禽類較為易感,雞發病急,死亡快。發病雞食欲廢絕,飲欲增加,病雞出現精神沉郁,縮頭閉目,呼吸困難,口、鼻有黏性分泌物,雞冠青紫,拉黃綠色稀便等癥狀,單發性禽霍亂用高敏藥物治療效果明顯,但若在雞群病毒性疾病免疫效果不好,機體免疫力下降的情況下,禽霍亂易與病毒性疾病混合感染,特別是禽霍亂與雞新城疫的混合感染可造成雞大批死亡,給養殖戶帶來嚴重經濟損失。
案例一:160日齡,蛋雞,2000只雞,150日齡,120日齡注射禽流感H5滅活疫苗0.5ml,130日齡注射新支減滅活疫苗0.5ml,同時注射3倍量新城疫I系活疫苗,最后一次注射疫苗后采食量開始下降,飲水量增加,產蛋下降10%,病雞出現精神沉郁、咳嗽、拉稀的癥狀,有的雞口、鼻有黏性分泌物,個別雞有啄肛現象,產蛋下降50%,發病1~3d死亡,每天新發病10余只,病死雞10只左右。
剖檢變化:眼腫,眼結膜出血。胸肌出血。氣囊增厚,喉頭出血,喉、氣管有黏液性滲出物。肺有炎性滲出物。心冠脂肪出血。肝有針尖狀血點。卵巢出血,卵泡出血。胃黏膜變薄,腺胃乳頭出血,有的腺胃黏膜下出血。十二指腸出血,泄殖腔出血。
案例二:3000羽羅曼蛋雞,170日齡,120日齡注射新支減滅活疫苗0.5ml,同時注射2倍量新城疫I系活疫苗,130日齡注射禽流感H5滅活疫苗0.5ml,160日齡開始發病,病雞精神沉郁,羽毛松亂,縮頭、耷拉翅膀,鼻有黏性分泌物,有呼嚕、咳嗽癥狀,個別張口呼吸,肉髯暗紅或青紫色,拉灰白色稀便,產蛋下降50%。每天都有新增病例,每天病死8只左右。
剖檢變化:喉頭出血,心包內有纖維性滲出物。臟腫大,質脆,肝有灰白色針尖狀壞死灶,有的肝腹水,有的心源性肝臟腫大,肺有炎性滲出物。腺胃、肌胃交界處出血,腺胃黏膜出血,腺胃乳頭出血。盲腸扁桃體出血。腹膜炎,輸卵管炎,卵巢萎縮、壞死。
1.1 細菌學檢測
1.1.1 涂片鏡檢。無菌操作采典型病例瀕死雞的心血、肝、脾組織進行涂片,分別進行革蘭氏和瑞氏染色,鏡檢,革蘭氏染色可見兩極濃染的卵圓形、紅色陰性小桿菌;組織涂片瑞氏染色可見兩極著色,中間較淺的球桿菌,血液涂片瑞氏染色,均被染成藍色或淡青色,紅細胞染成淡紅色,紅細胞內有紫色的核。
1.1.2 細菌分離培養。用滅菌接種環或滅菌棉簽無菌操作,采瀕死雞典型病變的肝、脾組織,分別接種鮮血瓊脂培養基、麥康凱培養基、肉湯培養基,置于37℃恒溫培養箱中培養,24h后看結果,鮮血瓊脂培養基上長出較為平坦、半透明的露滴樣不溶血小菌落;麥康凱培養基上不生長;在肉湯培養基上可見均勻混濁,管底膠樣沉淀,灰白色菌環。挑取培養物涂片,革蘭氏染色,鏡檢可見兩端鈍圓、兩極濃染的卵圓形小桿菌。
1.1.3 生化試驗。無菌操作采分離菌落做生化試驗,48 h內能分解葡萄糖、果糖、半乳糖、產酸不產氣;不發酵乳糖、肌醇、菊糖、水楊酸及鼠李糖。不液化明膠。靛基質、過氧化酶和氧化酶均為陽性,不能產生尿素酶。M-R試驗和V-R試驗均為陽性。
1.1.4 動物試驗。無菌操作采集瀕死癥狀典型病雞,采集病變明顯肝、脾等組織,剪碎、研磨、用滅菌生理鹽水稀釋配制成1∶5乳液,皮下接種小白鼠2只,每只0.2ml,24h后2只全部死亡,涂片鏡檢革蘭氏染色為兩極濃染的陰性小桿菌;同時設對照組,對照注射生理鹽水2只,對照組2只全部存活。
1.2 藥敏試驗
第一家病料試驗結果:氧氟沙星、環丙沙星、氟苯尼考、林可霉素高敏;阿米卡星、新霉素、壯觀霉素、頭孢噻肟、磷霉素、慶大霉素、硫酸粘桿菌素、硫酸安普霉素中敏;多西環素、鏈霉素、紅霉素、阿莫西林、利福平低敏。
第二家病料試驗結果:硫酸安普霉素、恩諾沙星、氧氟沙星、環丙沙星、氟苯尼考、林可霉素高敏,新霉素、阿米卡星、壯觀霉素、頭孢噻肟、慶大霉素、硫酸黏桿菌素、鏈霉素中敏,多西環素、紅霉素、阿莫西林、利福平、磷霉素低敏。
1.3 病原學檢測
1.3.1 組織采集與處理。取氣管、肺、腦等組織,按1∶5的比例加入生理鹽水,反復凍融3次,放入一次性1.5mlEP離心管中,加入一顆鋼珠,對稱放入組織粉碎機中粉碎,粉碎后高速離心機13000轉離心3min,取上清液200μl待用。或直接取泄殖腔拭子、咽喉拭子,反復凍融3次,高速離心,取上清液200μl待用。
1.3.2 核酸提取。核酸提取儀(磁珠法)提取備用,取18μl混合液、1μl酶混勻,分別加入5ul核酸提取液,瞬時低速離心。
1.3.3 熒光RT-PCR擴增。取離心后陽性對照、陰性對照、樣品對照各5μl上清液放入熒光PCR儀進行檢測,兩家病料新城疫病毒核酸為陽性。
通過臨床癥狀、剖檢變化、實驗室檢驗診斷為禽巴氏桿菌與新城疫的混合感染。
病雞及時隔離,停止工作人員串崗及所有用具輪換使用,病死雞深埋無害化處理。徹底清除圈舍,徹底消毒,雞舍用2%的氫氧化鈉溶液消毒,雞舍用0.5%聚維酮碘溶液進行帶雞消毒,每天消毒1次。加強飼養管理,合理飼養密度,通風換氣良好。提供優質飼料與飲水。
藥物治療與預防:恩諾沙星、氧氟沙星、鹽酸環丙沙星因影響產蛋,用藥最好不超過5d。第一家病例大群雞飲水加入環丙沙星100mg/L,自由飲水,連用5d,隔離病雞用林可霉素注射,每日1次,連用5d,飲水加電解多維與5%葡萄糖。第6天用新城疫IV系4倍量飲水,同時注射新城疫滅活疫苗0.5ml。7d后回訪病雞死亡減少,14d后回訪大群基本好轉。第二家病例大群雞用10%氧氟沙星飲水,每100kg水加入50~100g,連用5d,隔離病雞用阿米卡星注射,每只雞5000IU,每日1次,連用5d,第6天用新城疫IV系4倍量飲水免疫,同時注射新城疫滅活疫苗0.5ml。10d后回訪,發病雞逐漸減少,15d回訪大群基本好轉。
保持圈舍清潔,徹底消毒。合理飼養密度,圈舍溫度、濕度適宜,特別是炎熱的夏季,圈舍做好通風、降溫、除濕工作,嚴防高溫、高濕。做好新城疫、禽流感、傳染性支氣管炎、傳染性法氏囊等病毒性疾病的預防。禽霍亂疫苗為細菌性疫苗,好多養殖戶不免疫此苗,養殖戶根據自己雞場疾病發生情況進行適時免疫,或定期投喂增強免疫力、抗病的中藥預防。制定蛋雞雞新城免疫最佳免疫程序,蛋雞由于生產周期較長,定期跟蹤檢測新城疫HI免疫抗體,0~30日齡雛雞,由于母源抗體下降較快,疫苗免疫有一定空白期,此階段要做好飼養管理及消毒工作來控制新城疫的發生;新城疫HI免疫抗體效價大于等于1∶16已達到國家標準,但由于氣候、飼養環境、個體抵抗力的差異等因素的影響,加上新城疫流行特點,4~10周齡新城疫HI免疫抗體至少在1∶64以上,才能保證育成階段不感染新城疫,開產前新城疫HI免疫抗體至少在1∶1024以上,才能做到開產到產蛋高峰期安全度過,所以要在90~100日齡左右開產前檢測蛋雞新城疫免疫HI抗體,根據新城疫免疫抗體效價適時免疫,新城疫疫苗的預防要滅活疫苗與新城疫I系活苗同時注射,以達到較高的HI抗體,保證蛋雞產蛋期穩定。
S858.31
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1004-5090(2016)11-0040-02
2016-09-11)