小鼠種質(zhì)資源冷凍保存技術(shù)及研究進(jìn)展

洪勝輝，王芊芊，陳曉娟，劉迪文

(浙江大學(xué) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，浙江 杭州 310058)

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小鼠種質(zhì)資源冷凍保存技術(shù)及研究進(jìn)展

洪勝輝，王芊芊，陳曉娟，劉迪文

(浙江大學(xué) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，浙江 杭州 310058)

摘要：20世紀(jì)80年代以來，隨著轉(zhuǎn)基因、基因敲除等生物工程技術(shù)的不斷發(fā)展，Cas9等基因編輯技術(shù)的不斷涌現(xiàn)，由此產(chǎn)生大量的生物工程小鼠。建立一種常規(guī)、安全、可靠的種資保存方法，保存這些極其珍貴的生物資源至關(guān)重要。本文綜述了當(dāng)前廣泛應(yīng)用的冷凍保種技術(shù)方法。

關(guān)鍵詞：小鼠；胚胎冷凍；精子冷凍；卵巢冷凍

動(dòng)物種質(zhì)保存通常有活體保種、冷凍保種和基因克隆三種方法。長(zhǎng)期活體保種，不僅需要大量的空間和維持經(jīng)費(fèi)，還有可能在繁殖的過程中發(fā)生遺傳漂變和污染。基因克隆只能保持物種的遺傳信息，但是無(wú)法保存種質(zhì)；冷凍保種，可有效的防止種群的遺傳漂變，遺傳資源丟失和污染，還可以減輕繁育工作者的負(fù)擔(dān)，因此成為當(dāng)前應(yīng)用最廣泛的方法。在長(zhǎng)達(dá)半個(gè)世紀(jì)的研究中，胚胎冷凍、精子冷凍等技術(shù)取得了快速發(fā)展，為生命科學(xué)研究提供基礎(chǔ)。由于國(guó)際資源共享愈來愈頻繁，活體的運(yùn)輸由于其笨重、易受污染等缺點(diǎn)受到極大限制，以冷凍胚胎和精子形式的運(yùn)輸發(fā)揮了巨大作用。

1冷凍保存的基本原理

通過一定的保護(hù)措施和降溫程序，將胚胎或者細(xì)胞保存在-196℃條件下，細(xì)胞代謝作用暫時(shí)停止或者減弱到足夠小的程度，當(dāng)使用一定的措施和升溫程序，細(xì)胞又能夠恢復(fù)代謝的能力，從而能夠長(zhǎng)期保存，這就是冷凍保存技術(shù)。……