BLCAP基因在急性髓系白血病中的表達及意義

董小林，張少君，楊潔

(湖北醫藥學院附屬人民醫院健康體檢中心，湖北 十堰 442000)

BLCAP基因在急性髓系白血病中的表達及意義

董小林，張少君，楊潔

(湖北醫藥學院附屬人民醫院健康體檢中心，湖北 十堰 442000)

目的 探討膀胱癌相關蛋白(BLCAP)基因在急性髓系白血病(AML)中的表達及其與治療療效和預后的關系。方法收集我院血液科2008年1月至2012年12月收治的138例原發性急性髓系白血病患者的病理資料，利用實時定量PCR(RQ-PCR)法檢測AML患者骨髓液BLCAP基因的表達，并分析其表達與AML臨床病理指標及治療療效、預后的關系。結果AML患者均表達BLCAP，BLCAP的表達在AML患者不同年齡、白細胞(WBC)、血紅蛋白(Hb)等指標間比較差異均有統計學意義(P＜0.05)；AML治療后緩解及治療后無事件生存的患者，其BLCAP表達高于治療后未緩解及治療后復發、病情進展及死亡的患者，差異均有統計學意義(P＜0.05)。結論BLCAP基因在AML患者中的表達與其治療療效及預后相關，有望成為AML病情評估及療效預測的指標。但這一結論尚需進一步的研究予以證實。

膀胱癌相關蛋白；急性髓系白血病；預后；病理指標

急性髓系白血病(Acute myeloid leukemia，AML)為造血系統的惡性腫瘤，其治療效果差、復發率高，目前除了常規指標外，臨床尚缺乏其他有效的治療效果預測指標[1]。膀胱癌相關蛋白(BLCAP)基因的表達與膀胱癌、宮頸癌等多種惡性腫瘤的不良預后相關。但BLCAP基因在AML患者中的表達及其與治療療效和預后的關系，國內外尚未見相關報道。本文通過分析BLCAP基因在急性髓系白血病中的表達情況，初步明確BLCAP能否成為AML療效預測、預后評估的指標。

1 資料與方法

1.1 一般資料 整理我院血液科2008年1月至2012年12月收治的原發性急性髓系白血病病例共149例，剔除3例放棄治療，5例臨床資料不完整，3例治療后失訪，最終入選138例。所有患者均簽署知情同意書并經我院倫理委員會討論通過。入選138例患者中，男性71例，女性67例。中位年齡47歲(16～78歲)。M1型21例，M2型41例，M3型53例，M4型23例。AML的診斷及療效判斷標準參照2011年版指南[2]。138例患者均為正常核型，治療方案以柔紅霉素+阿糖胞苷(DA)為主的誘導化療。查閱患者住院病歷及門診隨訪資料，記錄患者接受治療前血紅蛋白水平、血小板數等臨床資料。隨訪方式為定期門診或住院復查。總生存(Overall survival，OS)為確診日至患者死亡或隨訪截止的時間。無事件生存(Event free survival，EFS)為患者確診日至復發、病情進展及隨訪截止日。

1.2 檢測方法 常規方法抽取患者骨髓液2mL，首先分離骨髓液單個核細胞進行RNA提取，cDNA合成按照試劑盒說明(上海生物工程技術服務有限公司)并參照文獻進行[3-4]。實驗中BLCAP基因上、下游引物為5'-GCAGAATTCATGTATTGCCTCCAGTG-3'，5'-GCGGATCTTAGGTGCCCACAACGC-3'。BLCAP基因RQ-PCR實驗由我院中心實驗室完成。將RQ-PCR的△△CT值進行Log轉換便于統計分析[4]。

1.3 統計學方法 應用SPSS13.0軟件包進行數據統計分析。BLCAP基因表達與臨床病理指標間的關系為計數資料，采用χ2檢驗，BLCAP基因表達與預后的關系用Kaplan-meier法、Log-rank檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 BLCAP基因表達及其與臨床病理指標的關系 入選AML病例均可檢出BLCAP基因表達，中位表達6 523(110～193 224)。參照文獻將BLCAP基因表達水平10 000以下定義為低表達，10 000以上定義為高表達[4-5]。BLCAP基因表達與患者年齡、M分型、血小板、血紅蛋白等指標間比較差異均有統計學意義(P＜0.05)，而與患者性別無關(P＞0.05)，見表1。

表1 BLCAP表達與AML患者臨床病理指標的關系(例)

2.2 BLCAP基因表達與療效的關系 138例入選患者，緩解(CR)共126例(91.3%)，無緩解(NR)12例(8.7%)。緩解組BLCAP基因高表達89例(70.6%)，低表達37例(29.4%)；無緩解組BLCAP基因高表達4例(33.3%)，低表達8例(66.7%)。BLCAP基因高表達患者治療后緩解率高于低表達者，兩組間比較差異有統計學意義(χ2=5.145，P＜0.05)。

2.3 BLCAP基因表達與AML患者預后的關系 138例患者隨訪截止2012年12月，中位隨訪30個月。隨訪期間，復發、病情進展67例，死亡19例。BLCAP基因在52例病情穩定患者中高表達41例(78.8%)，低表達11例(21.2%)；BLCAP基因在86例病情復發、進展患者中高表達33例(38.4%)，低表達53例(61.6%)；在隨訪期間19例死亡患者中高表達8例(42.1%)，低表達11例(57.9%)。生存分析顯示，BLCAP基因表達在復發、病情進展及死亡患者中的表達水平低于病情穩定的患者，差異有統計學意義(P＜0.05)，見圖1、2。

圖1 BLCAP與AML患者總生存的關系

圖2 BLCAP與AML患者無事件生存的關系

3 討 論

BLCAP基因的確切功能目前尚不明確，早在1999年Gromova等[6]研究提示BLCAP基因可能是新的抑癌基因。此后有大量相關研究證實，BLCAP基因的表達與膀胱癌、乳腺癌、宮頸癌、骨肉瘤等惡性疾病相關[7-10]。但BLCAP基因表達與AML患者治療療效及預后的關系，目前國內外未見報道。本文利用實時定量PCR(RQ-PCR)法檢測BLCAP基因表達，并回顧性分析AML患者的臨床病理資料。本實驗結果明確，入組AML患者均表達BLCAP基因，BLCAP基因的表達與年齡、血紅蛋白等指標間有相關性，但與患者性別無相關，≤40歲患者BLCAP基因陽性表達明顯高于＞40歲患者，分析患者的療效并結合文獻，推測這與年輕患者的緩解率高相關，這也與AML常規臨床預后的的判斷與預測相一致[11]。

此外，生存分析明確，BLCAP基因高表達患者，EFS及OS率均明顯高于BLCAP基因低表達者，與文獻推測BLCAP基因可能是抑癌基因的結論相符合[12]。但BLCAP基因的表達和惡性病患者預后的關系，目前的研究結論并不一致。例如Moreira等[7]的研究發現，在Ewing's肉瘤中，BLCAP基因通過誘導細胞凋亡而發揮雙向調節的作用。

總之，本研究初步明確，BLCAP基因的表達與AML患者的年齡等常規臨床預后指標相關，年輕AML患者BLCAP基因的表達水平較高，臨床治療緩解率也較高。此外，BLCAP基因的表達與AML患者的療效及預后相關：其在治療后緩解者的表達高于未緩解者；治療后復發、病情進展及死亡患者的BLCAP表達明顯低于治療后病情穩定者。據此推測，檢測BLCAP基因在AML患者中的表達并結合常規臨床病理資料，可作為AML患者病情評估、療效預測的指標。但確切的結論及BLCAP基因在AML患者中的作用機制，尚需深入研究明確。

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Expression and significance of BLCAP gene in patients with acute myeloid leukemia.

DONG Xiao-lin,ZHANG Shao-jun,YANG Jie.Physical Examination Center,People's Hospital Affiliated to Hubei Medicine College,Shiyan 442000, Hubei,CHINA

ObjectiveTo investigate the expression of bladder cancer associated protein(BLCAP)gene in patients with acute myeloid leukemia(AML)and its relationship with the curative effect and prognosis.MethodsThe pathological data of 138 patients with primary AML in Department of Hematology in our hospital from January 2008 to December 2012 were collected.The expression of BLCAP gene in bone marrow of AML patients were detected by real-time quantitative PCR(RQ-PCR),and the relationships between the expression of AML gene,clinical pathological indexes and therapeutic effect,prognosis were analyzed.ResultsBLCAP was expressed in AML patients,and BLCAP expression in AML patients with different ages,white blood cells(WBC),hemoglobin(Hb)and other indicators showed statistically significant differences(P＜0.05).The BLCAP expression of patients with remission after AML treatment and event-free survival was significantly higher than that of the patients without remission after AML treatment and patientswith relapse,disease progression and death(P＜0.05).ConclusionThe expression of BLCAP gene in patients with AML is related to the therapeutic effect and prognosis,and it is expected to be the index of AML's disease evaluation and curative effect prediction.However,this conclusion still needs further research to confirm.

Bladder cancer associated protein(BLCAP);Acute myeloid leukemia(AML);Prognosis;Pathological indexes

R733.71

A

1003—6350(2016）09—1409—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.09.012

2005-10-29)

楊潔。E-mail:146653354@qq.com