對(duì)環(huán)磷腺苷葡胺注射劑含量測(cè)定方法的探討

趙悅輝 周立云

摘 要：本文主要對(duì)環(huán)磷腺苷葡胺注射劑中的有效成分含量進(jìn)行了測(cè)定，因此，本文重點(diǎn)對(duì)環(huán)磷腺苷葡胺注射劑含量測(cè)定方法進(jìn)行了探討分析，從而總結(jié)出以下相關(guān)結(jié)論，以供參考交流。

關(guān)鍵詞：環(huán)磷腺苷葡胺；注射劑；含量；測(cè)定方法

中圖分類號(hào)：R927 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

環(huán)磷腺昔注射劑是我國(guó)研發(fā)出的一種新型制劑，在國(guó)外并不任何相關(guān)產(chǎn)品以及標(biāo)準(zhǔn)體系。在環(huán)磷腺苷葡胺注射劑中，主要存在了兩種單一的化合物，一種是環(huán)磷腺昔，另一種則是葡甲胺，在目前環(huán)磷腺苷葡胺注射劑的制劑說(shuō)明書中，生產(chǎn)廠家已經(jīng)明確標(biāo)識(shí)出了該類制劑中的主要成分是環(huán)磷腺苷葡胺，我國(guó)現(xiàn)行相關(guān)規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)中已經(jīng)對(duì)環(huán)磷腺苷葡胺含量有著明確的規(guī)定，普遍認(rèn)為葡甲胺和環(huán)磷腺芬為同一類的化合物，同歸對(duì)目前含量測(cè)定方法進(jìn)行研究分析之后，從而提出更加準(zhǔn)確、高效的含量測(cè)量計(jì)算方法，充分保障測(cè)定結(jié)果的精確合理性。

1 檢驗(yàn)?zāi)康?/p>

我們?cè)趯?duì)產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行檢查分析過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)以下幾點(diǎn)問(wèn)題：第一，在對(duì)制藥企業(yè)進(jìn)行調(diào)研時(shí)，觀察到各制藥企業(yè)普遍是將環(huán)磷腺苷和葡甲胺作為生產(chǎn)原材料，通過(guò)按照一定量的比例投入生產(chǎn)，其中，并沒(méi)有任何一家制藥企業(yè)將單獨(dú)的環(huán)磷腺苷葡胺作為原料。第二，目前我國(guó)尚未存在關(guān)于環(huán)磷腺苷葡胺的理化性質(zhì)的研究文獻(xiàn)。因此，針對(duì)這一點(diǎn)問(wèn)題，我們需要對(duì)現(xiàn)行環(huán)磷腺苷葡胺注射劑含量的測(cè)定方法進(jìn)行考察，得出葡甲胺和環(huán)磷腺苷在色譜條件下產(chǎn)生的色譜行為，同時(shí)判斷出使用的含量計(jì)算方法是否準(zhǔn)確。

2 儀器與試劑

Waters 2695液相色譜儀，配2487紫外檢測(cè)器與2414示差檢測(cè)器；Sartorius BP211D電子天平；Sartorius PB一21。環(huán)磷腺昔標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)自中國(guó)生物制品檢定研究院，葡甲胺、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀、氨水、磷酸、構(gòu)株酸、冰乙酸、氫氧化鈉、三乙胺、四丁基澳化按等來(lái)自市售分析純，乙睛、甲醇為市售色譜純，水為純化水。環(huán)磷腺昔葡胺注射液與注射用環(huán)磷腺昔均為市場(chǎng)抽驗(yàn)獲得的上市藥品。

3 方法

3.1 色譜條件

本次環(huán)磷腺昔葡胺制劑抽驗(yàn)涉及到的現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)共29份，其中23份采用H PLC法，流動(dòng)相種類共有10種視表。用一八烷基硅烷鍵介硅膠為填充劑采用紫外檢測(cè)器與示差檢測(cè)器串聯(lián)，檢測(cè)波長(zhǎng)為257nm或259nm，柱溫30℃。

3.2 供試品溶液的配制

精密稱取出適量的環(huán)磷腺和葡甲胺，其中，環(huán)磷腺苷將作為對(duì)照品。通過(guò)加水之后，制成相應(yīng)比例的溶液，用作定位。然后，分別稱取適量的環(huán)磷腺苷葡胺注射液，加水制成含有環(huán)磷腺苷成分的溶液，作為供試品溶液。

4 結(jié)果

在對(duì)環(huán)磷腺苷葡胺注射劑含量進(jìn)行測(cè)定時(shí)，通常都會(huì)采用液相色譜法，我們?cè)趯?duì)檢測(cè)器色譜圖示差進(jìn)行查看過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，葡甲胺與環(huán)磷腺苷有著單獨(dú)的色譜峰。并且，在所有的流動(dòng)相體系中，也并未出現(xiàn)過(guò)單獨(dú)的無(wú)環(huán)磷腺苷葡胺色譜峰，以下重點(diǎn)列舉了環(huán)磷腺苷葡胺色譜峰的流動(dòng)相圖，如圖1、圖2、圖3所示。

5 討論

環(huán)磷腺苷屬于一種蛋白激酶致活劑，并且具有易用于水的物理性質(zhì)，我國(guó)相關(guān)醫(yī)藥學(xué)家在對(duì)環(huán)磷腺苷葡胺注射液進(jìn)行深入分析之后，重點(diǎn)對(duì)其溶解性問(wèn)題進(jìn)行了改善。并在后期的臨床應(yīng)用過(guò)程中將環(huán)磷腺苷葡胺上市，其中主要是將環(huán)磷腺苷當(dāng)做對(duì)照品，同時(shí)對(duì)環(huán)磷腺苷葡胺注射劑中的環(huán)磷腺苷葡胺含量進(jìn)行準(zhǔn)確的計(jì)算，具體表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：

（1）由于環(huán)磷腺苷易于在水中微溶，但在加入少量的葡甲胺之后，對(duì)溶解性問(wèn)題進(jìn)行了有效的抑制，使其理化性質(zhì)產(chǎn)生了明顯的變化，因此使得相關(guān)研究人員誤認(rèn)為生成了新的化合物。而葡甲胺屬于一種增溶劑，可以加大環(huán)磷腺苷的溶解濃度，這是因?yàn)楫?dāng)葡甲胺浸泡在水溶液中時(shí)，將會(huì)與環(huán)磷腺苷迅速結(jié)合在一起，從而形成復(fù)鹽。但是，以往內(nèi)這兩者的結(jié)合較為松散，很難形成穩(wěn)定性較高的化合物，因此無(wú)法獲取的高純度的環(huán)磷腺苷和葡甲胺反應(yīng)固體成品。

（2）在反向的色譜條件下，葡甲胺并未產(chǎn)生任何紫外信號(hào)，也沒(méi)有保留反相色譜柱。所以，在對(duì)液相色譜方法學(xué)進(jìn)行建立時(shí)，若是將十八烷基鍵合硅膠柱當(dāng)做主要的分析柱，紫外檢測(cè)器一般無(wú)法采集到紫外檢測(cè)器環(huán)磷腺苷葡胺注射劑中有關(guān)葡甲胺的信息。這就導(dǎo)致很多實(shí)驗(yàn)研究人員認(rèn)為制劑中的環(huán)磷腺苷峰就是環(huán)磷腺苷葡胺峰。并將現(xiàn)行的環(huán)磷腺苷作為對(duì)照品，同時(shí)計(jì)算出環(huán)磷腺苷葡胺含量。

從上面的檢測(cè)結(jié)果中我們可以看出，當(dāng)前很多含量測(cè)量方法是將環(huán)磷腺苷作為對(duì)照品，而采用環(huán)磷腺苷葡胺含量的計(jì)算方法并不合理，需要分別對(duì)環(huán)磷腺苷和葡甲胺進(jìn)行計(jì)算。

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