Livin、Survivin蛋白在非小細胞肺癌中的表達及意義

2016-03-04 07:28:40張春敭劉東雷朱登彥

中國老年學雜志 2016年4期

張春敭　楊　洋　劉東雷　朱登彥　趙　佳　吳　愷　吳　彬　張　巖　趙　松

(鄭州大學第一附屬醫院胸外科　河南省高等學校臨床醫學重點學科開放實驗室　鄭州大學腫瘤分子外科研究所鄭州市胸部腫瘤重點實驗室，河南　鄭州　450052)

張春敭楊洋劉東雷朱登彥趙佳吳愷吳彬張巖趙松

(鄭州大學第一附屬醫院胸外科河南省高等學校臨床醫學重點學科開放實驗室鄭州大學腫瘤分子外科研究所鄭州市胸部腫瘤重點實驗室，河南鄭州450052)

〔摘要〕目的研究Livin、Survivin蛋白在非小細胞肺癌(NSCLC)中的表達及意義。方法采用免疫組化SP法檢測45例NSCLC病人的癌和癌旁組織標本中Livin及Survivin的表達，分析其與臨床參數的關系以及二者表達的相關性，并通過隨訪研究其與NSCLC患者5年生存率的關系。結果Livin和Survivin在NSCLC癌組織中的陽性表達率均顯著高于癌旁組織(P<0.05)，在NSCLC癌組織中的表達與患者性別、年齡、是否吸煙、癌組織類型、腫瘤的大小、分化程度和TNM分期均無關(P>0.05)，而與是否有淋巴結轉移有關(P<0.05)；Livin和Survivin的表達無相關性；Livin和Survivin表達陽性者5年生存率均明顯低于表達陰性者(P<0.05)。結論Livin和Survivin蛋白與NSCLC發生、發展、轉移及預后有關，對NSCLC臨床診斷和預后判斷具有一定的指導意義。

〔關鍵詞〕Livin；Survivin；非小細胞肺癌

第一作者：張春敭(1982-)，男，博士，主要從事胸部腫瘤的基礎與臨床診治研究。

肺癌中最常見的為非小細胞肺癌(NSCLC)，占肺癌總數的80%以上〔1〕。Livin和Survivin是凋亡抑制蛋白家族(IAP)的新成員，已有大量研究證實，腫瘤細胞中二者有普遍過表達現象，已成為腫瘤預后和治療研究的新熱點〔2~4〕。本實驗旨在研究Livin和Survivin蛋白在NSCLC中的表達及其相關性，并分析其表達與5年生存率的關系。

1材料與方法

1.1一般資料收集鄭州大學第一附屬醫院2013年1~12月行手術切除的NSCLC患者的癌組織標本45例，以及相應的距腫瘤邊緣5 cm以上的癌旁組織標本作為研究對象。全部患者術前均無放療、化療及其他抗腫瘤治療史。其中男28例，女17例，年齡36~75歲，平均(58.5±14.3)歲；吸煙者25例，非吸煙者20例；其中腺癌13例，鱗癌32例；高、中、低分化癌分別為14例、20例和11例；腫瘤直徑≥3 cm者34例，<3 cm者11例；有淋巴結轉移者26例，無淋巴結轉移者19例；TNM分期為Ⅰ~Ⅱ期者28例，Ⅲ~Ⅳ期者17例。

1.2檢測方法標本均以10%的甲醛固定，石蠟包埋，切3 μm厚片，免疫組化SP法染色。一抗為兔抗人Livin和Survivin 單克隆抗體，由北京博奧森公司提供；免疫組化試劑盒由上海國源生物技術有限公司提供，SP 通用型試劑盒由美國ZYMED公司提供。陽性對照為在同一條件下染色的Survivin和Livin 陽性切片，陰性對照為磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗，試驗操作嚴格按說明書進行。

1.3結果判定以兩人雙盲法觀察。Survivin蛋白陽性表達為位于細胞質的棕黃色顆粒，Livin蛋白陽性表達為位于細胞質或細胞核中的棕黃色或棕褐色顆粒。每例切片隨機選取5個視野(400倍)，每個視野觀察并記錄100個腫瘤細胞中陽性細胞的染色強度和陽性細胞數。評分方法，(1)染色強度評分：0~3分相應分別為無著色、淡黃色、棕黃色和棕褐色；(2)陽性細胞數評分：陽性細胞比例≤5%為0分，5%～25%為1分，25%～50%為2分，>50%為3分；染色強度得分乘以陽性細胞比得分為綜合評分結果，以綜合評分≤1分為陰性，綜合評分>1分為陽性。

1.4統計學方法采用SPSS13.0軟件進行χ2檢驗。

2結果

2.1Livin和Survivin在癌組織和癌旁組織的表達Livin在NSCLC的癌組織和癌旁組織中的陽性表達率分別為68.9%(31例)和8.9%(4例)，差異有統計學意義(P<0.05)；Survivin在NSCLC的癌組織和癌旁組織中的陽性表達率分別為73.3%(33例)和6.7%(3例)，差異有統計學意義(P<0.05)。

2.2Livin和Survivin的表達與臨床指標的關系在不同性別、年齡、是否吸煙、癌組織類型、腫瘤的大小、分化程度和TNM分期的患者中，Livin和Survivin在NSCLC癌組織中的表達差異均無統計學意義(P>0.05)；有淋巴結轉移者Livin和Survivin的陽性率均明顯高于無淋巴結轉移者(P<0.05)，見表1。

2.3Livin與Survivin在NSCLC癌組織中表達的關系在Livin表達陽性的31例NSCLC癌組織中，Survivin陽性表達22例(71.0%)，在Livin表達陰性的14例NSCLC癌組織中，Survivin陽性表達11例(78.6%)，Livin與Survivin表達不具有相關性(χ2=0.29,P>0.05)。

2.4Livin和Survivin的表達與5年生存率的關系5年生存率在Livin和Survivin陽性組分別為25.8%(8/31)和30.3%(10/33)，陰性組分別為64.3%(9/14)和66.7%(8/12)，差異均有統計學意義(P<0.05)。

表1　Livin與Survivin的陽性表達與NSCLC臨床參數的關系〔n(%)〕

3討論

Livin和Survivin是作用較強的凋亡抑制因子〔5〕，過表達可引起細胞凋亡不足，與腫瘤發生和進展關系密切。覃國亮等〔6〕報道Survivin陽性表達率與NSCLC臨床分期和淋巴結轉移有關。王棟等〔7〕研究也指出Survivin蛋白表達的陽性率與淋巴結轉移和NSCLC腫瘤分期高度相關，而Livin蛋白表達陽性率則均與之無關。但張久榮等〔8〕報道Survivin蛋白表達的陽性率與NSCLC分化程度相關，而與淋巴結轉移無關，Livin 蛋白表達的陽性率與淋巴結轉移相關，而Survivin和Livin蛋白表達二者之間并無相關性，與韓寶林〔9〕的研究結果類似。

本研究結果提示Livin和Survivin可能在NSCLC的發生、發展中起重要作用，可能成為NSCLC診斷的新指標和潛在的治療靶點。但二者在NSCLC癌組織中的表達并不具有相關性，且二者可能參與了NSCLC淋巴結轉移，對預后判斷具有一定的提示作用。另外本研究提示Livin和Survivin 的陽性表達在一定程度上提示NSCLC預后不良。總之，Livin和Survivin蛋白與NSCLC發生、發展、轉移及預后有關，對NSCLC臨床診斷和預后判斷具有一定的指導意義，有望成為NSCLC治療的潛在靶點，為NSCLC的免疫治療提供新的思路。

4參考文獻

1徐燕，王孟昭.非小細胞肺癌免疫治療進展〔J〕.中國肺癌雜志，2014；17(1)：34.

2王棟，錢有輝.凋亡抑制蛋白 livin 的研究進展〔J〕.熱帶醫學雜志，2011；11(11)：1335-8.

3孟憲紅，莊麗維，付宜利.Livin 和 Survivin 在結腸癌及不同類型結腸腺瘤中的表達〔J〕.哈爾濱醫科大學學報，2011；45(1)：51-4.

4伍干元，李建軍，李龍平.Survivin 及 Livin 在中耳膽脂瘤組織中的表達及相關性研究〔J〕.中國實用醫藥，2011；6(1)：3-4.

5趙國徽，王家宏，賈志勇，等.Survivin 與結直腸癌關系的研究進展〔J〕.包頭醫學院學報，2011；27(6)：132-4.

6覃國亮，馬廣耀，冼磊，等.非小細胞肺癌中 Survivin 的表達及其臨床意義的研究〔J〕.微創醫學，2013；8(4)：400-2.

7王棟，錢有輝，王光鎖，等.Livin，Survivin 蛋白在非小細胞肺癌胞核中的表達及意義〔J〕.熱帶醫學雜志，2013；11(2)：10.

8張久榮，李田，陳石.Survivin 和 Livin 蛋白在非小細胞肺癌中的表達及臨床意義〔J〕.臨床肺科雜志，2012；17(1)：101-3.

9韓寶林.Bax，Livin 和 Survivin 在非小細胞肺癌組織中的表達〔J〕.天津醫藥，2012；40(5)：513-5.

〔2015-08-10修回〕

(編輯李相軍/滕欣航)