液相色譜-原子熒光光譜法測定紫菜中無機砷的分析

◎李景陽

（滕州市產品質量監督檢驗所，山東 滕州 277500）

液相色譜-原子熒光光譜法測定紫菜中無機砷的分析

◎李景陽

（滕州市產品質量監督檢驗所，山東 滕州 277500）

本文針對紫菜中無機砷采用液相色譜-原子熒光光譜法測定方法的分析。紫菜中的砷主要以一甲基砷酸、二甲基砷酸及砷糖、甜菜堿、砷膽堿等多種形態存在，根據原先的分光光度法與原子熒光法無法得到準確的無機砷數值，通過采用價態分析法才能得出較為準確的結果。

紫菜；無機砷；方法

目前市場上售賣的紫菜分為非即食干紫菜和即食干紫菜，非即食干紫菜又分為非即食干壇紫菜和非即食干條斑紫菜，紫菜中含有豐富的人體所需的營養成分和生理活性物質，深受廣大消費者喜愛。食品中的砷以不同的形式存在，包括無機砷和有機砷，其化學形態不同，毒性程度也不相同。紫菜中總砷含量很高，但主要以無毒的砷糖和少量低毒的二甲基砷的形態存在，而目前國際上均有無機砷的含量做評價，而測量方法選擇不當就會引起砷含量超標的現象。

干紫菜目前執行的是《干紫菜》（GB/T 23597-2009）標準，無機砷的測定按《食品安全國家標準 食品中總砷及無機砷的測定》（GB 5009.11-2014）執行，該標準規定按《食品中總砷及無機砷的測定》（GB/T 5009.11-2003，于2016年3月21日作廢）中無機砷的測定中第二法（銀鹽法）測定無機砷，取消了食品中無機砷測定的原子熒光法和銀鹽法。目前食品中無機砷的檢驗是按《食品安全國家標準 食品中總砷及無機砷的測定》（GB 5009.11-2014）中的兩種測定方法，即液相色譜-原子熒光光譜法和液相色譜-電感耦合等離子質譜法。

1 方法

1.1 主要儀器與試劑

液相色譜-原子熒光光譜聯用儀；離心機：轉速≥8 000 r/min；玻璃儀器使用前均經（1+4）硝酸浸泡24 h；電子天平：0.1 mg；恒溫干燥箱（50～300 ℃）；砷標準物質，1 000 μg/mL；鹽酸溶液（1+1）：量取適量鹽酸（優級純）加入等量超純水；硼氫化鉀、氫氧化鉀采用優級純試劑；實驗所需試劑其他試劑為分析純，水為超純水。

1.2 分析方法

準確稱取經充分粉碎后的1.0 g樣品（精確到0.001 g），置于50 mL塑料離心管中。加入20 mL 0.15 mol/L HNO3溶液，放置過夜，于90 ℃恒溫箱中熱浸提2.5 h，每0.5 h振搖1 min，提取完畢，取出冷卻至室溫，以8 000 r/min離心15 min，取5 mL上清液置于離心管中，加入5 mL正己烷，振搖1 min后，8 000 r/min離心15 min，棄去上層正己烷。按此過程重復一次，吸取下層清液，經0.45 μm有機濾膜及C18小柱凈化后進樣，按同一操作方法作空白試驗。

2 結果與分析

2.1 舊標準中的銀鹽法

紫菜中無機砷的測定原先采用GB/T 5009.11-2003中的銀鹽法，銀鹽法測定無機砷過程繁瑣，前期需要配制很多溶液，制作乙酸鉛棉花，在配制銀鹽溶液時需要放置過夜，配制好后需放于冰箱內冷藏保存。

銀鹽法測定紫菜中的無機砷，重復性不好，對于含量低測量準確度差，結果誤差大。在對浸提液用脫脂棉進行過濾時，如用純水沖洗不干凈，會導致結果偏低。在濾液合并后超過50 mL，反應溶液被稀釋后，導致在規定反應時間內，反應沒有完成，測定結果偏低。

2.2 液相色譜-原子熒光光譜法

液相部分流動相采用梯度洗脫（兩個流動相交替洗脫）海藻等植物體內，砷糖占絕大多數，而無機砷的形態含量極低，一般不超過總砷含量的1%。紫菜的砷形態測定譜圖出峰順序是：砷糖、二甲基砷、五價砷；砷標準溶液形態測定譜圖出峰順序是：三甲砷、一甲基砷、二甲基砷、五價砷。樣品中總無機砷含量等于三價砷含量與五價砷含量之和。本方法檢出限：稱樣量1 g，定容20 mL，方法檢出限：稻米0.02 mg/kg，水產動物0.03 mg/kg，嬰幼兒輔助食品樣品0.02 mg/kg。

3 討論

紫菜是人們生活中必不可少的食品，含有豐富的營養物質，其無機砷含量超標，會帶來很大的恐慌。但是經過各級檢測機構的檢測和價態分析研究，紫菜中的無機砷含量很低，不會對身體造成傷害，之前出現紫菜中無機砷含量超標帶來的恐慌，是由于處理方法不當和紫菜含有砷的形態不同。砷在自然界中以亞砷酸鹽、砷酸鹽、單甲基砷酸、二甲基砷酸、砷甜菜堿、砷膽堿、三甲基氧化砷、四甲基砷、二甲基乙基砷、二甲基乙酰砷、砷糖A、B、C、D等多種形態存在［4］。

目前紫菜中無機砷檢測按《食品安全國家標準 食品中總砷及無機砷的測定》（GB 5009.11-2014）中的液相色譜-原子熒光光譜法和液相色譜-電感耦合等離子質譜法。這兩種方法實用、可靠。原先銀鹽法處理過程中不注重細節就會導致結果偏低，檢驗結果的重復性較差，且這種方法不適合大批量檢測，效率比較低。現在第三方檢測機構和質檢機構一般都配備液相色譜-原子熒光光譜聯用儀，應用原子熒光形態分析（LC-AFS）（液相與原子熒光聯用）方法作為檢測方法的首個國家級標準。在新標準未頒布時，很多專業人士為探討紫菜等藻類中無機砷的真實含量，采用高效液相色譜原子熒光光度法聯用技術（LC-AFS）對紫菜中的無機砷含量及其砷的形態進行分析研究，得出了初步的研究結果［3］。還有學者根據氫化物原子熒光法存在的前處理問題采用超聲波提取原子熒光光度法測定紫菜中的無機砷含量。關于紫菜中無機砷的測定，采用液相色譜-原子熒光光譜法，為得到更準確、可靠結果，要不斷分析研究，注重前處理過程中的細節，得出準確可靠的分析結果。

［1］中華人民共和國國家衛生和計劃生育委員會. GB 5009.11-2014食品安全國家標準 食品中總砷和無機砷的測定［S］.北京：中國標準出版社，2014.

［2］中華人民共和國衛生部.GB 19643-2005/XG1-2007《藻類制品衛生標準》國家標準第1號修改單［S］. 北京：中國標準出版社，2007.

［3］吳成業，錢卓真，吳抒懷，等.紫菜中無機砷含量的分析研究［J］.福建水產，2010（1）：29-32.

［4］李海敏，張 勇.砷的形態分析方法研究進展［J］.理化檢驗（化學分冊），2006，42（4）：315-320.

Analysis the Inorganic Arsenic in Seaweed by LC- AFS

Li Jingyang
（Tengzhou Supervison Testing Institute of Product Quality， Tengzhou 277500， China）

This paper analysis the inorganic arsenic in seaweed by liquid chromatographyatom fluorescence spectrometry. Arsenic in seaweed exists mainly in the form of a variety of methyl arsenate， dimethyl arsenate and arsenic sugar， betaine， arsenic choline， according to the original points spectrophotometric method and atomic fluorescence method is unable to obtain the accurate arsenic numerical， through the use of valence state analysis method in order to obtain more accurate results.

Seaweed； Inorganic arsenic； Method

O657

10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.14.042