晚期NSCLC患者βⅢ—tubulin和Tau表達(dá)與紫杉醇敏感性的關(guān)系

仲立新　張莉　范瑞　鄭香玉

【摘要】 目的 觀察晚期非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者βⅢ-tubulin和Tau 表達(dá)情況與含紫杉醇化療敏感性的關(guān)系。方法 45例病理學(xué)確診的晚期NSCLC患者， 化療前對腫瘤組織采用免疫組化法檢測βⅢ-tubulin和Tau表達(dá)情況， 對所有患者采用紫杉醇+鉑類（順鉑或卡鉑）方案化療。觀察βⅢ-tubulin和Tau表達(dá)情況與含紫杉醇化療方案治療非小細(xì)胞肺癌有效率之間的關(guān)系。結(jié)果 βⅢ-tubulin和Tau表達(dá)與患者性別、年齡、病理類型、臨床分期及既往化療無關(guān)。βⅢ-tubulin陰性者紫杉醇化療有效率明顯高于βⅢ-tubulin陽性者（P<0.05）；Tau陰性表達(dá)者應(yīng)用紫杉醇化療的有效率示高于陽性表達(dá)者（P<0.05）；βⅢ-tubulin陰性及Tau表達(dá)陰性患者應(yīng)用紫杉醇化療有效率為83.3%。結(jié)論 βⅢ-tubulin和Tau可作為晚期NSCLC患者應(yīng)用紫杉醇聯(lián)合方案的有效性的預(yù)測指標(biāo)， 為晚期NSCLC患者的個體化治療提供參考。

【關(guān)鍵詞】 晚期非小細(xì)胞肺癌；微管蛋白；紫杉醇；化療敏感性

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.05.110

肺癌近年來成為全球癌癥發(fā)病率最高的腫瘤， 大概有85%的為NSCLC， 因大多數(shù)腫瘤被發(fā)現(xiàn)時已屬晚期， NSCLC總的5年生存率僅為10%～15%。化學(xué)治療仍是NSCLC的主要治療方法。研究顯示， 晚期NSCLC應(yīng)用鉑類為基礎(chǔ)聯(lián)合紫杉醇等化療方案有效率僅為30%～60%[1]， 隨著腫瘤分子生物學(xué)的進(jìn)展， 如何精準(zhǔn)和個體化的選擇化療藥物以期獲得更高的有效率， 是目前醫(yī)學(xué)研究的熱點。多項研究表明[2]， βⅢ-tubulin和Tau 表達(dá)可能與微管蛋白結(jié)合類化療藥物的敏感性有關(guān)。本次研究運(yùn)用免疫組化法對45例晚期NSCLC患者腫瘤組織內(nèi)的βⅢ-tubulin和Tau表達(dá)情況進(jìn)行測定， 同時化療方案為鉑類聯(lián)合紫杉醇的治療方案， 觀察其表達(dá)情況與含紫杉醇化療方案治療非小細(xì)胞肺癌有效率之間的關(guān)系， 為臨床精準(zhǔn)及個體化療提供依據(jù)。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇2012年6月～2014年6月收治的45例晚期NSCLC患者， 其中男29例， 女16例， 年齡29～75歲， 中位年齡52歲。所有患者符合以下條件：①確診為腺癌、鱗癌患者， 其中肺鱗癌25例， 肺腺癌20例；②化療前經(jīng)過相應(yīng)的檢查， 如胸部CT、全身骨掃描等， 確診為ⅢB～Ⅳ期患者；③在化療前均進(jìn)行肝腎功能、心電圖、血常規(guī)等常規(guī)性檢查。

1. 2 治療方案 化療前應(yīng)用免疫組化法檢測45例NSCLC患者腫瘤組織中βⅢ-tubulin和Tau表達(dá)水平， βⅢ-tubulin抗體試劑盒購自Zyued公司， 陽性組化法檢測。肺癌組織βⅢ-tubulin蛋白表達(dá)陽性為細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒。根據(jù)切片陽性細(xì)胞數(shù)分為：（-）陽性細(xì)胞數(shù)<10%；（+）陽性細(xì)胞數(shù)10%～25%；（++）陽性細(xì)胞數(shù)25%～75%；（+++）陽性細(xì)胞數(shù)>75%。

Tau蛋白在腫瘤組織中陰性表達(dá)為腫瘤細(xì)胞無染色， 陽性產(chǎn)物為棕黃色顆粒， 定位于細(xì)胞質(zhì)。根據(jù)陽性細(xì)胞染色范圍及強(qiáng)度分為4級。0為無明顯陽性細(xì)胞， 無著色；（+）為陽性細(xì)胞≤25%， 著色為淡黃色；（++）為陽性細(xì)胞25%～50%， 著色為棕黃色；（+++）為陽性細(xì)胞≥50%， 著色為深褐色；（++）～（+++）為陽性；0～（+）為陰性。每張切片由3位醫(yī)師盲法閱片。

1. 3 療效評價標(biāo)準(zhǔn) 療效評定按照實體瘤評價標(biāo)準(zhǔn)（RECIST1.0）分為完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、進(jìn)展（PD）、穩(wěn)定（SD）。有效率=（CR+PR）/總例數(shù)×100%。采用CT測量病灶大小（雙徑測量）。毒性評價按美國NCT指定的毒性評價通用標(biāo)準(zhǔn)（CTC第3版）評價， 從停止治療開始隨診， 每隔1～3個月重復(fù)1次， 直至患者死亡或失診。

1. 4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS11.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 βⅢ-tubulin和Tau表達(dá)與患者性別、年齡、病理類型、臨床分期及既往化療無關(guān)（P>0.05）。見表1。

2. 2 療效評價 βⅢ-tubulin陰性者紫杉醇化療有效率明顯高于βⅢ-tubulin陽性者（P<0.05）；Tau陰性表達(dá)者紫杉醇化療有效率高于陽性表達(dá)者（P<0.05）；βⅢ-tubulin陰性及Tau陰性表達(dá)患者應(yīng)用紫杉醇化療有效率為83.3%。見表2。

表2 βⅢ-tubulin患者紫杉醇化療有效率與

Tau有效率比較[n（%）]

項目 例數(shù) 有效率 P

βⅢ-tubulin陽性 21 5（23.8） 0.0193

βⅢ-tubulin陰性 24 14（58.3）

Tau陽性 20 5（25.0） 0.0364

Tau陰性 25 14（56.0）

βⅢ-tubulin陽性Tau陽性 30 6（20.0） 0.0000

βⅢ-tubulin陰性Tau陰性 24 20（83.3）

3 討論

紫杉醇是一種有絲分裂抑制劑， 其可與有絲分裂的紡錘體微管上的微管蛋白有機(jī)結(jié)合， 通過促使其聚合， 抑制解聚并保持微管蛋白的穩(wěn)定性， 以此來制約腫瘤細(xì)胞的有絲分裂[3]。它是目前最有效的抗腫瘤物質(zhì)之一， 但并不是對所有的腫瘤有效， 同一腫瘤的不同患者， 有效率也有較大差異。研究表明βⅢ-tubulin表達(dá)與作用在微管類化療藥物的敏感性有明顯的關(guān)系[4]， 機(jī)制可能如下：①βⅢ-tubulin TuBB突變， 影響tubulin和紫杉醇藥物的結(jié)合點， 但微管蛋白功能是不會受到影響的；②TuBB基因突變， 將微管蛋白聚合相關(guān)的微管蛋白二聚體的重要區(qū)域轉(zhuǎn)變， 同時減弱了之間的相互作用， 造成微管的不穩(wěn)定性。

當(dāng)前國內(nèi)、國外很多研究都表明了βⅢ-tubulin高表達(dá)NSCLC患者對紫杉類藥物耐藥， 低表達(dá)NSCLC患者對紫杉類藥物敏感[5]。Sève等[5]研究發(fā)現(xiàn)βⅢ-tnubuli低表達(dá)NSCLC患者對紫杉類藥物有效率為64.3%～78.6%， 而βⅢ-tnubuli高表達(dá)者有效率為16.7%～55.0%。與本研究發(fā)現(xiàn)一致， 且βⅢ-tnubulin低表達(dá)晚期和局部晚期NSCLC患者使用紫杉類藥物后重獲手術(shù)機(jī)會更高。

微管是細(xì)胞骨架的重要組成部分， 對細(xì)胞的有絲分裂、維持細(xì)胞形態(tài)等有重要作用。Tau基因是一個微管相關(guān)基因， 其主要的生物學(xué)作用是促進(jìn)微管組裝和穩(wěn)定微管。Mimori等[6]發(fā)現(xiàn)Tau蛋白低表達(dá)的胃癌組織對紫杉醇化療敏感性良好， 推測低濃度Tau蛋白環(huán)境中， 紫衫醇藥物分子容易與微管蛋白結(jié)合。國內(nèi)也有多個研究表明Tau基因與紫杉醇的敏感性有關(guān)。此次的研究表明， Tau基因表達(dá)陰性的晚期NSCLC患者， 應(yīng)用紫杉醇化療的敏感性高于Tau基因陽性表達(dá)者， 提示Tau基因可作為紫杉醇療效的預(yù)測因子， 為臨床肺癌個體化治療提供依據(jù)。

綜上所述， 紫杉醇化療的敏感性與多種因素相關(guān)， 多種基因的表達(dá)水平不同影響著腫瘤化療藥物的療效， βⅢ-tubulin和Tau蛋白表達(dá)情況可作為預(yù)測含紫杉醇化療方案有效性和指導(dǎo)患者個體化化療的指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)

[1] 吳平平， 李蘇宜.紫杉醇耐藥與β微管蛋白的研究進(jìn)展.臨床腫瘤學(xué)進(jìn)雜志， 2008， 13（8）：45-46.

[2] 楊全良， 將華蔚.紫杉醇耐藥與β-微管蛋白Ⅲ研究進(jìn)展.腫瘤研究與進(jìn)展， 2001， 23（2）：137.

[3] 楊俊泉， 高獻(xiàn)書.Ⅵ期非小細(xì)胞肺癌組織表達(dá)與紫杉醇類化療耐藥.第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報， 2008， 29（10）：930.

[4] Sève P， Reiman T， Dumontet C. The role of betaIII tubulin in predicting chemoresistance in non-small cell lung cancer. Lung Cancer， 2010， 67（2）：136-143.

[5] Sève P， Dumontet C. Is class Ⅲ beta-tubulin a predictive factor in patients receiving tubulin-binding agents？ Lancet Oncol， 2008， 9（2）：168-175.

[6] Mimori K， Sadanaga N， Yoshikawa Y. et al. Reduced tau expression in gastric cancer can identify candidates for successfal paclitaxel treatment. British Journal of Cancer， 2006， 94（12）：1894-1897.

[收稿日期：2015-09-17]