急性胰腺炎患者人巨細(xì)胞病毒感染的血清學(xué)特征及臨床特征分析▲

曾 波 田文廣

(重慶醫(yī)科大學(xué)附屬永川醫(yī)院1 消化內(nèi)科，2 感染科，重慶市 402160，E-mail：zengbo_130@126.com)

論著·臨床研究

急性胰腺炎患者人巨細(xì)胞病毒感染的血清學(xué)特征及臨床特征分析▲

曾 波1田文廣2

(重慶醫(yī)科大學(xué)附屬永川醫(yī)院1 消化內(nèi)科，2 感染科，重慶市 402160，E-mail：zengbo_130@126.com)

目的 探討急性胰腺炎(AP)患者人巨細(xì)胞病毒(HCMV)感染的血清學(xué)特征及臨床特征分析。方法 收集456例AP患者(AP組)和280例健康普通人(對(duì)照組)的血清標(biāo)本，采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)所有標(biāo)本中HCMV的IgG和IgM值，分析AP患者HCMV感染的血清學(xué)及臨床特征。結(jié)果 AP組和對(duì)照組血清HCMV-IgG陽(yáng)性率分別為96.05%(438/456)和96.07%(269/280)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。AP組血清HCMV-IgM陽(yáng)性率為9.87%(45/456)，明顯高于對(duì)照組的4.64%(13/280)(P<0.05)。HCMV-IgM陽(yáng)性AP患者重度AP所占比例明顯高于HCMV-IgM陰性AP患者(P<0.05)。不同年齡段患者的HCMV-IgG陽(yáng)性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，HCMV-IgG陽(yáng)性率隨年齡增加而升高。農(nóng)村居住患者、女性患者及文化程度低患者HCMV-IgG陽(yáng)性率增高(P<0.05)。HCMV-IgG陽(yáng)性率在不同AP病因、不同病情嚴(yán)重程度、不同體重指數(shù)以及是否吸煙患者中比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 AP患者HCMV-IgG陽(yáng)性率超過90%，與普通人群無明顯差異；AP患者HCMV-IgM陽(yáng)性率高于普通人群，且HCMV-IgM陽(yáng)性AP患者中，重度AP比例較高；不同年齡、居住地、性別或文化程度的AP患者HCMV既往感染率有明顯差異。

急性胰腺炎；人巨細(xì)胞病毒；血清學(xué)特征；臨床特征

人巨細(xì)胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)屬于皰疹病毒科，在人群中的感染率很高。多數(shù)的HCMV感染屬于亞臨床感染或潛伏感染，當(dāng)宿主的免疫系統(tǒng)失去平衡，如發(fā)生腫瘤、器官移植以及HIV感染等時(shí)，HCMV出現(xiàn)潛伏再激活或再感染，導(dǎo)致較嚴(yán)重的后果。本實(shí)驗(yàn)通過橫斷面隊(duì)列研究，旨在探討急性胰腺炎(acute pancreatitis，AP)患者HCMV血清學(xué)特征及與其臨床、社會(huì)特征的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2013年10月至2015年7月我院收治AP患者456例的血清標(biāo)本(AP組)。同期收集在我院體檢健康普通人280例血清標(biāo)本為對(duì)照組。兩組均排除腫瘤、HIV感染、器官移植術(shù)后、長(zhǎng)期使用免疫抑制劑者。AP組男140例，女316例，平均年齡48.5歲，輕中度AP 366例、重度AP 90例。對(duì)照組男92例，女188例，平均年齡46.3歲。兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法 詳細(xì)記錄兩組性別、年齡、體重指數(shù)、居住地、受教育程度、吸煙、胰腺炎嚴(yán)重程度及病因等資料。胰腺炎嚴(yán)重程度分級(jí)參照《中國(guó)急性胰腺炎診治指南(2013年，上海)》[1]。吸煙定義：連續(xù)或累計(jì)吸煙6個(gè)月或以上者。

1.3 電化學(xué)法檢測(cè)血清HCMV-IgG和IgM 按Roche Modular E170 ECL2010 cobas e602標(biāo)準(zhǔn)操作流程嚴(yán)格進(jìn)行：(1)通過促凝真空管收集兩組血標(biāo)本，抽血3～5 ml，立即送檢，含沉淀的標(biāo)本使用前離心(2 000～3 000 r/min，5 min)，放入儀器后應(yīng)在2 h內(nèi)測(cè)定以免蒸發(fā)的影響；(2)取 10 μl標(biāo)本，用通用稀釋液(Roche公司，批號(hào)18759202)以1 ∶20倍進(jìn)行稀釋，加入生物素標(biāo)記HCMV重組抗體；(3)加入釕標(biāo)記的HCMV重組抗體和鏈霉親和素包被的微粒混勻；(4)反應(yīng)混和液吸到測(cè)量池中，微粒通過磁鐵吸附到電極上，未結(jié)合的物質(zhì)被清洗液洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，通過光電倍增管進(jìn)行測(cè)定，儀器通過2點(diǎn)定標(biāo)曲線以及試劑條碼提供的母定標(biāo)曲線計(jì)算出結(jié)果。HCMV-IgG值≥1.0 U/ml為陽(yáng)性，HCMV-IgM值≥1.0 U/ml為陽(yáng)性。所用試劑和實(shí)用儀器：檢測(cè)試劑HCMV-IgM2010/E170/e602和IgG2010/E170/e602購(gòu)自Roche公司(批號(hào)：18701703、18551803)，該試劑不受黃疸、溶血、血脂、生物素等干擾，不受類風(fēng)濕因子和透析的干擾；檢測(cè)儀器Modular E170 ECL2010 cobas e602購(gòu)自Roche公司。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 使用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組血清HCMV-IgG、HCMV-IgM陽(yáng)性率比較 AP組和對(duì)照組血清HCMV-IgG陽(yáng)性率分別為96.05%(438/456)和96.07%(269/280)，兩組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.000，P=0.997)。AP組血清HCMV-IgM陽(yáng)性率為9.87%(45/456)，明顯高于對(duì)照組的4.64%(13/280)(χ2=6.520，P=0.013)。

12.2 HCMV-IgM陽(yáng)性和陰性AP患者重度AP所占比例 45例HCMV-IgM陽(yáng)性AP患者中，重度AP占37.78%(17/45)；411例HCMV-IgM陰性AP患者中，重度AP占17.76%(73/411)； HCMV-IgM陽(yáng)性AP患者重度AP所占比例明顯大于HCMV-IgM陰性AP患者(χ2=10.300，P=0.002)。

2.3 HCMV-IgG陽(yáng)性患者臨床特征分析 不同年齡段患者的HCMV-IgG陽(yáng)性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，HCMV-IgG陽(yáng)性率隨年齡增加而升高。農(nóng)村居住患者、女性患者及文化程度低患者HCMV-IgG陽(yáng)性率增高(P<0.05)。HCMV-IgG陽(yáng)性率在不同AP病因、不同病情嚴(yán)重程度、不同體重指數(shù)以及是否吸煙患者中比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表1 HCMV-IgG陽(yáng)性AP患者相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)因素分析(n，%)

3 討 論

HCMV具有潛伏與活動(dòng)的生物學(xué)特征，可導(dǎo)致各種先天畸形及引起免疫缺陷個(gè)體嚴(yán)重感染。人感染HCMV后，可產(chǎn)生IgG和IgM類抗體，IgM 抗體陽(yáng)性可作為活動(dòng)性感染的指標(biāo)[2]，IgG可判斷有無既往感染，IgG陽(yáng)性患者有發(fā)生激活再感染的可能[3]。普通人群感染多表現(xiàn)為無癥狀的潛伏感染，免疫功能低下的人群(如器官移植者、免疫抑制患者、新生兒等)可出現(xiàn)顯性感染或激活再次感染，并導(dǎo)致嚴(yán)重后果[4]。有大量學(xué)者對(duì)于非免疫功能低下患者HCMV激活感染進(jìn)行了研究，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，非免疫功能缺陷患者發(fā)生危重病時(shí)亦存在HCMV激活，且HCMV的激活與死亡率及相關(guān)臨床不良事件發(fā)生率相關(guān)[5-8]。AP是臨床比較常見的一種危急重癥，大部分輕中度患者經(jīng)過適當(dāng)治療，可以完全治愈；重度AP死亡率高。了解AP患者血清學(xué)特征及其與臨床、社會(huì)特征等相關(guān)危險(xiǎn)因素的關(guān)系，對(duì)于預(yù)防AP患者HCMV原發(fā)感染及潛伏-激活感染有重要臨床意義。

本文結(jié)果顯示，AP組和對(duì)照組血清HCMV-IgG陽(yáng)性率分別為96.05%(438/456)和96.07%(269/280)，兩者比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，這說明既往感染HCMV的AP患者血清HCMV-IgG陽(yáng)性率與普通人群相似。美國(guó)青少年血清HCMV-IgG陽(yáng)性率為50%～70%[9]，隨著年齡增長(zhǎng)可達(dá)到80%[10]；荷蘭普通人群血清HCMV-IgG陽(yáng)性率為45%[11]。有學(xué)者調(diào)查墨西哥杜蘭戈市343名懷孕婦女后發(fā)現(xiàn)HCMV-IgG陽(yáng)性率為65.6%[12]。有學(xué)者報(bào)告，發(fā)展中國(guó)家普通人群HCMV-IgG陽(yáng)性率較高，為90%～100%[13]，與本文對(duì)照組血清HCMV-IgG陽(yáng)性率為96.07%相符。

秦雪等[14]報(bào)告207例獻(xiàn)血者血清HCMV-IgM陽(yáng)性率為13.0%，王希英等[15]報(bào)告185例肺結(jié)核患者血清HCMV-IgM陽(yáng)性率為15.1%，均明顯高于本文對(duì)照組的4.64%。本文結(jié)果顯示，AP組血清HCMV-IgM陽(yáng)性率為9.87%(45/456)，明顯高于對(duì)照組的4.64%(13/280)(P<0.05)。其原因可能與AP患者存在免疫功能紊亂，易引起HCMV原發(fā)感染及體內(nèi)潛伏-激活感染有關(guān)。亞組分析顯示，HCMV-IgM陽(yáng)性AP患者中，重度AP占37.78%；HCMV-IgM陰性AP患者中，重度AP占17.76%；前者重度AP所占比例明顯高于后者(P<0.05)，這可能與HCMV活動(dòng)性感染后降低胰腺炎患者免疫功能，對(duì)病情進(jìn)展產(chǎn)生一定影響有關(guān)，但其具體機(jī)制還需進(jìn)一步研究證實(shí)。

本文結(jié)果提示，隨年齡增加，HCMV-IgG陽(yáng)性率逐漸增高，可能與整個(gè)生命過程中反復(fù)、累積的巨細(xì)胞病毒暴露有關(guān)。但是，日本及西班牙的研究提示老年人HCMV-IgG陽(yáng)性可能僅僅提示兒童時(shí)期感染，隨著衛(wèi)生、社會(huì)經(jīng)濟(jì)狀況、健康條件改善，以及年齡增加，HCMV-IgG陽(yáng)性率下降[16-17]。本文結(jié)果提示，AP患者中女性HCMV-IgG陽(yáng)性率高于男性(P<0.05)，這可能和中國(guó)女性的傳統(tǒng)社會(huì)角色有關(guān)，不論是在家里還是在工作休息中，中國(guó)女性與兒童的接觸比男性多。多項(xiàng)研究指出兒童是HCMV的一個(gè)重要來源，很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)，它們可以通過唾液和尿液排出病毒，故女性比男性有更多機(jī)會(huì)暴露于HCMV[18-19]。

居住地及文化水平反映的是一種綜合社會(huì)經(jīng)濟(jì)地位狀態(tài)。Cannon等[20]在一項(xiàng)薈萃分析中報(bào)告，較低的社會(huì)經(jīng)濟(jì)地位AP患者HCMV-IgG陽(yáng)性率比較高的社會(huì)經(jīng)濟(jì)地位患者高10%～30%。本文資料顯示，居住在農(nóng)村及低文化水平AP患者的HCMV-IgG陽(yáng)性率分別明顯高于居住在城市及高文化水平患者，可能是居住在農(nóng)村及低文化水平者衛(wèi)生條件較差、居住條件較擁擠、不良生活習(xí)慣較多等，導(dǎo)致HCMV感染較多。有學(xué)者指出改變生活及行為習(xí)慣，如勤洗手，改變喂養(yǎng)方式，不分享食物、食具、玩具，清洗被兒童唾液及尿液接觸的物品等可以減少HCMV的暴露，預(yù)防HCMV感染[21]。本文資料顯示，吸煙AP患者HCMV-IgG陽(yáng)性率略低于不吸煙AP患者，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，可能與大部分吸煙的AP患者為男性有關(guān)，而男性HCMV-IgG陽(yáng)性率低女性。

綜上所述，AP患者HCMV-IgG陽(yáng)性率超過90%，與普通人群比較無明顯差異，這部分患者理論上均存在發(fā)生HCMV激活感染可能；AP患者活動(dòng)性感染率(HCMV-IgM陽(yáng)性)高于普通人群，而HCMV-IgM陽(yáng)性AP患者中，重度AP比例較高。不同年齡、居住地、性別或文化程度的AP患者HCMV既往感染率有明顯差異；而不同病因、不同嚴(yán)重程度、不同體重指數(shù)、是否吸煙的AP患者HCMV既往感染率無明顯差異。

[1] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì)胰腺疾病學(xué)組,《中華胰腺病雜志》編輯委員會(huì),《中華消化雜志》編輯委員會(huì)等.中國(guó)急性胰腺炎診治指南(2013,上海)[J].中華胰腺病雜志,2013,13(2):73-78.

[2] Revello MG,Gerna G.Diagnosis and management of human cytomegalovirus infection in the mother,fetus,and newborn infant[J].Clin Microbiol Rev,2002,15(4):680-715.

[3] Hoppe B,Gaedicke G,Kiesewetter H,et al.Response to intravenous immunoglobulin G in an infant with immunoglobulin A-associated autoimmune haemolytic anaemia[J].Vox Sang,2004,86(2):151-153.

[4] Fowler KB,Stagno S,Pass RF,et al.The outcome of congenital cytomegalovirus infection in relation to maternal antibody status[J].N Engl J Med,1992,326(10):663-667.

[5] Heininger A,Jahn G,Engel C,et al.Human cytomegalovirus infections in non-immunosuppressed critically ill patients[J].Crit Care Med,2001,29(3):541-547.

[6] Limaye AP,Kirby KA,Rubenfeld GD,et al.Cytomegalovirus reactivation in critically ill immunocompetent patients[J].JAMA,2008,300(4):413-422.

[7] Ziemann M,Sedemund-Adib B,Reiland P,et al.Increased mortality in long-term intensive care patients with active cytomegalovirus infection[J].Crit Care Med,2008,36(12):3 145-3 150.

[8] Chilet M,Aguilar G,Benet I,et al.Virological and immunological features of active cytomegalovirus infection in nonimmunosuppressed patients in a surgical and trauma intensive care unit[J].J Med Virol,2010,82(8):1 384-1 391.

[9] Stadler LP,Bernstein DI,Callahan ST,et al.Seroprevalence of cytomegalovirus(CMV) and risk factors for infection in adolescent males[J].Clin Infect Dis,2010,51(10):e76-e81.

[10]Musiani M,Zerbini M,Zauli D,et al.Impairment of cytomegalovirus and host balance in elderly subjects[J].J Clin Pathol,1988,41(7):722-725.

[11]Korndewal MJ,Mollema L,Tcherniaeva I,et al.Cytomegalovirus infection in the Netherlands: seroprevalence,risk factors,and implications[J].J Clin Virol,2015,63:53-58.

[12]Alvarado-Esquivel C,Hernndez-Tinoco J,Snchez-Anguiano LF,et al.Seroepidemiology of cytomegalovirus infection in pregnant women in Durango City,Mexico[J].BMC Infect Dis,2014,14:484.

[13]郭麗麗.人巨細(xì)胞病毒感染的流行病學(xué)研究進(jìn)展[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2010,31(10):1 131-1 133.

[14]秦 雪,李 山,農(nóng)玉初,等.微粒子酶免法檢測(cè)獻(xiàn)血者的巨細(xì)胞病毒感染情況[J].廣西預(yù)防醫(yī)學(xué),2001,7(5):301-302.

[15]王希英,張國(guó)林.肺結(jié)核患者巨細(xì)胞病毒感染的血清學(xué)檢測(cè)及意義[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2007,34(8):1 591,1 593.

[16]De Ory F,Ramírez R,García Comas L,et al.Is there a change in cytomegalovirus seroepidemiology in Spain?[J].Eur J Epidemiol,2004,19(1):85-89.

[17]Taniguchi K,Watanabe N,Sato A,et al.Changes in cytomegalovirus seroprevalence in pregnant Japanese women-a 10-year single center study[J].J Clin Virol,2014,59(3):192-194.

[18]Ford-Jones EL,Kitai I,Davis L,et al.Cytomegalovirus infections in Toronto child-care centers: a prospective study of viral excretion in children and seroconversion among day-care providers[J].Pediatr Infect Dis J,1996,15(6):507-514.

[19]Pass RF,Hutto C,Ricks R,et al.Increased rate of cytomegalovirus infection among parents of children attending day-care centers[J].N Engl J Med,1986,314(22):1414-1418.

[20]Cannon MJ,Schmid DS,Hyde TB.Review of cytomegalovirus seroprevalence and demographic characteristics associated with infection[J].Rev Med Virol,2010,20(4):202-213.

[21]Adler SP,Finney JW,Manganello AM,et al.Prevention of child-to-mother transmission of cytomegalovirus among pregnant women[J].J Pediatr,2004,145(4):485-491.

Serological and clinical characteristics of human cytomegalovirus infection in patients with acute pancreatitis

ZENGBo1,TIANWen-guang2

(1DepartmentofGastroenterology,2DepartmentofInfection,AffiliatedYongchuanHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing402160,China)

Objective To investigate the serological and clinical characteristics of human cytomegalovirus(HCMV) infection in patients with acute pancreatitis(AP).Methods Serum samples were collected form 456 patients with AP(AP group) and 280 healthy individuals(control group).HCMV-IgG and -IgM of all the samples were determined by electrochemiluminescence immunoassay.And the serological and clinical characteristics of HCMV infection in patients with AP were analyzed.Results The HCMV-IgG positive rate of AP group and control group were 96.05%(438/456) and 96.07%(269/280) respectively,but there was no statistical significance between two groups(P>0.05).The HCMV-IgM positive rate of AP group was 9.87%(45/456),and was significantly higher than that of control group[4.64%(13/280),P<0.05].The AP patients with positive HCMV-IgM had significantly higher proportion of severe AP compared to the AP patients with negative HCMV-IgM(P<0.05).There was significant difference in the HCMV-IgM positive rate among patients with different age ranges(P<0.05),and the HCMV-IgM positive rate increased with the increasing age.Patients lived in the rural area,female patients or patients with poor education background had higher HCMV-IgM positive rates(P<0.05).There was no significant difference in the HCMV-IgM positive rate among patients with different pathogenesis of AP,patients with different severities of AP,patients with different body mass indices,or between smokers and non-smokers(P>0.05).Conclusion The HCMV-IgG positive rate of patients with AP is more than 90%,but does not differ from the rate of common individuals.The HCMV-IgM positive rate of patients with AP is higher than that of common individuals.And the proportion of patients with severe AP is higher in the patients with positive HCMV-IgM.There is a significant difference in the past HCMV infection rate among AP patients with different ages,with different living areas,with different genders,or with different education backgrounds.

Acute pancreatitis,Human cytomegalovirus,Serological characteristics,Clinical characteristics

重慶市衛(wèi)生局課題(2012-2-177)

曾波(1981～)，男，碩士，主治醫(yī)師，研究方向：消化道腫瘤內(nèi)鏡診治、ERCP診治和肝病基礎(chǔ)與臨床。

田文廣(1969～)，男，碩士，副教授，研究方向：肝病及傳染病學(xué)，E-mail：706815742@qq.com。

R 576

A

0253-4304(2016)03-0362-04

10.11675/j.issn.0253-4304.2016.03.19

2016-01-10

2016-03-10)