柳州市RhD陰性獻血者血型抗原分析

李雄英 李聚林 許建榮 孔慶芳 譚慶芬 楊 珊 徐陽曦

(廣西血液中心輸血研究室，柳州市 545005，E-mail：fanqielushui@126.com)

調查分析

柳州市RhD陰性獻血者血型抗原分析

李雄英 李聚林 許建榮 孔慶芳 譚慶芬 楊 珊 徐陽曦

(廣西血液中心輸血研究室，柳州市 545005，E-mail：fanqielushui@126.com)

目的 了解柳州市RhD陰性獻血者Rh血型抗原分布，建立RhD陰性表型數據庫。方法 對廣西血液中心425份初篩RhD陰性標本采用間接抗球蛋白試驗進行確認，并分析陰性獻血者Rh表型及Rh C、c、E、e抗原陽性頻率分布特征。陰性獻血者4種Rh抗原陽性頻率分布依次為e(99.02%)>c(9.17%)>C(42.26%)>E(6.88%)。結果 425份疑似RhD陰性血標本中，確認為RhD陰性407份，弱D型18份；407份RhD陰性血標本的ABO血型分布依次為：O型158份(38.82%)>A型119份(29.24%)>B型102份(25.06%)>AB型28份(6.88%)；共檢出7種表型，依次為 dccee(51.60%)>dCcee(31.94%)>dCCee(9.58%)> dccEe(5.16%)> dccEE(0.98%)>dCcEe(0.49%)>dCCEe(0.25%)，未檢出dCcEE及dCCEE表型。Rh陰性獻血者C、c、E、e 4種Rh抗原的陽性頻率由高到低依次為：e(99.02%)>c(90.17%)>C(42.26%)>E(6.88%)。結論 掌握柳州市RhD陰性獻血者Rh血型抗原分布特征，建立RhD陰性供血者表型數據庫，有利于為RhD陰性患者及時提供配型相合的血液；對科學管理RhD陰性血源和合理應用RhD陰性血液具有重要意義。

RhD陰性；獻血者；血型；Rh表型；柳州市

Rh血型系統是目前被國際輸血協會(International Society of Blood Transfusion，ISBT)確認的35個紅細胞血型系統中最具復雜性和多態性的血型系統，有61種抗原，也是臨床輸血中僅次于ABO的重要血型系統。在復雜的Rh血型系統中，與臨床輸血密切相關的主要是5個抗原：D、C、c、E、e，免疫原性強弱順序依次為D>E>c>C>e[1]，可通過輸血、妊娠等免疫途徑產生相應抗體而引起溶血性輸血反應、新生兒溶血病等。在我國漢族人群中RhD陰性者僅占0.2%～0.5%[2]，血源稀少。為能使RhD陰性患者尤其是產生Rh同種免疫性抗體的患者及時安全地進行血液輸注，在無償獻血者中進行RhD抗原陰性的篩選與確認，建立RhD抗原陰性獻血者表型檔案庫，成為采供血機構的一項重要工作。我中心從2002年開始建立RhD 陰性獻血者資料庫[3]，并從2007年開始增加檢測RhD陰性獻血者的C、c、E、e 4種Rh抗原，又建立了RhD陰性獻血者Rh表型數據庫。筆者對我市2007～2015年確認為RhD陰性獻血者的ABO血型和Rh表型情況進行回顧性統計分析，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 標本來源 標本來源于2007年1月至2015年12月，在柳州市廣西血液中心首次進行無償獻血，經初篩疑似為RhD陰性的血標本425份。獻血者年齡18～55歲，男性220名，女性205名。

1.2 試劑和儀器 IgM抗-D、IgG抗-D(上海血液生物醫藥有限責任公司，北京金豪制藥有限公司)；IgM+ IgG抗-D(加拿大Dominion Biologicals Limited公司)； IgM抗-C、抗-c、抗-E、抗-e試劑、抗球蛋白試劑(IgG+C3d)(上海血液生物醫藥有限責任公司)；細胞洗滌離心機(型號Centra W，美國Thermo Scientific公司生產)。

1.3 方法 采用IgM抗-D血清對獻血者血標本進行初篩。對初篩陰性的標本，用3批以上不同廠家不同批號的IgG型或IgM+IgG型抗-D試劑，做試管法間接抗球蛋白試驗(indirect antiglobulin test，IAT)進行確認，如IAT中有一批以上試劑檢測結果為陽性則判斷為弱D，將其認定為RhD陽性供血者；如IAT中所有批號結果均為陰性則鑒定為 RhD陰性。C、c、E、e 4種Rh抗原檢測采用常規鹽水試管法，按說明書進行操作，凝集者判為陽性，不凝集者判為陰性。

1.4 Rh血型表型數據庫的建立 采用計算機管理，對確認為RhD陰性并檢測合格的獻血者，建立詳細檔案，將RhD陰性供血者的個人資料(包括姓名、性別、出生年月、年齡、通訊地址、聯系電話、獻血日期，獻血碼等)，ABO血型，Rh表型等錄入Excel軟件，形成RhD陰性獻血者Rh血型表型數據庫。當臨床患者需要輸注Rh血型匹配的血液時，可迅速在數據庫中檢索合適的獻血者，及時滿足臨床輸血的需求。

2 結 果

初篩疑似為RhD陰性的425份標本中，經IAT確認為弱D型18份，占4.24%(18/425)，陰性407份，占95.76%(407/425)。407份RhD陰性標本中，ABO血型分布排序為：O>A>B>AB；共檢出7種表型，檢出率由高到低依次為dccee>dCcee>dCCee>dccEe>dccEE>dCcEe>dCCEe，未檢出dCcEE及dCCEE表型。見表1。柳州市RhD陰性獻血者Rh表型頻率與其他地區人群的比較結果見表2。Rh陰性獻血者C、c、E、e 4種Rh抗原的陽性頻率由高到低依次為：e(99.02%)>c(90.17%)>C(42.26%)>E(6.88%)，由此推斷出陰性患者產生Rh系統不規則抗體時隨機配血相合概率(100%-陽性頻率)，高低順序為:抗-E(93.12%)>抗-C(57.74%)>抗-c(9.83%)>抗-e(0.98%)，見表3。

表1 407名RhD陰性獻血者Rh表型分布(n，%)

表2 柳州市RhD陰性獻血者Rh表型頻率與其他地區人群比較(%)

表3 陰性獻血者4種Rh抗原陽性頻率及陰性患者產生Rh抗體時隨機配血相合概率(%)

3 討 論

柳州市RhD陰性獻血者表型頻率特點與國內其他地區報告結果[4-11]相似，同時也有自身的特點。全國各地區表型分布不平衡，均以dccee和dCcee為主，其他表型比例較低，頻率排序為dccee>dCcee>dCCee或dccEe>dccEE>dCcEe或dCCEe。不同地區表型頻率高低排序差異主要是dCCee和dccEe，柳州、金華、青島、西安等的dCCee頻率高于dccEe頻率，而聊城、唐山、安陽、呼和浩特、咸陽等的dccEe頻率高于dCCee頻率。柳州dCcEe頻率(0.49%)低于其他地區(1.42%～3.55%)。dccEE頻率和dCCEe頻率在各地區的檢出率都很低，dccEE頻率小于1%，dCCEe只在柳州、安陽和西安有檢出。以上分析表明中國南北方各地區RhD陰性獻血者Rh表型既有共同的分布特征，又存在一定的地區差異，這些差異可能與樣本量、檢測試劑、調查方法、民族構成、血型遺傳多態性等多種因素有關。

由于不同地區、種族人群Rh血型遺傳多態性不同，導致相應抗原頻率、免疫概率不同，因此進行不同地區Rh血型抗原分布調查具有重要意義，研究得到的Rh表型分布資料，對估計臨床Rh系統不規則抗體的產生概率及指導特殊配血有參考價值[12]，亦有助于判斷已產生Rh抗體患者尋找血型匹配血源的難易程度。本調查表明407名陰性獻血者的4種Rh抗原陽性頻率由高到低依次為：e(99.02%)>c(90.17%)>C(42.26%)>E(6.88%)，由此可推斷出Rh陰性患者產生不規則抗體與隨機RhD陰性血液配血相合概率的高低順序為：抗-E(93.12%)> 抗-C(57.74%)> 抗-c(9.83%)> 抗-e(0.98%)。可見產生抗-E、抗-C的陰性患者配血相合概率較高，而產生抗-c、抗-e的陰性患者配血相合概率則很低。據此我們可預測倘若體內存在抗-E、抗-C的陰性患者需要輸血，尋找Rh相合血液會相對容易一些；而存在抗-c、抗-e抗體的Rh陰性患者如果在短時間內需要大量輸血或長期需要依賴輸血治療，為其尋找多位血型匹配的獻血者則會極其困難。在難以獲得相合血液情況下，只能冒險給病人輸注不能完全相合的血液。因此應特別關注罕見c抗原陰性包括dCCee和dCCEe型及e抗原陰性的dccEE型。

我國Rh陰性血源稀少，而隨著醫療和社會保障體系的不斷完善，RhD陰性血液的需求量不斷增多，經常會出現供不應求的局面。為了保障Rh陰性患者及時、安全輸血，在掌握了柳州市陰性獻血者Rh表型分布特征的基礎上，我們建議做好以下幾方面的工作：(1)加大宣傳力度，合理管理Rh陰性獻血者，繼續篩查Rh陰性獻血者并檢測表型，不斷擴大Rh陰性表型庫。(2)為患者制定合適的輸血策略，指導臨床對Rh陰性患者盡量進行自身輸血，以減少產生免疫性抗體的概率。(3)對于長期依賴輸血治療及有妊娠史的RhD陰性患者，應常規篩查不規則抗體，并檢測C、c、E、e 4個Rh抗原，條件允許的情況下盡量輸注Rh血型完全相合的血液，以保證輸血安全。(4)要充分考慮到極少部分含有Rh抗體的RhD陰性患者對血液的特殊要求。由于O型dCCee(9.58%)、dCCEe(0.25%)、dccEE(0.98%)所占比例低，不會對日常RhD陰性患者的用血需求造成沖擊，再加上O型紅細胞無A、B抗原的特點而在急需時具有通用性好的特點，節約有效，因而更具有實際的臨床應用意義[13]。目前我中心已開展冰凍紅細胞技術，成分血制備部門隨時可將合格血液制備成冰凍紅細胞進行長達10年的冷凍保存，故可將日常工作發現的O型dCCee、dCCEe、dccEE等特殊血型血液制備成冰凍紅細胞并做好標記保存在冷凍庫中，發血部門盡量不要將其隨機發往醫院，而是要有針對性的發放給已產生免疫性Rh抗體的患者。(5)Rh抗原檢測部門在檢測到罕見表型(dCCee，dCCEe，dccEE)的時候可告知血源招募部門更多與獻血者溝通，耐心解釋其特殊血型的重要性，鼓勵成為固定獻血者，在身體允許的條件下定期獻血，并及時凍存，以增加稀有血型的庫存比例。

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李雄英(1982～)，女，碩士研究生，主管技師，研究方向：臨床輸血。

R 457.11

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0253-4304(2016)05-0737-03

10.11675/j.issn.0253-4304.2016.05.43

2016-01-28

2016-04-13)