黑木耳多糖藥理作用研究進(jìn)展

王佰靈　　謝　勇　　趙永恒，3　　金　堯　　戈振凱　　邱婧然　　胡　鑫　　朱海濤

1.湖北醫(yī)藥學(xué)院第二臨床學(xué)院，湖北十堰　442000；2.湖北醫(yī)藥學(xué)院藥學(xué)院，湖北十堰　442000；3.湖北省藥用植物綜合利用工程技術(shù)研究中心，湖北十堰　442000；4.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院藥學(xué)部，湖北十堰　442000

黑木耳多糖藥理作用研究進(jìn)展

王佰靈1謝勇2趙永恒2，3金堯2戈振凱2邱婧然2胡鑫2朱海濤4

1.湖北醫(yī)藥學(xué)院第二臨床學(xué)院，湖北十堰442000；2.湖北醫(yī)藥學(xué)院藥學(xué)院，湖北十堰442000；3.湖北省藥用植物綜合利用工程技術(shù)研究中心，湖北十堰442000；4.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院藥學(xué)部，湖北十堰442000

黑木耳多糖為黑木耳中含量最高、最主要的功能性成分，其藥理作用復(fù)雜、藥效活性強(qiáng)，近年來(lái)藥學(xué)工作者對(duì)黑木耳多糖的研究不斷深入。本文通過(guò)回顧近十年國(guó)內(nèi)外關(guān)于黑木耳多糖的藥理作用研究進(jìn)展的相關(guān)文獻(xiàn)，并對(duì)其進(jìn)行分類(lèi)、整理和歸納，得出黑木耳多糖在降血脂、降血糖、抗氧化及抗衰老、抗腫瘤、抗凝血、抗病毒活性、抑菌活性、增強(qiáng)免疫、止咳化痰作用、肝保護(hù)等方面具廣泛藥理作用，以期可為黑木耳多糖的產(chǎn)品開(kāi)發(fā)及臨床應(yīng)用提供一定的借鑒。

黑木耳多糖；藥理作用；研究進(jìn)展

［Abstract］Polysaccharide is the highest and themost important functional component in Auricularia auricular which pharmacological action is complex and pharmacological activity is strong.In recent years，the research on the polysaccharide of Auricularia auricular has been deeply studied.The literatures at home and abroad for nearly 10 years about the pharmacological action of Polysaccharides from Auricularia auricular were studied，classified and sorted that the actions of polysaccharide are lowering blood fat，lowering blood sugar，antioxidant and anti-aging，anti-tumor，anti coagulation，antiviral activity，antibacterial activity，enhance immunity，relieve a cough the phlegm，liver protection and so on in order to provide certain reference for Auricularia auriculara polysaccharide product development and clinical application.

［Key words］Auricularia auricular polysaccharides；Pharmacological effects；Research progress

黑木耳是我國(guó)最常見(jiàn)的食用菌之一，用于多種食療方中，味甘、性平，具有滋養(yǎng)益胃、安神潤(rùn)燥、清肺止血、強(qiáng)智等功效，被譽(yù)為“素中之葷”、“中餐中的黑色瑰寶”，是我國(guó)傳統(tǒng)的保健佳品［1］。我國(guó)大部分地區(qū)有栽培或野生，資源豐富，于夏、秋季采收。研究表明，黑木耳含有多糖［2］、凝集素［3］、蛋白質(zhì)［4］、黑色素、膠質(zhì)以及銅、鋅、鉬等39種元素［5］，其中黑木耳多糖為其含量最高、最主要的功能性成分，具有降血脂、降血糖、抗氧化及抗衰老、抗腫瘤、抗凝血、抗病毒活性、抑菌活性、增強(qiáng)免疫、止咳化痰作用、肝保護(hù)等作用，本研究對(duì)以上多種藥理作用其進(jìn)行系統(tǒng)的概括，并對(duì)黑木耳多糖的發(fā)展趨勢(shì)進(jìn)行展望。

1　降血脂

姜洪彬等［6］對(duì)自制的人參黑木耳多糖粉降血脂作用研究表明，高劑量組（800 mg/kg）和中劑量組（400 mg/kg）與模型組比較，能顯著降低小鼠血清總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL）濃度，升高高密度脂蛋白膽固醇（HDL）的濃度，具有保護(hù)血管和預(yù)防高脂血癥的發(fā)生的作用。陳剛等［7］黑木耳多糖對(duì)兔胸血管平滑肌細(xì)胞（vascular smooth muscle cell，VSMC）的增生及其一氧化氮（NO）生成能力的影響，結(jié)果表明，黑木耳多糖在較高濃度（20%）長(zhǎng)時(shí)間（48、72 h）的作用下對(duì)VSMC異常增殖具有顯著抑制效果（P＜0.05）；與模型組比較，黑木耳多糖可以顯著提高血清中NO生成量 （P＜0.01），其作用機(jī)制可能與其預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的功能有關(guān)。綜合李志強(qiáng)等［8］及郭素芬等［9］研究，黑木耳多糖發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制為抑制動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中粘著斑激酶（FAK）的表達(dá)，抑制bFGF、PDGF和其他細(xì)胞外基質(zhì)的合成和分泌能力，從而減少VSMC參與的過(guò)程。韓春然等［10］研究表明，黑木耳多糖APEⅠ在一定程度上預(yù)防高脂血癥及動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。周?chē)?guó)華等［11］研究表明，黑木耳多糖組小鼠的TG、TC和LDL濃度均不同程度低于高脂模型組，而HDL濃度卻極其顯著高于高脂模型組，提示黑木耳多糖確具顯著的降血脂作用。

2　降血糖

尹紅力等［12］探討黑木耳多糖體內(nèi)和體外降血糖功能，體外降血糖效果表明，黑木耳多糖抑制α-葡萄糖苷酶活性的強(qiáng)弱順序?yàn)椋汉谀径嵝远嗵牵竞谀径行远嗵牵竞谀径鷫A性多糖。黑木耳酸性多糖不同醇沉部位中，80%醇沉部位抑制α-葡萄糖苷酶活性最強(qiáng)。體內(nèi)降血糖效果表明，80%醇沉部位可使糖尿病小鼠體重的負(fù)增長(zhǎng)減緩、使己糖激酶、琥珀酸脫氫酶活性的降低得到緩解，其機(jī)制為通過(guò)抑制葡萄糖糖轉(zhuǎn)運(yùn)及促進(jìn)其攝取和利用達(dá)到降糖作用。宗燦華等［13］研究表明，黑木耳多糖可能通過(guò)改善受損的胰島β細(xì)胞其功能，使胰島素分泌增加，達(dá)到顯著降低糖尿病小鼠血糖的作用。

3　抗氧化及抗衰老

孫湛等［14］研究表明，黑木耳多糖顯著提高氧化損傷心肌細(xì)胞的存活率，與過(guò)氧化氫（H2O2）損傷組比較，低、中、高各干預(yù)組心肌細(xì)胞乳酸脫氫酶、丙二醛（MDA）量顯著降低，細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶（SOD）活性顯著提高；且抗氧化損傷作用呈劑量依賴(lài)關(guān)系，推測(cè)其減輕心肌細(xì)胞毒性可能與自由基的清除、過(guò)氧化損傷減輕有關(guān)。張寧［15］對(duì)黑木耳多糖體外抗氧化研表明，酸溶性黑木耳分級(jí)多糖具有較強(qiáng)的清除2，2-聯(lián)氮基-雙-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二氨鹽（ABTS）、1，l一二苯基苦基苯腆（DPPH）的能力高于陽(yáng)性對(duì)照維生素C組；中性黑木耳分級(jí)多糖抗脂質(zhì)過(guò)氧化抑制力最高；堿溶性黑木耳分級(jí)多糖具有較強(qiáng)的清除O-2·和·OH能力。小鼠體內(nèi)抗氧化研究表明，各劑量組多糖均使小鼠血清和肝組織中SOD、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、谷胱甘肽酶、過(guò)氧化氫酶活性提高，MDA含量降低，且呈劑量依賴(lài)性。魏紅［16］研究表明，黑木耳粗多糖和羧甲基化多糖各組分均可清除·OH、DPPH·、ABTS+，且羧甲基化修飾后多糖的抗氧化活性皆優(yōu)于修飾前多糖，純化后羧甲基化多糖的抗氧化活性優(yōu)于純化前。王雪［17］研究表明，黑木耳多糖AAPⅠ-a（純度91.12%）可增高小鼠胸腺指數(shù)及脾指數(shù)，使超氧化物歧化酶及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活力顯著增高，MDA含量降低，預(yù)示其具有明顯的抗衰老功效。

4　抗腫瘤

Reza等［18］研究表明木耳70%乙醇提取物的二氯甲烷部分比乙酸乙酯、正丁醇及水部分對(duì)支氣管肺泡癌和胃癌細(xì)胞具有抑制作用，采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)測(cè)定表明二氯甲烷部分的細(xì)胞毒性的機(jī)制可能是下調(diào)Bcl-2表達(dá)和p53過(guò)度表達(dá)有關(guān)。蔡潤(rùn)等［19］等將大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、低劑量多糖組（100mg/kg）、高劑量多糖組（500mg/kg），于接種后30 d處死各組大鼠，收集腫瘤標(biāo)本并測(cè)定腫瘤大?。徊捎脽晒舛縋CR及免疫組化檢測(cè)腫瘤組織增殖細(xì)胞核抗原（pro-liferating cell nuclear antigen，PCNA）的表達(dá)，結(jié)果表明，黑木耳多糖對(duì)大鼠顱內(nèi)膠質(zhì)瘤的生長(zhǎng)具顯著抑制作用，對(duì)PCNA的表達(dá)也具有一定抑制作用，且高劑量多糖的抑制效果更為顯著。Reza等［20］研究得出蘑菇、黑木耳、靈芝等具有體外抗腫瘤活性，有可能成為抗腫瘤的潛在藥物。宗燦華等［21］研究表明，黑木耳多糖對(duì)H22肝癌小鼠抑瘤率可達(dá)45.21%，主要通過(guò)提高脾指數(shù)和胸腺指數(shù)及血清NO含量達(dá)到抑瘤作用。

5　抗凝血

李德海等［22］采用水、酸溶液及堿溶液對(duì)黑木耳多糖進(jìn)行提取制備，并以活化部分凝血酶時(shí)間（APTT）、凝血酶原時(shí)間（PT）、凝血酶時(shí)間（TT）3個(gè)體外抗凝血指標(biāo)為衡量依據(jù)，分別對(duì)其抗凝血功能進(jìn)行了研究?？鼓囼?yàn)表明，水溶性、酸溶性和堿溶性3種黑木耳多糖均能顯著延長(zhǎng)家免血漿的APTT（P＜0.01），作用強(qiáng)弱為堿溶性＞水溶性＞酸溶性，且APTT的值與多糖濃度呈正相關(guān)，且除蛋白后效果均高于除蛋白前，而對(duì)PT和TT無(wú)明顯影響（P＞0.01）。王辰龍等［23］將超聲波協(xié)同復(fù)合酶法提取的粗多糖提取液，經(jīng)脫蛋白、脫色、DEAE-纖維素柱層析進(jìn)行純化處理后（純度達(dá)83.23%），研究其體外抗凝活性，結(jié)果表明，濃度為10%、35℃、pH值7.4條件下，凝血酶原時(shí)間可達(dá)41.8 s。

6　抗病毒活性

Nguyen等［24］研究表明，硫酸化和未修飾的黑木耳總多糖均具有體外抗病毒活性，但硫酸化的抗病毒活性更強(qiáng)，提示黑木耳多糖硫酸化修飾可提高抗病毒活性。分級(jí)多糖AAP（1）、AAP（2）的硫酸化物均具有較強(qiáng)抗病毒活性，可作為新型抗病毒藥物的成分。

7　抑菌活性

蔡銘等［25］利用牛津杯法測(cè)定了黑木耳粗多糖的抑菌活性，研究發(fā)現(xiàn)，黑木耳粗多糖對(duì)大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌有抑制作用，且對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用大于大腸埃希菌，而對(duì)藤黃微球菌、枯草芽孢桿菌和酵母、黑曲霉等均無(wú)明顯抑菌效果。趙夢(mèng)瑤等［26］以抑菌圈為指標(biāo)，研究原料粒度與提取工藝對(duì)黑木耳多糖抑菌效果的影響。結(jié)果表明，水提時(shí)，粒度為150目提取的多糖對(duì)大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌的抑菌效果最好；超聲處理時(shí)，多糖的抑菌效果隨著粒度減少逐漸下降；且超聲處理時(shí)多糖的抑菌效果不如水提。

8　增強(qiáng)免疫

許海林等［27］研究表明，黑木耳多糖調(diào)節(jié)免疫的機(jī)制為活化小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的功能，增加吞噬能力。Nguyen等［28］以水提醇沉法純化黑木耳多糖，去除蛋白，并采用柱色譜法分離得到多糖sAAPt，并對(duì)其活性進(jìn)行測(cè)試，表明其具有較強(qiáng)的免疫增強(qiáng)作用，有希望開(kāi)發(fā)成新型的免疫增強(qiáng)劑。Zuo等［29］采用水提醇沉法黑木耳粗多糖，DEAE纖維柱純化多糖，活性研究表明，黑木耳多糖通過(guò)調(diào)節(jié)腫瘤壞死因子（TNF-α）和干擾素（IFN-γ）增強(qiáng)機(jī)體免疫調(diào)節(jié)作用。

9　止咳化痰作用

劉軍等［30］探討黑木耳多糖（AAP）在氨水致咳小鼠中的止咳化痰作用，結(jié)果表明，與空白對(duì)照組比較，AAP中劑量組（100mg/kg）和高劑量組（200 mg/kg）小鼠的咳嗽次數(shù)均減少，咳嗽潛伏期延長(zhǎng)。AAP低（50mg/kg）、中、高劑量組小鼠的潛伏期、咳嗽次數(shù)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AAP高劑量組小鼠的酚紅排泌量明顯高于空白對(duì)照組，表明黑木耳多糖有止咳化痰的功效。

10　肝保護(hù)作用

孫湛等［31］探討黑木耳多糖對(duì)梗阻性黃疸大鼠模型肝臟功能的保護(hù)作用，結(jié)果表明，應(yīng)用黑木耳多糖干預(yù)后，大鼠的一般狀態(tài)好于模型組，血清中膽紅素、肝功能指標(biāo)［丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）］、內(nèi)毒素（ET）、TNF-α、白介素-6（IL-6）水平均顯著低于模型組（P＜0.05）；肝、腸組織病理改變減輕，其對(duì)梗阻性黃疸大鼠肝臟有保護(hù)作用的機(jī)制為通過(guò)抑制炎性介質(zhì)釋放、保護(hù)腸黏膜屏障。

11　對(duì)小鼠小腸推進(jìn)及胃排空的影響

張文婷等［32］分別以正常、新斯的明負(fù)荷、腎上腺素負(fù)荷小鼠為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停捎眯∧c炭末推進(jìn)法和胃排空實(shí)驗(yàn)法觀察AAP對(duì)小鼠小腸推進(jìn)和胃排空功能的影響。結(jié)果表明，高、中劑量APP可極顯著促進(jìn)小腸推進(jìn)（P＜0.01）及顯著促進(jìn)胃排空（P＜0.05），且高劑量AAP可極顯著拮抗新斯的明所致小腸功能亢進(jìn)（P＜0.01）和顯著拮抗胃排空亢進(jìn)（P＜0.05）。

12　對(duì)大鼠性功能的影響

張潔等［33］研究表明，黑木耳多糖高劑量組和木耳組血清中的卵泡刺激素、NO含量明顯低于對(duì)照組，且高劑量組血清中的睪酮明顯低于對(duì)照組，木耳組陰莖組織中的NO明顯低于對(duì)照組。高劑量組和木耳組附睪精子密度、良好精子的比例明顯下降。黑木耳多糖影響青春期大鼠生殖器官的發(fā)育，使大鼠的睪丸功能和精子質(zhì)量降低。

13　小結(jié)與展望

黑木耳多糖具有降血脂、降血糖、抗腫瘤、抗氧化及抗衰老、抗凝血、增強(qiáng)免疫、抗菌、抗病毒、肝保護(hù)、止咳化痰等方面的作用，已引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。其提取方法由傳統(tǒng)的水提法、酸提法逐漸向超聲波輔助提取法［34］、微波輔助萃?。?5］、強(qiáng)電場(chǎng)技術(shù)萃取法［36］、酶解提取法［37］、超微粉碎技術(shù)［38］等新技術(shù)方面發(fā)展，相關(guān)產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)主要集中在黑木耳發(fā)酵飲料［39］、黑木耳多糖沖劑［40］等功能性食品、保健品方面，臨床應(yīng)用的有效性和安全性研究暫未見(jiàn)報(bào)道；由于黑木耳多糖為多糖混合物，不同性質(zhì)的多糖，其藥理作用及作用機(jī)制如何，有待進(jìn)一步研究；多糖分子量大，水溶性較差，對(duì)其改性如羧甲基化、硫酸酯化［41］、酰基化［42］的研究，亦是研究的熱點(diǎn)之一。

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Research progress on pharmacological action of Polysaccharide from Auricularia auricular

WANG Bailing1XIE Yong2ZHAO Yongheng2，3JIN Yao2GE Zhenkai2QIU Jingran2HU Xin2ZHU Haitao4
1.Second Clinical College，Hubei University of Medicine，Hubei Province，Shiyan442000，China；2.School of Pharmacy，Hubei University of Medicine，Hubei Province，Shiyan442000，China；3.Hubei Provincial Technology and Research Center for Comprehensive Development of Medicinal Herbs，Hubei University of Medicine，Hubei Province，Shiyan442000，China；4.Department of Pharmacy，Taihe Hospital Affiliated to Hubei University of Medicine，Hubei Province，Shiyan442000，China

R96

A

1673-7210（2016）09（b）-0029-04

2016-05-20本文編輯：趙魯楓）

湖北省藥用植物綜合利用工程技術(shù)研究中心立項(xiàng)項(xiàng)目（GC2015205）。

王佰靈（1987.12-），女，碩士，從事中藥制劑分析研究。

趙永恒（1987.6-），男，碩士，從事藥物新劑型與新技術(shù)的研究。