邊毅 張?zhí)煺?仲維娜

?

當(dāng)歸芍藥散對激素治療的阿霉素腎病幼鼠骨保護(hù)素的干預(yù)作用

邊毅 張?zhí)煺?仲維娜

【摘要】目的 探討當(dāng)歸芍藥散對激素治療的阿霉素腎病幼鼠骨保護(hù)素的干預(yù)作用。方法 將48只幼鼠分為4組，實(shí)驗(yàn)2周，測定幼鼠尿蛋白定量及血清骨保護(hù)素水平。結(jié)果 實(shí)驗(yàn)過程中對照組尿蛋白逐漸增高，治療組及西藥組尿蛋白逐漸下降；二者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；模型組及西藥組骨保護(hù)素進(jìn)行性降低，二者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而聯(lián)合組骨保護(hù)素緩慢升高。結(jié)論 當(dāng)歸芍藥散聯(lián)合甲潑尼龍片對阿霉素腎病幼鼠尿蛋白有降低作用，可能有升高阿霉素腎病幼鼠骨保護(hù)素的作用。

【關(guān)鍵詞】腎病綜合征；阿霉素；幼鼠骨保護(hù)素

長期大劑量應(yīng)用糖皮質(zhì)激素治療腎病綜合征會導(dǎo)致骨質(zhì)疏松[1]，有學(xué)者指出[2]，腎病綜合征可導(dǎo)致鈣、維生素D等內(nèi)分泌功能異常，使骨代謝紊亂。糖皮質(zhì)激素可進(jìn)一步抑制成骨細(xì)胞的生成和活性，加重骨質(zhì)疏松。我院以當(dāng)歸芍藥散加減聯(lián)合糖皮質(zhì)激素治療兒童腎病綜合征，發(fā)現(xiàn)其對患兒骨質(zhì)疏松具有一定的改善作用，具體報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

健康三周齡雄性SD幼鼠共48只，平均體重（130±20）g，隨機(jī)分為空白組、模型組、西藥組及聯(lián)合組，各12只，所有幼鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d后開始實(shí)驗(yàn)。

1.2 動物造膜

除空白組外，所有幼鼠均采用10%水合氯醛0.3 ml/kg腹腔注射麻醉，至幼鼠角膜反射消失。麻醉成功后固定幼鼠，以6.5 mg/ kg體重給予阿霉素尾靜脈注射，注射液體總量不超過1 ml/100 g體重[3]。

1.3 給藥方法

給藥方法：根據(jù)動物藥物劑量換算公式“幼鼠劑量（g/kg）=兒童劑量（g/kg）×折算系數(shù)（6）”，自阿霉素注射后第10 d起記為造模成功，西藥組以甲潑尼龍片蒸餾水溶液1ml+蒸餾水2ml灌胃，聯(lián)合組以甲潑尼龍片蒸餾水溶液1 ml＋當(dāng)歸芍藥散煎劑2 ml灌胃，模型組以蒸餾水3 ml灌胃，灌胃持續(xù)4周。

1.4 取材與檢測

各組幼鼠以造模成功當(dāng)日為第0周，每周組分別于第2周、第4周各取6只，收集24 h尿，考馬斯亮藍(lán)法檢測24 h尿蛋白定量，腹主動脈取血，以酶聯(lián)免疫吸附法測定血清骨保護(hù)素濃度，具體步驟嚴(yán)格遵循ELISA試劑盒說明書。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所得數(shù)據(jù)使用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理分析，計(jì)數(shù)資料用n，%表示，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，采用t檢驗(yàn)，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1 尿蛋白定量結(jié)果

空白組尿蛋白定量均在正常范圍內(nèi)；其余各組在造模結(jié)束時，24 h尿蛋白定量平均達(dá)3 g左右。實(shí)驗(yàn)過程中，模型組尿蛋白定量進(jìn)行性增加；第2周時，聯(lián)合組尿蛋白定量（189.2±10.5）mg，西藥組（184.5±8.8）mg，P=0.051＞0.05；第4周時，聯(lián)合組尿蛋白定量（140.2±5.5）mg，西藥組（162.9±4.9）mg，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P=0.02＜0.05。

2.2 骨保護(hù)素（OPG）結(jié)果

除空白組外，其余各組在造模結(jié)束時，骨保護(hù)素差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；實(shí)驗(yàn)過程中，模型組及西藥組骨保護(hù)素進(jìn)行性降低，各時間點(diǎn)比較（38.1±1.2）% vs（30.3±2.9）% vs（22.3±1.3）%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），說明甲潑尼龍對骨保護(hù)素可進(jìn)一步降低；而聯(lián)合組骨保護(hù)素緩慢升高。

3　討論

骨密度是評價(jià)骨質(zhì)疏松的金標(biāo)準(zhǔn)，但其對兒童腎病綜合征患者早期診斷的意義并不大[4]。骨保護(hù)素是一種腫瘤壞死因子受體，具有降低破骨細(xì)胞分化和增加骨密度的功能，有學(xué)者指出[5]，患兒骨保護(hù)素改變受疾病本身及糖皮質(zhì)激素的雙重影響。關(guān)于激素引起的骨質(zhì)疏松的治療，學(xué)者多給予活血[6]、補(bǔ)氣[7]、補(bǔ)脾腎[8]等方案治療，當(dāng)歸芍藥散中當(dāng)歸補(bǔ)益脾腎，川芎活血止痛，芍藥瀉肝木，與川芎、當(dāng)歸養(yǎng)血活血；佐以茯苓、澤瀉、白術(shù)健脾利濕，傾瀉腎熱。全方活血利水，補(bǔ)腎健脾，利水而不傷陰液，活血亦不傷正氣，共奏補(bǔ)腎健脾，利水滲濕之功。本次研究結(jié)果顯示，當(dāng)歸芍藥散聯(lián)合甲潑尼龍片能降低阿霉素腎病幼鼠尿蛋白，四周左右效果優(yōu)于單純應(yīng)用甲潑尼龍片；同時，聯(lián)合用藥可提高阿霉素腎病幼鼠骨保護(hù)素，說明當(dāng)歸芍藥散可能通過調(diào)節(jié)幼鼠骨保護(hù)素水平來緩解其骨質(zhì)疏松。

參考文獻(xiàn)

[1]Briot K, Roux C.Corticosteroid-induced osteoporosis[J].Rev Med Interne，2013（3）：315-323.

[2]林秀芹，鄭京，劉加林，等.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對阿霉素腎病大鼠骨代謝的影響[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，2014，34（9）：1215.

[3]支勇，曹式麗.阿霉素腎病動物模型的國外研究進(jìn)展[J].中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2008，10（9）：933-935.

[4]Cao Y, Liu X, Xu H, et al.Utility of serum tartrate-resistant acid phosphatase isoform 5b,bone alkaline phosphatase and osteocalcin in osteoporotic franturesin Chinese patients[J].Clin Lab，2012，58（7-8）：45-50.

[5]李玉柳，王華.腎病綜合征患兒血清骨保護(hù)素改變及糖皮質(zhì)激素對其的影響[J].中國當(dāng)代兒科雜志，2014，14（9）：653-654.

[6]鄒麗宜，吳鐵，崔燎，等.丹參抑制潑尼松大鼠骨質(zhì)丟失[J].中成藥，2006，28（4）：5374.

[7]葉黎青，魯科達(dá)，馬紅珍.李學(xué)銘加味四君子湯治療腎病經(jīng)驗(yàn)[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2011，8（29）：1727-1728.

[8]孟曉東.補(bǔ)腎健脾養(yǎng)胃法治療骨質(zhì)疏松癥的臨床觀察[J].吉林中醫(yī)藥，2004，24（11）：294.

The Intervention Effect of Danggui Shaoyaosan in Hormone Therapy of Adriamycin Nephropathy Rats Osteoprotegerin

BIAN Yi ZHANG Tianzhao ZHONG Weina, Heilongjiang Provincial The Traditional Chinese Medicine Hospital, Harbin 150036, China

[Abstract]Objective To investigate the intervention effect of Dangguishaoyaosan hormone on adriamycin induced nephropathy rats bone protective hormone therapy.Methods 48 rats were divided into four groups, 2 weeks of the experiment, rats in the determination of urinary protein and serum level of osteoprotegerin.Results The control group, the urine protein increased gradually, gradually decreased in treatment group and Western medicine group, urinary protein, difference between the two groups had no statistically significance (P＞0.05), during the experiment, model group and Western medicine group and bone protection were decreased, difference have statistical significance (P＜0.05), and the joint group of bone protection pigment increased slowly.Conclusion The danggui shaoyao powder combined with methylprednisolone tablets of in rats with adriamycin nephropathy urine protein decreased, which could may be increased in rats with adriamycin nephropathy osteoprotegerin.

[Key words]Nephrotic syndrome, Adriamycin, Rat osteoprotegerin

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2016.06.138

【文章編號】1674-9308（2016）06-0184-02

【中圖分類號】R28

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

作者單位： 150036哈爾濱，黑龍江省中醫(yī)醫(yī)院