CD2AP基因多態性與晚發性阿爾茨海默病相關性研究

楊 平丁艷萍

CD2AP基因多態性與晚發性阿爾茨海默病相關性研究

楊 平1丁艷萍2

目的分析寧夏漢族人群CD2AP的rs9296559位點多態性與晚發性阿爾茨海默病（LOAD）是否存在關聯。方法采用病例-對照研究，提取研究對象的外周血DNA，用ARRAY iPLEX行CD2AP基因的rs9296559位點單核苷酸多態性（SNP）的表達分布情況。結果LOAD組和對照組的C等位基因頻率分布比較差異有統計學意義（P＜0．001，OR＝1．52，95%CI：1．18～1．97）。結論CD2AP基因與寧夏漢族人群 LOAD有相關性，其rs9296559 SNP位點C等位基因為危險等位基因。

阿爾茨海默病；CD2AP基因；單核苷酸多態性

阿爾茨海默病是癡呆最常見的類型，晚發型AD（LOAD）占AD總數的95%以上，其病因并不十分清楚，被認為是環境和基因因素共同作用所導致的復雜性疾病，其最主要的易感基因是載脂蛋白E（ApoE）。近年來國外學者大樣本量的高加索人群中對LOAD的全基因組關聯研究（GWAS）發現了多個與AD發病相關的候選基因研究，如CD2AP基因［1］。本研究通過對LOAD的患者CD2AP基因的rs9296559的多態位點進行基因檢測，探討給該位點多態性與LOAD的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2012年1月～2016月10月在寧夏醫科大學附屬總醫院神經內科門診LOAD組患者389例，男178例，女211例，平均年齡（67.60±9.93）歲，正常對照組來自于上述就診患者的配偶以及社區LOAD流行病學調查的正常人群共379例。男226例，女153例，平均年齡（68.50±9.06）歲。兩組的一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 納入與排除標準

（1）納入標準：LOAD組入選患者均符合美國國立神經病語言障礙卒中研究所和AD相關疾病協會（NINCDS-ADRDA）臨床診斷標準確定為“可能AD”的標準；（2）對照組納入及排除標準：納入標準：日常生活能力良好、MMSE≥28分，性別和年齡與患者組完全匹配。排除標準：腦血管病、代謝性疾病，額顳葉及路易體癡呆等。

1.3 方法

所有研究對象均行葉酸、維生素B12及梅毒血清等檢查，所有患者行頭顱CT或MRI平掃。提取清晨取空腹靜脈血2 ml，血樣加EDTA抗凝劑后保存于-80 ℃冰箱中。PCR基因擴增和分析CD2AP基因表達檢測和rs9296559位點基因多態性分析方法。采用ARRAY iPLEX行CD2AP基因的rs9296559位點SNP的表達分布情況。

1.4 統計學處理

使用SPSS 17.0統計軟件進行分析，基因頻率采用基因計數法，組間基因頻率的比較采用χ2檢驗，當P＜0.05認為差異有統計學意義。

2 結果

LOAD組的等位基因C頻率為0.166，高于對照組的0.116（P＜0.001，OR＝1.52，95%CI：1.18 ～ 1.97）。LOAD組的等位基因T頻率為0.833，對照組的等位基因T頻率為0.882，兩組比較差異無統計學意義（P＞0.05）。

3 討論

CD2AP基因是近年來國外學者對LOAD的GWAS發現與AD發病相關的候選基因，由于不同人口的遺傳背景及遺傳異質性的差異［2］。我們當前研究發現rs9296559的CD2AP與中國漢族人口有相關性。Naj等［3］通過一個三階段設計的AD GWAS首次研究發現CD2AP與AD發病有顯著相關性，隨后2階段的進一步驗證中，這些結果得到了證實，其中CD2AP上游rs9349407和LOAD 存在顯著的相關性（P＝8.6×10-9）。Holingworth等［4］通過meta分析的方法驗證結果存在可靠性。本文研究（由于rs9349407和rs9296559完全連鎖）結果顯示rs9296559顯著的差異，提示CD2AP是AD的易感基因，并且C等位基因增加了LOAD的患病風險。CD2AP編碼的Cd2ap是一種銜接蛋白，主要功能對細胞骨架的調節作用及參與信號轉導通路［5］。文獻報道CD2AP細胞突觸功能障礙及細胞膜的處理過程有關［6］。2012年一項CD2AP在AD患者腦中轉錄情況的研究推測CD2AP與神經元突觸功能有關而參與AD發病［7］，在腦中CD2AP主要表達在毛細血管，然而它在中樞神經系統及AD中的作用還不清楚［8］。

總之，研究結果顯示CD2AP的rs9296559的多態位點與中國漢族人口相關性，結果需要在大樣本及不同的人口中驗證，潛在的蛋白功能需要近一步的探索。

［1］ Lee JH，Cheng R，Barral S，et al． Genome Wide Association Study in Late-onset Alzheimer'S Disease Among Caribbean Hispanics Supports Clu，Picalm，Bin1，And Cugbp2 And Identifies Novel Loci［J］． Alzheimers & Dementia，2010，6（4）：e13．

［2］ 孟大川，余自華，王道靜，等． 中國漢族兒童散發性激素耐藥型腎病綜合征CD2AP基因突變分析［J］． 臨床兒科雜志，2012，30（7）：641-645．

［3］ Naj AC，Jun G，Beecham GW，et al． Common variants at MS4A4/MS4A6E，CD2AP，CD33 and EPHA1 are associated with late-onset Alzheimer's disease［J］． Nature Genetics，2011，43（5）：436-441．

［4］ Hollingworth P，Harold D，Sims R，et al． Common variants at ABCA7，MS4A6A/MS4A4E，EPHA1，CD33 and CD2AP are associated with Alzheimer's disease［J］． Nature Genetics，2011，43（5）：429-435．

［5］ 毛建華，杜立中．CD2AP與腎小球足細胞裂孔隔膜功能損傷的分子機制［J］． 國外醫學：兒科學分冊，2005，32（1）：15-17．

［6］ Morgan K． The three new pathways leading to Alzheimer's disease［J］． Neuropathology and Applied Neurobiology，2011，37（4）：353-357．

［7］ Karch CM，Jeng AT，Nowotny P，et al． Expression of Novel Alzheimer’s Disease Risk Genes in Control and Alzheimer’s Disease Brains［J］． Plos One，2012，7（11）：e50976．

［8］ Schellenberg GD，Montine TJ． The genetics and neuropathology of Alzheimer's disease［J］． Acta Neuropathologica，2012，124（3）：305-323．

Association BetweenCD2APGene Polymorphism and Late-onset Alzheimer's Disease

YANG Ping1DING Yanping21 Department of Neurology，General Hospital of Ningxia Medical University，Yinchuan Ningxia 750004，China，2 Department of Gynaecology and Obstetrics，Ningxia Children's Hospital，Yinchuan Ningxia 750004，China

ObjectiveTo analyze the association betweenCD2APand rs9296559 polymorphisms of LOAD in Ningxia Han population．MethodsFor the casecontrol studies，all subjects’peripheral blood DNA was extracted，distribution of single nucleotide polymorphisms （SNP） in the rs9296559 locus ofCD2APgene by ARRAY iPLEX．ResultsThe frequency distribution of C allele in the LOAD group and the control group was statistically significant（P＜0．001，OR＝1．52，95%CI：1．18～1．97）．ConclusionCD2APgene is associated with LOAD in Ningxia Han population，the C allele of rs9296559 locus of SNP is a risk allele．

Alzheimer's disease，CD2APgene，Single nucleotide polymorphism

R749．1

A

1674-9316（2016）36-0029-03

10．3969/j．issn．1674-9316．2016．36．015

寧夏醫科大學校級重點課題（XZ2015022）

1 寧夏醫科大學總醫院神經內科，寧夏 銀川 750004；2 寧夏兒童醫院婦產科，寧夏 銀川 750004