山豆根中總黃酮的含量測定

鄒玉龍　張　穎　徐　丹　李海燕

牡丹江醫學院紅旗醫院，黑龍江　牡丹江　157011

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山豆根中總黃酮的含量測定

鄒玉龍張穎徐丹李海燕*

牡丹江醫學院紅旗醫院，黑龍江牡丹江157011

【摘要】目的:測定山豆根中總黃酮的含量。方法: 采用超聲波提取法提取山豆根中的總黃酮，并以A1( NO3)3、NaNO2、及NaOH為顯色劑，蘆丁為對照品，分光光度法測定其含量。結果：山豆根中總黃酮含量為5.7mg/g 。結論：該方法可用于測定山豆根中的總黃酮。

【關鍵詞】山豆根；總黃酮；超聲波提取

山豆根為豆科植物越南槐(VietnamesesophoraRoot)的干燥根及根莖。山豆根味極苦，微有豆腥氣，具有清熱解毒，消腫止痛的功效，常用于咽喉牙齦腫痛、肺熱咳嗽煩渴、熱解便秘等癥。山豆根含有黃酮類、有機酸、植物色素、脂肪、水分及灰分等成分[1]，而黃酮類化合物具有心血管系統維護、抗菌及抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、抗炎、鎮痛、保肝等多種生物活性[2-4]。實驗采用超聲波提取法提取山豆根中的總黃酮，以蘆丁為對照品，采用紫外可見分光光度法測定其總黃酮的含量。

1儀器與材料

1.1儀器RE-52A旋轉蒸發儀(上海亞榮生化儀器廠)；AS3120B超聲波清洗儀(北京卓川電子科技有限公司)；722-型分光光度計(上海光譜儀器有限公司)；BSA223S分析天平(上海賽多利斯儀器系統有限公司)。

1. 2材料乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉均為分析純；蘆丁標準品(中國藥品生物制品檢定所)；山豆根為市售。

2方法與結果

2. 1樣品溶液的制備山豆根干燥后打粉過40目篩，精確稱取5.0000g于錐形瓶中，加入80ml 60%乙醇溶液，超聲提取60min，過濾，旋轉蒸發濃縮，定容至250ml。

2.2標準溶液的配制精確稱取蘆丁標準品10mg，用60%的乙醇溶液定容至100ml容量瓶中，冷藏放置于冰箱。

2.3測定波長的選擇取標準溶液1ml ，置于25ml容量瓶中，加入0. 6ml5% NaNO2，搖勻，放置6 min后加入 1 ml 10 % A1(NO3)3，放置6 min，再加入10ml 4% NaOH溶液，混勻，用60%乙醇稀釋至刻度。同時作空白對照，15min后測定波長420～700nm區段的吸光度，得知最大吸收在510 nm，因此選定波長為510 nm 。

2.4標準曲線的建立分別取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml標準溶液于25ml容量瓶中，各加入0.6ml 5% NaNO2，搖勻，放置6min后加入1ml 10% A1(NO3)3，放置6min，再加入10ml 4 % NaOH溶液，混勻，用60%乙醇稀釋至刻度，靜置15min，以試劑空白為參比于510nm處測其吸光度，以吸光度A縱坐標，蘆丁的濃度c為橫坐標，得到回歸方程:A=11.83c+0.0169(r=0.9994)，表明樣品在4～20μg范圍內線性關系良好。

2.5精密度考察精密移取標準溶液5份1ml，按“2.4”測定其吸光度，RSD為0.82 %(n=5)，說明精密度良好。

2. 6重現性考察精密移取樣品溶液5份1ml，按“2.4”測定其吸光度，RSD為1.19%(n=5)，說明重現性良好。

2.7回收率實驗移取已知總黃酮含量的樣品溶液1ml，加入標準溶液，按“2.4”測定吸光度，計算加樣回收率。結果平均回收率為101.26%，RSD為2.71%(n=5)。

2.8總黃酮含量測定準確吸取樣品溶液1ml，共5份，測定樣品溶液中總黃酮的濃度為0.114 mg/ml，RSD為 0.15%(n=5)，并通過計算得出山豆根中總黃酮含量為5.7mg/g 。

3討論

天然產物有效成分含量較低，難于富集，分離難度大，不同的提取方法對不同藥物有效成分的提取率存在差異。黃酮的主要提取方法有：溶劑法(水提法、堿性稀醇和堿性水提、有機溶劑提取法)、超聲波提取法 、微波提取法、酶解法、超臨界流體萃取法、雙水相萃取分離法。實驗采用超聲波法提取總黃酮，利用分光光度計測定了總黃酮的含量，該工藝簡單無污染、成本較低，是一條理想的提取黃酮的途徑。

參考文獻

[1] 王君明，崔瑛.山豆根化學成分、藥理作用及毒性研究進展[J].中國實驗方劑學雜志，2011，17(4)：229-232.

[2] 嚴振宇，張秋菊.黃酮類化合物提取分離方法簡介[J].微量元素與健康研究，2012，29(3)：55-57.

[3] 沈廣志，郭強，何志鵬.分光光度法測定大棗中總黃酮含量[J].微量元素與健康研究，2011，28(4)：26-27.

[4] 李春華. 山豆根的研究進展[J].中國民族民間醫藥，2012(19)：26.

The determination of Total flavonoids content of Sophora tonkinensis

ZOU YulongZHANG YingXU DanLI Haiyan

Hongqi Hospital of Mudanjiang medical University ，Mudanjiang 157011，China

Abstract:Objective determination of content of total flavonoids in sophorae tonkinensis.Methods Using ultrasonic extraction method to extract total flavonoids in sophorae tonkinensis， Spectrophotometry was used to determine the content of total flavonoids，A1(NO3)3，NaNO2， and NaOH as chromogenic agent and Rutin as constrast sample. Results the determination of flavonoids content in sophorae tonkinensis is 5.7 mg/g. Conclusion this method can be used to determine of total flavonoids in sophorae tonkinensis

Key words:Sophora tonkinensis ;total flavonoids; ultrasonic extraction

作者簡介：鄒玉龍(1989-)，男，藥師，碩士，主要從事藥學研究。通信作者：李海燕(1986-)，女，藥師，碩士，主要從事藥學研究。

【中圖分類號】R284.1

【文獻標志碼】A

【文章編號】1007-8517(2016)09-0013-01

(收稿日期：2016.03.16)