廣西一起非典型腸致病性大腸桿菌引起小學生食物中毒調查分析

楊杏愛　姚 群　榮光雄　周清喜　秦友燕　楊昌詩　楊進新　楊 艷　譚永鋒　樊開軍楊 帆　黃亞銘

1.廣西龍勝各族自治縣疾病預防控制中心，廣西龍勝 541799；2.廣西壯族自治區桂林市疾病預防控制中心，廣西桂林 541001；3.廣西壯族自治區疾病預防控制中心，廣西南寧 530028

廣西一起非典型腸致病性大腸桿菌引起小學生食物中毒調查分析

楊杏愛1姚 群1榮光雄1周清喜2秦友燕2楊昌詩1楊進新1楊 艷1譚永鋒1樊開軍1楊 帆1黃亞銘3▲

1.廣西龍勝各族自治縣疾病預防控制中心，廣西龍勝 541799；2.廣西壯族自治區桂林市疾病預防控制中心，廣西桂林 541001；3.廣西壯族自治區疾病預防控制中心，廣西南寧 530028

目的 分析廣西某鄉鎮小學一起由非典型腸致病性大腸桿菌（aEPEC）引起小學生食物中毒突發公共衛生事件的原因，為今后該類事件的防治和處理提供參考。 方法 及時開展對事件發生的學校進行現場衛生學、流行病學調查和患者治療，同時采集現場食物樣品及患者和學校食堂員工生物樣品進行病源學檢測。結果 該校有26名小學生晚餐后最短2小時后，最長19小時后出現不同程度的腹痛和腹瀉癥狀，采集腹瀉頻率較多的6份小學生及8份食堂員工肛拭子送檢。經熒光PCR檢測其中3份學生及1份食堂員工肛拭子樣品非典型性腸致病性大腸桿菌（aEPEC）核酸陽性。 結論 一起由該校一名食堂員工攜帶aEPEC病菌造成食物污染導致26名小學生感染發病的突發公共衛生事件，經及時處理疫情得到有效控制。

非典型腸致病性大腸桿菌；食物中毒；少數民族；小學生

2016年4月21日上午9時，廣西龍勝各族自治縣龍脊鎮某小學報告一起食物中毒事件，經縣疾病預防控制中心（CDC）現場流行病學調查及實驗室樣品的檢測，結合桂林市疾病預防控制中心實驗室對樣品采用熒光PCR檢測結果，判定為一起非典型腸致病性大腸桿 菌（aEPEC）污染食物引起的食物中毒，中毒原因是由該校食堂工作人員攜帶aEPEC所造成食品污染導致26名小學生食源性疾病爆發事件。

1　資料與方法

1.1一般資料

2016年4月20日晚餐延遲在該校學生食堂就餐的人員，出現腹痛、腹瀉3次/d，糞便性狀改變，伴惡心、嘔吐、頭暈、頭痛、乏力等臨床表現者。

1.2調查方法

流行病學調查：采用現場流行病學調查方法，逐個對調查對象進行個案調查和核實。現場衛生學調查：對學校食堂衛生、飲水情況進行調查，采集腹瀉達6次/d以上部分現癥患者、食堂員工糞便及可疑食物樣品送檢。實驗室檢測：對采集的腹瀉6次/d現癥患者、食堂員工糞便及可疑食物進行了熒光PCR檢測，對4月20～21日學校食堂食品留樣樣品及部分患者的糞便進行了增菌培養。

2　結果

2.1一般資料

龍脊鎮某小學位于龍勝各族自治縣龍脊鎮政府所在地，距縣城12公里，學校占地面積11 030m2，共有六個年級21個班，學生772人，均為寄宿生，教職工82人，學校設有一學生食堂，食堂工作人員10人，學校實行封閉式管理。事件發生經過：2016年4月21日7:30做早操時有學生向老師反映，有部分同學因20日晚飯后出現腹痛、腹瀉、嘔吐，早間不能正常出操，經核實發現共有26名學生有不同程度的腹痛、腹瀉等癥狀，發病學生其中在五年級的三個班，其他班級未發現相似癥狀學生。該校發病的26名學生均送龍脊鎮中心衛生院進行診治，同時縣疾病預防控制中心的專業技術人員進行現場流行病學調查及采樣。

2.2臨床表現及檢查

發病最短潛伏期2h，最長19h；平均潛伏期10h；臨床表現為腹痛100%（26/26）、腹瀉100%（26/26）、惡心69.23%（18/26）、嘔吐23.08%（6/26）、頭暈46.15%（12/26）、頭痛26.92%（7/26）、乏力0.52%（2/26）為主要癥狀。體溫均在36.08～37.1°C之間，血常規結果；WBC＞10.00×109/L，3例，最高值為11.90×109/L。血小板：PLT＞300×109/L，5例，最高值為367×109/L。血紅蛋白：HGB＜110g/L,4例，（92g/L、95g/L、107/L、109g/L）。

2.3患者分布及潛伏史

26例分布在五年級的11-1班（5例）、11-2班（17例）、11-3班（4例）；五年級共3個班共119名學生，罹患率為21.85%（26/119）；首發病例于2016年4月20日晚飯后約19:20左右；發病高峰在21日凌晨3～6點，最后1例發生在4月21日12時。男17例，女9例，男女比例為1.89:1；年齡10～13歲。熒光PCR檢測3份肛試子非典型性腸致病性大腸桿菌（aEPEC）核酸陽性學生，分別女1例，男2例，發病時間分別在4月20日19：20和4月21日凌晨3點及5點，腹痛、腹瀉癥狀明顯，每天腹瀉水樣便6～10次不等。

2.4治療

4月21日上午26例患病學生全部采取門診治療，治療方法以采取抗菌、抑制胃酸和補液等支持療法為主，所用抗生素為慶大霉素和克林霉素注射液，抑制胃酸藥物為西咪替丁及維生素B6和維生素C等靜脈給藥，每天一次分別進行了1～3d的治療。至4月24日全部學生痊愈返校上課。

2.5飲食史

查實學校食堂持有效的《餐飲服務許可證》，從業人員10人，均持有效健康證上崗；學生飲用水為學校食堂供應開水，學生碗筷自帶，統一在學校食堂進行消毒。4月20日學校食堂晚餐菜譜為豆腐瓤和炒包菜，五年級三個班的學生因其他原因延誤就餐時間，剩余的菜不夠分配，學校食堂員工即把20日午餐剩余的炒雞肉加熱后供給五年級三個班的學生食用。據食用學生反映學校食堂晚餐提供的炒雞肉外熱內涼，經調查發現午餐剩余的炒雞肉一直在室溫下存放。所有病例當晚均進食了加熱不透的雞肉。

2.6病原學檢驗

龍勝縣CDC檢驗室根據《2015年食品污染和有害因素風險工作手冊》對8份食品樣：4月19日早餐一份（米粉）、中餐一份（米飯和菜）、晚餐一份（米飯和菜），4月20日早餐一份（米粉）、中餐一份（米飯和菜）、晚餐二份（一份為米飯和豆腐瓤、包菜，一份為未放冰箱的豆腐瓤和雞肉），4月21日早餐（米粉）進行了金黃葡萄糖球菌、沙門氏菌、單核細胞增生李斯特氏菌、蠟樣芽孢桿菌增菌培養結果均未檢出。16份發病學生肛試子依據傷寒和副傷寒診斷標準（WS280-2008）、細菌性和阿米巴性痢疾診斷標準（WS287-2008）、感染性腹瀉診斷標準（WS271-2008）進行增菌培養結果傷寒、副傷寒、痢疾桿菌、致泄大腸埃希菌均陰性。

上送桂林市CDC樣本：對學生20日晚餐剩余炒雞肉合菜1份經熒光PCR檢測非典型性腸致病性大腸桿菌核酸、蠟樣芽孢桿菌核酸、肉毒桿菌核酸，金黃色葡萄球菌核酸、沙門氏菌核酸、志賀氏菌核酸、輪狀病毒核酸、諾如病毒核酸等8項檢測項目結果均陰性。對送檢采集腹瀉達6次以上的學生肛拭子6份，食堂工作人員肛拭子8份，經熒光PCR檢測，3份學生肛試子及1份食堂員工肛拭子非典型性腸致病性大腸桿菌（aEPEC）核酸陽性。

2.7食堂員工aEPEC病菌攜帶者調查

廖某，男，53歲，在該校食堂工作3年，健康體檢證及上崗證齊全，家住龍脊鎮和平街，家庭住房為混凝土磚房，家庭環境整潔衛生，平常吃住在家里，偶爾在學校用餐，4月19～21日曾出現有輕度腹瀉現象。事件發生后該員工同樣到該鎮衛生院門診進行抗菌、抑制胃酸治療4天，直至腹瀉癥狀停止。5月12日縣CDC專業技術人員通知該員工到縣CDC采集肛試子樣品，并由縣CDC工作人員專程將樣品上送至桂林市CDC進行復檢，桂林市CDC依據WS271-2007感染性腹瀉的診斷標準進行非典型性腸致病性大腸桿菌核酸檢測，結果為陰性。該校收到縣CDC的復檢結果后于6月30日恢復該名員工在該校食堂工作。

3　討論

引起人類發病的腸致病性大腸桿菌（Enteropathogenic Escherichia Coli，EPEC）上世紀九十年代通過分子生物學分析后將其分為典型的致病性大腸桿菌（tEPEC）和非典型的致病性大腸桿菌（aEPEC），研究發現人是tEPEC唯一的宿主，而aEPEC人和動物均可以成為宿主，因此，aEPEC被認為是一種新發現的傳染病病原，而且在發展中國家和工業發達國家患病人數比典型的tEPEC更為普遍[1-4]，目前全世界各國均有該病例的報道，特別是在5歲以下的兒童中多見[5-6]。據國內公開文獻報道2011年國內福建省首次從一名8月齡死嬰糞便標本中分離并鑒定出aEPEC[7-8]，隨后對該省aEPEC進行了深入的分子生物學方面的研究[9]，該省腹瀉患者樣品檢測中發現有50.8%（32/63）的患者為aEPEC感染者，并對該省aEPEC菌株緊密黏附素基因（intimin）進行分類鑒定，發現該基因具有其多態性及該省aEPEC菌株基因的主要型別[10]。對國內8個省份當地的腹瀉病例、動物糞便、食品中分離的腸致病性大腸桿菌分離株(EPEC)的多位點序列分型分析中發現，8個省份的EPEC分離株的ST型別呈高度多樣性，與腹瀉患者分離株存在相同ST型的動物糞便和食品分離株的EPEC類型均為aEPEC[11]。2006 ～ 2014年在國內的北京、廣東、四川、河南、山西和黑龍江等6個不同地理位置的省市收集了1418份腹瀉患者糞便樣品，640份健康人糞便樣品，897份動物糞便樣品和446份生肉樣品。對86例腹瀉患者，14名健康帶菌者，19份動物糞便及24份生肉共143份樣品的aEPEC分析發現，這些aEPEC菌株屬于超過71種不同血清型，52種O型和24種H型血清型，并檢測到68個不同的EAE基因型和19個亞型緊密素基因，表明在中國來自不同來源的aEPEC菌株具有高度異質性，動物糞便和生肉是重要的緊密素基因遺傳多樣性相關[12]。

目前國內外的研究提示，健康人群中同樣有aEPEC病菌的攜帶者，并可通過適當的途徑傳播給健康人群[13-16]，該縣發生在龍脊鎮某小學中多名小學生感染aEPEC病菌引起的腹瀉的突發公共衛生事件，與該校食堂一名員工aEPEC病菌攜帶者關系密切。4月21日在校小學生中出現多名腹痛、腹瀉患者之前，該員工4月19日就已經出現有腹瀉癥狀，但仍然從事學校食堂的食品加工工作，如果沒有嚴格的個人消毒防護措施無法避免在食品加工過程被污染的可能。在發現并證實該名員工為該學校首例aEPEC病菌感染者后，及時停止該名員工在學校食堂的食品加工工作，進行了常規的治療，直至患者腹瀉治愈并經桂林市CDC對該患者生物樣品檢測為陰性后方才恢復其工作。由aEPEC病菌引起類似的突發公共衛生事件國內未見有相同的報道，對該地區aEPEC病菌在人群及動物中的分布，以及該病菌的種株血清分析及基因分類有待進行深入的研究。

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Investigation and analysis of food poisoning in primary school pupils by atypical enteropathogenic escherichia coli (aEPEC) in Guangxi

YANG Xing'ai1YAO Qun1RONG Guangxiong1ZHOU Qingxi2QIN Youyan2YANG Changshi1YANG Jinxin1YANG Yan1TAN Yongfeng1FAN Kaijun1YANG Fan1HUANG Yaming3
1.Longsheng Autonomous County Center for Disease Prevention and Control,Longsheng 541799,China;2.Guilin City Center for Disease Prevention and Control,Guilin 541001,China;3. Zhuang Autonomous Region Center for Disease Prevention and Control, Nanning 530028,China

Objective To analyze the reasons of a public health emergencies with food poisoning of students by atypical enteropathogenic escherichia coli (aEPEC) in a township elementary school in Guangxi,and to provide reference for prevention and treatment of such incidents. Methods Site hygiene,epidemiological investigation and treatment of patient were timely investigated in the involved school,while food samples were collected at the scene and the school cafeteria staff and patient samples for laboratory testing of the bacteriological testing. Results There were 26 pupils appearing the emergence of abdominal pain and diarrhea symptoms of varying degrees after dinner minimum of 2 hours,up to 19 hours in the school.Six pupils of diarrhea more frequency and eight staff canteen anal swabs inspection were collected.There were three pupils and one staff canteen anal swab samples atypical enteropathogenic escherichia coli (aEPEC) nucleic acid positive by PCR assay. Conclusion The case is caused by a school canteen by the employees carrying aEPEC bacteria,which causes food contamination led to the infection of 26 pupils of public health emergencies of onset.The timely processing of the epidemic has been effectively controlled.

Atypical enteropathogenic escherichia coli;Food poisoning;Minority;Pupils

R378.22

B

2095-0616（2016）18-133-04

▲

（2016-07-05）