補腎中藥有效成分防治腫瘤的實驗研究進展※

● 陳 靜 劉 宣 李 琦

補腎中藥有效成分防治腫瘤的實驗研究進展※

● 陳 靜 劉 宣 李 琦▲

正氣不足是腫瘤發生的根本，腎虛是正虛之本，因此補腎為扶正抗癌的重要治法。近年來國內外學者針對補腎中藥有效成分防治腫瘤的作用機理開展大量研究，發現補腎中藥有效成分能夠有效阻滯腫瘤細胞周期、抑制增殖、誘導凋亡、抑制侵襲轉移等。本文就補腎中藥有效成分防治腫瘤的實驗研究進展做一綜述。

腫瘤 補腎中藥 實驗研究

中醫認為正氣虧虛是腫瘤發生發展的根本原因。古代醫家有相關論述，如《醫宗必讀·積聚》謂：“積之成者，正氣不足，而后邪氣踞之。”明代《景岳全書》謂：“凡脾腎不足及虛弱失調之人，多有積聚之病”，說明臟腑虛損、先天稟賦不足是腫瘤發生發展的內在因素。清代喻嘉言《醫門法律·陰病論》記載：“一點真陽，先身而生，藏于兩腎之中，而一身之元氣，由之以生，故謂生氣之原。”指出腎為元氣之根、生氣之原、先天之本，腎虛則一身正氣虧虛。明代申斗垣《外科啟玄》曰：“癌發四十歲以上，血虧氣衰，厚味過多所生，十全一、二。”中醫認為人過中年之后，腎氣漸衰，此時全身臟腑經絡氣血功能不足，內虛無力抗邪，腫瘤易生；腫瘤又屬于慢性疾病，消耗人體氣血陰陽，癌病日久腎中元氣精微衰減，所謂“久病及腎”。因此說明正虛是腫瘤發病的根本，而腎虛是正虛之本，腫瘤發生后也會加重腎虛，所以腎虛與腫瘤發生發展密切相關，從腎論治腫瘤具有重要指導意義[1]。本文就近年來補腎中藥有效成分防治腫瘤的實驗研究做一綜述。

1 補腎陽藥

1.1 淫羊藿 又名仙靈脾，功效為補腎壯陽、祛風除濕。現代藥理研究表明，淫羊藿的活性成分主要是黃酮和多糖，其中黃酮類的有效成分淫羊藿苷(icariin，ICA)具有抗腫瘤作用，其能夠抑制腫瘤細胞增殖、誘導凋亡、抑制侵襲轉移能力和血管形成等。

1.1.1 抑制腫瘤細胞增殖、誘導凋亡 腫瘤細胞的生物學特性為無限增殖及分化不良，因此抑制腫瘤細胞增殖，誘導凋亡，對于抗腫瘤治療具有重要的意義。實驗發現ICA對宮頸癌TC-1 細胞有增殖抑制作用，且呈時間和劑量依賴性；同時進行DAPI核染色和PI流式細胞術檢測觀察到典型細胞凋亡的特征，說明ICA能夠抑制腫瘤細胞凋亡[2]。李翠玲等[3]建立小鼠荷H22肝癌移植瘤模型后給予ICA治療，結果發現 ICA可顯著抑制腫瘤生長，促進實體瘤細胞早期凋亡。另有研究證實ICA對雌激素受體(ER)陽性人乳腺癌MCF—7細胞有明顯抑制增殖與誘導凋亡的作用，同時可拮抗雌激素對乳腺癌細胞的增殖作用[4]。Li S等[5]發現ICA可通過ROS/ JNK相關線粒體途徑誘導人肝癌細胞SMMC-7721細胞凋亡。此外還發現ICA通過microRNA-21靶向PTEN、RECK 和Bcl-2基因以調控人卵巢癌細胞的增殖和凋亡[6]。

1.1.2 抑制腫瘤細胞侵襲轉移 侵襲和轉移是腫瘤的惡性行為，腫瘤細胞的黏附、遷移和侵襲能力是發生浸潤、轉移的關鍵，這是一個多因素和多基因作用的過程。Wang Y 等[7]發現ICA通過下調Rac1蛋白和血管擴張磷蛋白(VASP)的表達而抑制人胃癌BGC-823細胞侵襲和轉移能力。又有研究發現ICA可抑制卵巢癌SKOV3細胞侵襲和轉移能力，上調其miR-519d的表達[8]。吳劍鋒等[9]實驗發現ICA可逆轉甲氨蝶呤(MTX)耐藥肺癌A549細胞表型，具有抑制肺癌細胞轉移的作用。

1.1.3 抑制腫瘤血管形成 腫瘤血管形成是從周圍組織芽生出新的毛細血管的過程，血管新生與腫瘤細胞生長、浸潤、轉移有著密切聯系。淫羊藿素(ICT)是ICA在體內的一種代謝產物[10]，實驗發現ICT能抑制人肝細胞癌BEL-7402細胞新生血管形成，下調血管內皮生長因子(VEGF)的表達并且上調血管抑制因子(PEDF)的表達[11]。另有研究表明ICA與黃芩苷(BAI) 聯合化療藥多柔比星(ADM) 可降低肝癌HepG2 細胞中的APRIL、VEGF的表達，從而抑制血管內皮細胞ECV304的生長[12]。

1.1.4 協同增效和減輕放化療毒副反應 眾所周知放化療均具有一定的毒副反應，如易疲勞、脫發、胃腸毒性、造血功能低下、骨髓抑制、免疫抑制等，而中藥對于放化療的減毒增效起到重要作用。Hong J等[13]發現淫羊藿素(ICT)可協同增強小鼠乳腺癌4T1細胞的放射敏感性。此外，ICA通過抑制NF-κB活性也可增強大腸癌細胞的放射敏感性[14]；同時ICA還可增強5-氟尿嘧啶(5-Fu)在體外和體內抗大腸癌的效果[15]。在小鼠體內實驗中發現ICA可逆轉環磷酰胺( cyclophosphamide，CTX)所致的骨髓造血功能低下和免疫抑制的狀況，促進小鼠免疫功能恢復[16]。

1.2 肉蓯蓉 俗稱“沙漠人參”，為補腎壯陽、潤腸通便的要藥。近幾年研究發現，肉蓯蓉具有抗腫瘤作用，其主要活性成分麥角甾苷(verbascoside ，Vebr )。周利紅等[17-18]通過建立裸鼠人大腸癌移植瘤模型，觀察麥角甾苷對大腸癌的抑制作用及其對凋亡相關蛋白表達的影響。實驗結果發現，麥角甾苷能夠抑制大腸癌裸鼠移植瘤生長，呈現劑量依賴性；并通過調節HIPK2-P53信號通路，上調促凋亡基因HIPK2、P53 、Bax 的表達，下調抑制凋亡基因Bcl-2的表達，促進大腸癌細胞凋亡而發揮抗腫瘤作用。另有研究發現，肉蓯蓉水提物作用在具有炎癥性腸病誘發大腸癌的小鼠模型，可減少其腸道炎性增生，通過提高小鼠免疫功能，減少其腸道炎癥增生性息肉和幽門螺桿菌感染，表明肉蓯蓉提取物有預防腸道炎癥性疾病和大腸癌的潛力[19]。

1.3 補骨脂 又名破故紙，具有溫腎助陽、納氣、止瀉的功效。補骨脂具有抗腫瘤活性的是其中香豆素類化合物的主要提取物補骨脂素( Psoralen)，其作用機制為誘導細胞凋亡、抑制腫瘤血管形成、逆轉多藥耐藥等。研究發現Psoralen通過caspase-3、p53、Bax和 Bcl-2等基因途徑可抑制人肝癌SMMC-7721細胞的生長，促進腫瘤細胞凋亡[20]。Psoralen還可抑制腫瘤血管內皮細胞的生長和增殖，通過鈣離子信號轉導產生的鈣拮抗作用而抑制腫瘤血管生成[21]。另有實驗證實，Psoralen具有逆轉多藥耐藥(multidrug resistance，MDR)作用。Psoralen逆轉多西他賽(DOC)所致耐藥人肺癌A549 / D16細胞，其通過抑制ABCB1基因的表達，使ABCB1 基因活性下降以及抗癌藥物的釋放，當再次與化療藥物結合時，耐藥細胞具有敏感性而死亡，從而逆轉多藥耐藥[22]。

1.4 杜仲 又名木棉、思仲、思錦樹等，具有補肝腎、強筋骨、安胎的功效。杜仲提取物有效成分的抗腫瘤作用主要是增強宿主免疫功能和促進腫瘤細胞凋亡。實驗發現杜仲多糖能抑制S180肉瘤生長，提高胸腺指數、脾指數，增加外周血白細胞和骨髓有核細胞計數，拮抗環磷酰胺(CTX)引起的骨髓抑制，提高機體的免疫力而抗腫瘤[23]。袁代秀[24]等發現杜仲總黃酮對小鼠H22皮下移植瘤的生長有明顯抑制作用，通過激活線粒體通路調控細胞凋亡的一對信號分子的表達，即下調Bcl-2蛋白和上調Bax蛋白的表達而促進腫瘤細胞凋亡。其他研究表明，杜仲所含山奈酚能上調P53蛋白的表達，使MDA-MB-453細胞周期停滯在G2/M期，抑制乳腺癌的發展[25]。

2 補腎陰藥

2.1 枸杞 其為藥食同源的中藥，具有滋補肝腎、益精明目的功效。現代藥理表明，枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides，LBP)是枸杞抗腫瘤的主要活性成分。LBP主要通過調節免疫發揮抗腫瘤作用。研究表明LBP能抑制荷瘤小鼠腫瘤生長，激發宿主介導的免疫應答，刺激脾細胞增殖反應，提高NK 細胞殺傷能力及巨噬細胞吞噬能力，提高血清TNF-α 水平；LBP與5-FU聯合應用可減輕5-FU造成的免疫系統損傷，因此LBP不僅能增強機體免疫功能，而且可作為化療藥的輔助藥物[26]。Chen S等[27]發現LBP和重組干擾素(IFN-α2b)對小鼠腎癌Renca細胞在體內和體外均起到協同免疫的作用。此外，LBP可抑制胰腺癌LTPA細胞生長，通過增加巨噬細胞數量并且誘導其極化成一型巨噬細胞(M1)，增強機體免疫力而達到抗腫瘤作用[28]。

2.2 何首烏 分為生首烏和制首烏。生首烏具有解毒、消癰、截瘧、潤腸的作用；制首烏則有補肝腎、益精血、烏須發、強筋骨的功效。蒽醌類化合物是何首烏重要的活性成分之一，具有抗腫瘤作用。孫桂波等[29]研究發現何首烏蒽醌類化合物對小鼠前胃癌(MFC)的實體腫瘤和S180肉瘤均有生長抑制作用，且對CTX具有減毒增效的作用，不僅增強CTX對S180荷瘤小鼠的抑瘤作用，而且減輕CTX對其外周血白細胞數減少的毒副作用，抗腫瘤機理與提高機體免疫力有關。Lin SZ等[30]實驗證實，蒽醌類化合物中的大黃素通過調節轉化生長因子TGF-β/ Smad信號通路和血管生成相關miR-20b，miR-155和miR-210的活性而抑制人胰腺癌SW1990細胞的血管生成。另有實驗說明大黃素通過誘導細胞凋亡和自噬，改變細胞周期，抑制血管生成等多種途徑實現對婦科腫瘤的抑制作用[31]。

2.3 黃精 古人譽之為黃土之精粹而得名，又名黃芝、雞頭參、野生姜等，具有補氣養陰、健脾、潤肺、益腎的功效。黃精主要抗腫瘤活性成分為黃精多糖。眾多研究表明黃精多糖對于動物移植瘤有較好的抑制作用。江華[32]研究發現黃精多糖可顯著抑制小鼠移植瘤Heps和Eac的生長，各劑量組抑瘤率均較高，但100、50 mg/ kg 劑量組對動物體質量影響較大。同時，黃精多糖對肝癌H22移植瘤小鼠也有抑瘤作用，使細胞停滯于G0 /G1期而阻礙細胞增殖，并提高腫瘤組織中Caspase-3，8，9的活性，導致caspase 家族的級聯效應，最終活化Caspase-3，促進腫瘤細胞凋亡，從而抑制腫瘤[33]。

[21]余紹蕾，白 莉，蔡 宇.補骨脂素對腫瘤血管內皮細胞抑制作用的實驗研究[J].數理醫藥學雜志，2013，22(4)：458-459.

[22]Hsieh MJ，Chen MK，Yu YY，et al. Psoralen reverses docetaxel-induced multidrug resistance in A549 /D16 human lung cancer cells lines[J]. Phytomedicine. 2014，21(7)：970-7.

[23]辛曉明，王大偉，趙 娟，等.杜仲總多糖抗腫瘤作用的實驗研究[J].醫藥導報，2009，24(6)：719-721.

[24]袁帶秀，舒麗霞，黃 榮.杜仲總黃酮對荷瘤小鼠的抗腫瘤作用[J].中國臨床藥理學與治療學，2014，19(12)：1332-1336.

[25]Choi EJ，Ahn WS. Kaempferol induced the apoptosis via cell cycle arresl in human breasl cancer MDA-MB-453 cells[J].Nutr Res Pract，2008，2(4)：322-325.

[26]孫志杰，黃 靜，唐蔚琳.枸杞多糖聯合氟尿嘧啶對荷瘤小鼠免疫功能影響的實驗研究[J].中南藥學，2013，11(7)：517-520.

[27] Chen S，Liang L，Wang Y，et al．Synergistic immunotherapeutic effects of Lycium barbarum polysaccharide and interferon-α2b on the murine Renca renal cell carcinoma cell line in vitro and in vivo[J].Mol Med Rep，2015， [Epub ahead of print].

[28]楊 青，白 光，王 巍，等.枸杞多糖通過誘導巨噬細胞極化抗胰腺癌的研究[J].天津醫藥，2015，51(11)：1-4.

[29]孫桂波，鄧響潮，郭寶江，等.何首烏蒽醌苷類化合物抗腫瘤作用研究[J].中國新藥雜志，2008，17(10)：837-841.

[30] Lin SZ，Xu JB，Ji X，et al.Emodin inhibits angiogenesis in pancreatic cancer by regulating the transforming growth factor-β/drosophila mothers against decapentaplegic pathway and angiogenesis-associated microRNAs[J]. Mol Med Rep，2015，12(4)：5865-71.

[31] Wang Y，Yu H，Zhang J，et al．Anti-tumor effect of emodin on gynecological cancer cells[J]. Cell Oncol (Dordr)，2015，38(5)：353-63.

[32]江 華.黃精多糖的抗腫瘤活性研究[J].南京中醫藥大學學報，2010，21(6)：479-480.

[33]段 華，王保奇，張躍文.黃精多糖對肝癌H22移植瘤小鼠的抑瘤作用及機制研究[J].中藥新藥與臨床藥理，2014，25(1)：5-7.

[34]李 璘，邱蓉麗，程 革，等.女貞子多糖抗腫瘤作用研究[J].中國藥理學通報，2008，12：1619-1622.

[35]李 璘，邱蓉麗，程 革，等.女貞子多糖對黑色素瘤細胞黏附能力的影響[J].中國藥理學通報，2009，25(10)：1367-1369.

[36]高福君.女貞子提取物抑制人肝癌細胞血管生長因子表達作用研究[J].中國實驗方劑學雜志，2011，02：139-142.

[37]吳勃巖，高 明，徐紹娜.女貞子有效成分齊墩果酸對S180荷瘤小鼠抑瘤作用及存活時間的影響[J].中醫藥信息，2010，17(1)：37-38.

[38] Sun C，Wang Z，Zheng Q，et al. Salidroside inhibitsmigration and invasion of human fibrosarcoma HT1080cells[J]. Phytomedicine，2012，19(3/4)： 355-363.

[39]Zhang J F，He M L，Qi D，et al. Aqueous extracts of Fructus Ligustri Lucidi enhance the sensitivity of human colorectal carcinoma DLD-1 cells to doxorubicin-induced apoptosis via Tbx3 suppression[J]. Integr Cancer Ther，2011，10(1)： 85-91.

2.4 女貞子 其功效為補益肝腎，烏須明目，其抗腫瘤的活性成分主要有紅景天苷、齊墩果酸、熊果酸和多糖等。李璘等[34-35]研究發現女貞子多糖對小鼠S180肉瘤、小鼠H22肝癌具有抑制作用，其抗實體瘤的作用與提高機體免疫力有關；又發現女貞子多糖還可抑制黑色素瘤細胞的黏附，降低腫瘤細胞黏附分子E-cadherin的表達，具有抗腫瘤能力。其他研究表明，熊果酸在體內和體外實驗均可抑制人肝癌細胞生長，并對血管內皮生長因子(VEGF)和轉化生長因子(TGF-α)的表達有明顯抑制作用，抑制腫瘤血管生長[36]。齊墩果酸也能有效抑制S180腫瘤生長，增強免疫力，延長荷瘤小鼠存活時間[37]。紅景天苷能夠抑制人纖維肉瘤HT1080細胞內過度產生的活性氧，通過調節ROS-PKC-ERK1/2信號通路，上調E-cadherin的表達，下調MMP-2和MMP-9的表達，從而抑制腫瘤細胞侵襲轉移能力[38]。此外，女貞子水提物通過抑制Tbx的表達，激活抑癌基因p14和p53的表達和p14(ARF)-p53信號轉導，從而提高大腸癌DLD-1細胞對阿霉素誘導凋亡的敏感性，有助于大腸癌的輔助化療[39]。

3 問題與展望

近年來，補腎中藥有效成分抗腫瘤的研究已取得一定進展，除了上述列舉的補腎中藥之外，如巴戟天、菟絲子、石斛、天冬等有效成分在抗腫瘤方面也有一些研究，這為臨床應用補腎中藥治療腫瘤提供依據和方法，對揭示補腎中藥防治腫瘤的作用機理、明確作用靶點和篩選有效抗癌藥物均具有重大意義，但仍存在一些問題亟待解決：①補腎中藥作用機制研究單一，目前集中在基因表達調控方面，具體作用靶點不明確，缺乏系統研究。②實驗研究多在細胞層面，動物實驗較少，并且研究的動物模型單一。③補腎中藥單體不同的有效成分關于抗腫瘤研究不夠全面，探索其它有效成分的抗腫瘤作用還存在很大空間。相信隨著中藥抗腫瘤研究的不斷深入，補腎中藥抗腫瘤的機制將逐漸被闡明，為臨床用藥提供指導。

[1]靳永杰，周利紅，劉 宣，等.從腎論治腫瘤[J].中國醫藥科學，2015，5(9)：32-36.

[2]杜道兵，盧萬根，曹叢仁，等.淫羊藿苷促進宮頸癌TC-1細胞凋亡作用的研究[J].現代生物醫學進展，2011，7(4)：646-649.

[3]李翠玲，張 玲，顧洪濤，等.淫羊藿苷體內抑瘤作用及其機制[J].中國腫瘤生物治療雜志，2007，14(2)：137-142.

[4]郭 莉，張 嫻，柴生颋，等.淫羊藿苷對人乳腺癌MCF-7細胞增殖、凋亡作用的實驗研究[J].遼寧中醫雜志，2015，39(3)：643-645+4.

[5] Li S，Dong P，Wang J，et al．Icariin，a natural flavonol glycoside，induces apoptosis in human hepatoma SMMC-7721 cells via a ROS/JNK-dependent mitochondrial pathway[J]. J Cancer Lett，2010，8; 298(2)： 222-30.

[6] Li J，Jiang K，Zhao F. Icariin regulates the proliferation and apoptosis of human ovarian cancer cells through microRNA-21 by targeting PTEN，RECK and Bcl-2[J]. Oncol Rep，2015，33(6)：2829-36.

[7] Wang Y，Dong H，Zhu M，et al．Icariin exterts negative effects on human gastric cancer cell invasion and migration by vasodilator-stimulated phosphoprotein via Rac1 pathway[J]. Eur J Pharmacol，2010，635(1-3)：40-8.

[8]李經緯，王詩卓，趙福杰.淫羊藿苷上調miR-519d表達抑制人SKOV3卵巢癌細胞增殖、遷移和侵襲[J].解剖科學進展，2015，21(5)：471-474+478.

[9]吳劍鋒，何曉東，許衛東，等.淫羊藿苷逆轉耐甲氨蝶呤肺癌A549細胞轉移表型[J].腫瘤，2009，12：1124-1128.

[10]王大偉，鄧秀蘭，牛建超，等.淫羊藿素和脫水淫羊藿素對人類乳腺癌細胞T47D增殖和細胞周期的影響[J].北京中醫藥，2009，28(8)：637-640.

[11]劉 棟，呂 祥，杜 娟，等.淫羊藿素抑制人肝細胞癌BEL-7402細胞株新生血管的機制研究[J].中醫藥導報，2014，29(5)：22-25.

[12]唐 菁，張 玲，李翠玲，等.淫羊藿苷與黃芩苷聯合多柔比星對肝癌細胞APRIL表達和血管內皮細胞生長抑制的研究[J].中華腫瘤防治雜志，2009，10(20)：1534-1537.

[13] Hong J，Zhang Z，Lv W，et al．Icaritin synergistically enhances the radiosensitivity of 4T1 breast cancer cells[J]. PLoS One，2013，8(8)：e71347.

[14] Zhang Y，Wei Y，Zhu Z，et al．Icariin enhances radiosensitivity of colorectal cancer cells by suppressing NF-κB activity[J].Cell Biochem Biophys，2014，69(2)：303-10.

[15] Shi DB，Li XX，Zheng HT，et al．Icariin-mediated inhibition of NF-κB activity enhances the in vitro and in vivo antitumour effect of 5-fluorouracil in colorectal cancer[J]. Cell Biochem Biophys，2014，69(3)：523-30.

[16]趙連梅，紀 昕，單保恩，等. 淫羊藿苷對化療后小鼠骨髓和細胞免疫抑制作用的影響[J]. 細胞與分子免疫學雜志，2010，26(10)：976-979.

[17]周利紅，胡 強，陳星竹，等. 麥角甾苷調節HIPK2-P53通路對人大腸癌裸鼠移植瘤的治療作用[J]. 世界華人消化雜志，2014，17(2)：171-178.

[18] Zhou L，Feng Y，Jin Y，et al．Verbascoside promotes apoptosis by regulating HIPK2-p53 signaling in human colorectal cancer[J].BMC Cancer，2014，14：747.

[19] Jia Y，Guan Q，Guo Y，et al．Reduction of inflammatory hyperplasia in the intestine in colon cancer-prone mice by water-extract of Cistanche deserticola[J]. Phytother Res，2012，26(6)：812-9.

[20]Jiang Z，Xiong J. Induction of Apoptosis in Human Hepatocarcinoma SMMC-7721 Cells In Vitro by Psoralen from Psoralea corylifolia[J].Cell Biochem Biophys，2014，[ Epub ahead of print].

國家自然科學基金資助項目(No.81520108031，No.81303103，No.81473478)；上海市科委資助項目(No.13ZR1461000，No.14140901402)；上海市教委“晨光計劃”資助項目(No.13CG47)；上海中醫藥大學研究生“創新能力培養”專項科研項目(No.22014229)

上海中醫藥大學附屬曙光醫院腫瘤科(201203)

▲通訊作者 李 琦，男，教授，主任醫師，博士研究生導師。E-mail：lzwf@hotmail.com