淺談奶牛乳房炎PCR 診斷技術的應用

高清清

(江蘇省太倉市瀏河動物防疫站215400)

淺談奶牛乳房炎PCR 診斷技術的應用

高清清

(江蘇省太倉市瀏河動物防疫站215400)

奶牛乳房炎是由物理、化學或微生物等因素刺激奶牛乳腺所引發的一種炎癥反應，其中多種病原微生物的感染是引起奶牛乳房炎的主要病因。該病廣泛存在于世界各地，其發生率至今仍相當高。它不僅僅給世界奶牛養殖業帶來了巨大的經濟損失，也給乳品工業的發展、公共衛生以及食品安全帶來一定隱患。目前，奶牛乳房炎的防治仍以采用抗菌素進行治療為主，臨床治療過程中由于盲目使用抗生素，致使耐藥菌株不斷產生，不但療效不佳，而且造成治療成本增加；還可引起乳中藥物殘留，這將大大降低經濟效益。早期的檢測不僅能夠預防乳房炎的發病，而且也可為乳房炎治療提供有效依據，是直接提高牛奶質量有效、切實的手段。目前奶牛乳房炎主要的診斷方法有乳汁體細胞計數、微生物鑒定、電導率值檢驗、乳成分檢驗、MTT和PCR檢測等方法。

微生物鑒定法是目前比較認同的一種標準檢測方法，但此種檢測方法檢測時間長，檢測環境要求高，工作量大，并且極易產生假陰性誤判，因此目前還僅限于實驗室檢測，并未在奶牛養殖場進行推廣。隨著分子生物學的廣泛發展，PCR應用技術日益完善，PCR檢測奶牛乳房炎是目前在臨床診斷中廣泛應用的一種分子水平方法。此次筆直應用上海奶牛育種中心PathoProof奶牛乳房炎PCR診斷系統對江蘇太倉地區部分牧場兩百多個樣本進行檢測，發現其具備以下特點：（1）準確：100%特異性鑒別出牛奶樣本中的DNA，結果客觀，無需依賴檢測者經驗；實現定性和定量分析，如果樣本中同時存在多種病原菌，所有病原菌會被同時檢測到并報告各種細菌的比例。 （2）高效：從樣本到結果只需4～5h，包括支原體。 （3）便捷：可用于分析鮮乳及添加溴硝丙二醇防腐劑保存了3個月的牛乳樣本，樣本常溫運輸，使牛奶跟蹤樣本 （DHI樣本）能首次用于乳腺炎檢測項目；可用于對奶牛治療期間的樣本進行檢測，不受抗生素藥品的影響；不需要非常豐富的微生物鑒定經驗和嚴格的無菌操作環境及設備就能得到準確結果。

基于該技術的特點，牧場可對乳房炎急性發病高產奶牛，久治不愈的、反復發作的奶牛優先進行采樣送檢，及時確定主要致病菌及用藥濃度，避免盲目用藥、過量用藥，縮短治療周期，減少生產上的損失。有條件的牧場也可以制定科學的計劃，結合奶牛臨床癥狀及隱性乳房炎檢測結果，定期集中采樣送檢，獲得牧場全年度不同季節奶牛乳房炎病原菌發病情況及其藥物敏感性的系統資料，為指導臨床合理用藥和制定來年牧場環境、擠奶管理計劃，提高奶牛乳房炎防治效果提供理論依據。