2011至2013年臨床分離腸球菌屬細(xì)菌的耐藥性變遷分析

2011至2013年臨床分離腸球菌屬細(xì)菌的耐藥性變遷分析

張正銀，孫晴，王立平

(上海市同仁醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 200336)

關(guān)鍵詞：腸球菌；抗菌藥物；耐藥性；分布

中圖分類號(hào)：

文章編號(hào)：1673-8640(2015)02-0206-03R378.1

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：碼：A

DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2015.01.025

作者簡介：張正銀，女，1965年生，碩士，主任技師，主要從事臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)工作。

收稿日期：(2014-10-15)

腸球菌是人體腸道的條件致病菌，不僅可引起尿路感染，還可引起敗血癥、腹腔炎、心內(nèi)膜炎等危及生命的感染。其固有耐藥性是臨床治療的一大難題。由于抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，腸球菌耐藥菌株日益增多，耐藥性問題也日趨嚴(yán)重，尤其是近年來耐萬古霉素菌株的出現(xiàn)給臨床治療帶來了嚴(yán)峻的考驗(yàn)[1]。因此，對(duì)腸球菌屬細(xì)菌的耐藥性進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測，了解其耐藥現(xiàn)狀對(duì)指導(dǎo)臨床合理用藥具有重要意義。

一、材料和方法

1.菌株來源收集2011年1月至2013年12月上海市同仁醫(yī)院臨床標(biāo)本中分離的腸球菌屬細(xì)菌，剔除重復(fù)菌株，共計(jì)581株。

2.儀器與試劑Vitek 2 Compact全自動(dòng)微生物分析儀及其配套鑒定及藥敏卡片由法國生物梅里埃公司提供。MH平板由上海伊華公司提供，藥敏紙片為英國oxoid 公司產(chǎn)品。萬古霉素E-test 試條為法國生物梅里埃公司產(chǎn)品。質(zhì)控菌株糞腸球菌ATCC29212由上海市臨檢中心提供。

3.腸球菌的分離鑒定參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)[2]，根據(jù)不同的標(biāo)本種類選擇相應(yīng)的培養(yǎng)基及方法分離菌種。菌種鑒定采用Vitek 2 Compact GP卡進(jìn)行。

4.藥物敏感試驗(yàn)(簡稱藥敏試驗(yàn))最低抑菌濃度(minimal inhibitory concentration, MIC)測定采用Vitek 2 Compact AST-GP67卡，磷霉素、氯霉素、替考拉寧藥敏試驗(yàn)采用Kirby-Bauer法。結(jié)果判斷根據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI)M100-S23(2013版)文件規(guī)定執(zhí)行[3]。

5.萬古霉素耐藥腸球菌(vancomycin resistanceEnterococcus，VRE)的鑒定及耐藥基因檢測對(duì)Vitek 2 Compact 全自動(dòng)微生物分析儀檢測為萬古霉素耐藥的腸球菌菌株采用萬古霉素E-test確認(rèn)并測定MIC。鑒定為VRE送復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院抗生素研究所進(jìn)行最終確認(rèn)和耐藥基因分析[4]。

6.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用WHONET 5.6 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

二、結(jié)果

1.菌株來源581株腸球菌屬細(xì)菌主要來源于中段尿423株(72.8%)，然后依次為呼吸道71株(12.2%)、分泌物34株(5.9%)、血液28株(4.8%)、膽汁13株(2.2%)、腹水5株(0.9%)、膿液4株(0.7%)及其它3株(0.5%)。

2.菌種分布581株腸球菌屬細(xì)菌中糞腸球菌306株(52.7%)、屎腸球菌256株(44.1%)、鶉雞腸球菌10株(1.7%)、鉛黃腸球菌1株(0.2%)、鳥腸球菌8株(1.4%)。

3.2011至2013年糞腸球菌與屎腸球菌對(duì)抗菌藥物的敏感性分析近3年的觀察顯示糞腸球菌對(duì)呋喃妥因、氨芐西林、磷霉素均保持較高敏感性，前兩者耐藥率有所下降，后者稍有上升；對(duì)萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺、替加環(huán)素?zé)o耐藥。屎腸球菌對(duì)奎奴普丁-達(dá)福普汀、磷霉素、氯霉素保持較高敏感性，磷霉素耐藥率逐年上升；2012年開始出現(xiàn)VRE，發(fā)生率上升。 糞腸球菌較為敏感的藥物有氨芐西林和呋喃妥因。屎腸球菌較為敏感的藥物奎奴普丁-達(dá)福普汀、氯霉素，出現(xiàn)VRE；兩者均敏感的抗菌藥物有利奈唑胺(均無耐藥株)、萬古霉素、替考拉寧、替加環(huán)素，較為敏感的藥物有磷霉素和氯霉素，見表1和表2。

表1　2011至2013年臨床分離糞腸球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率(R%)和敏感率(S%)

表2　2011至2013年臨床分離屎腸球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率(R%)和敏感率(S%)

4.萬古霉素耐藥腸球菌分離情況581株腸球菌屬細(xì)菌中共分離5株VRE，均為屎腸球菌。2011年未分離出VRE，2012年屎腸球菌VRE發(fā)生率為2.3%(2/88)，2013年為5.2%(3/58)。5株VRE均來源于不同病區(qū)患者的中段尿，經(jīng)檢測分析基因型均為vanM型[4]。

三、討論

腸球菌為人體寄居的正常菌群。由于抗菌藥物的不合理使用、免疫受損宿主及侵襲性操作的增加，腸球菌成為醫(yī)院感染的主要病原菌之一，在革蘭陽性球菌引起的醫(yī)院感染中占第2位[5]。以往的文獻(xiàn)報(bào)道臨床標(biāo)本中屎腸球菌的分離率高于糞腸球菌[6-7]且有上升趨勢(shì)。本研究結(jié)果顯示糞腸球菌的分離率略高于屎腸球菌，趨勢(shì)較平穩(wěn)。2013年本院基建床位壓縮導(dǎo)致總體檢出數(shù)下降。本院臨床分離腸球菌主要來源于中段尿標(biāo)本，在尿路感染中腸球菌屬細(xì)菌所占比率僅次于大腸埃希菌，一直居于第2位，與文獻(xiàn)報(bào)道[8]一致。

總體上糞腸球菌的耐藥率低于屎腸球菌，糞腸球菌對(duì)呋喃妥因、氨芐西林、磷霉素均保持較高敏感性，對(duì)萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺、替加環(huán)素?zé)o耐藥。屎腸球菌較為敏感的藥物為奎奴普丁-達(dá)福普汀、氯霉素、磷霉素和四環(huán)素，而磷霉素耐藥率逐年上升，出現(xiàn)VRE(部分VRE菌株對(duì)替加環(huán)素和替考拉寧耐藥)，兩者均對(duì)利奈唑胺敏感。

1988年，英國報(bào)道了VRE，隨后其它歐洲國家和美國也相繼檢出VRE。近年，國外報(bào)道 VRE感染有所上升，美國感染率較歐洲和北美高，為33%[9]。美國醫(yī)院感染監(jiān)測系統(tǒng)已將腸球菌屬列為醫(yī)院感染的第2大病原菌。中國CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測網(wǎng)的數(shù)據(jù)顯示，我國腸球菌萬古霉素耐藥率雖然總體水平不高，但逐年上升的趨勢(shì)明顯，部分醫(yī)院腸球菌萬古霉素耐藥率已接近10%。早先這類耐藥株以vanA型為主，近年日益多元化，相繼出現(xiàn)了vanB、vanM等基因型[10]。國內(nèi)VRE菌株最初僅出現(xiàn)在北京、上海、浙江等為數(shù)不多的三級(jí)醫(yī)院，近年分離到此類耐藥菌株的醫(yī)院不斷增多。本院為二級(jí)醫(yī)院，2012年開始出現(xiàn)VRE，均為屎腸球菌且發(fā)生有上升，經(jīng)基因檢測5株VRE菌為vanM型。

本研究結(jié)果顯示，腸球菌糞腸球菌和屎腸球菌的藥物敏感性存在差異。在觀察的16種抗菌藥物中有11種藥物屎腸球菌的耐藥率高于糞腸球菌，且出現(xiàn)VRE。臨床治療應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果合理選用抗菌藥物，同時(shí)應(yīng)加強(qiáng)耐藥監(jiān)測，防止耐藥菌播散。

參考文獻(xiàn)

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(本文編輯：姜敏)