糖尿病合并社區獲得性肺炎患者血漿CD4+、CD4+CD25+調節性T細胞變化的臨床意義

王一江

(南京醫科大學附屬江蘇盛澤醫院呼吸科,江蘇 蘇州　215228)

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糖尿病合并社區獲得性肺炎患者血漿CD4+、CD4+CD25+調節性T細胞變化的臨床意義

王一江

(南京醫科大學附屬江蘇盛澤醫院呼吸科,江蘇 蘇州215228)

【摘要】目的：探討糖尿病合并社區獲得性肺炎患者血漿CD4+、CD4+CD25+調節性T細胞的變化及臨床意義。方法：選擇糖尿病合并社區獲得性肺炎患者62例為觀察組，入院后進行相關降糖及抗感染治療，觀察患者入院時、入院治療8周后血漿CD4+、CD4+CD25+T細胞水平，并探討其與血糖控制水平的關系。另選擇30例健康體檢者為對照組。結果：治療前后，觀察組血漿CD4+細胞水平顯著低于健康對照組，CD4+CD25+及CD4+CD25+/CD4+比值高于對照組(P<0.05或P<0.01)。與治療前比較，治療8周后觀察組CD4+細胞水平升高(P<0.05)，CD4+CD25+及CD4+CD25+/CD4+比值顯著降低(P<0.01)。觀察組依據治療效果分為治愈組、有效組及無效組，CD4+水平隨療效的增加而增加，CD4+CD25+水平及CD4+CD25+/CD4+比值隨療效的增加而降低，3組比較差異具有統計學意義(P<0.05)。CD4+T細胞水平與餐后2 h血糖(2 h PBG)水平呈顯著負相關(r=-0.522，P<0.05)。結論：檢測CD4+T細胞、CD4+CD25+調節性T細胞變化，可客觀評價糖尿病合并社區獲得性肺炎患者免疫功能。

【關鍵詞】糖尿病;社區獲得性肺炎;CD4+;CD25+;調節性T細胞

糖尿病患者由于長期高血糖及機體免疫功能低下等原因，容易并發肺部感染，而感染可加重糖尿病病情，增加糖尿病死亡率。CD4+CD25+調節性T細胞不僅在腫瘤免疫發生發展中起重要作用，抗感染過程中，CD4+CD25+調節性T細胞主要調節CD4+效應T細胞在清除病原體及引起機體重度炎癥、組織損傷過度免疫反應間的平衡[1-3]。在糖尿病合并肺部感染發生發展過程中，CD4+效應T細胞、CD4+CD25+調節性T細胞水平變化情況及如何發揮其免疫調控作用報道甚少。本研究通過觀察糖尿病合并社區獲得性肺炎患者血漿CD4+效應T細胞、CD4+CD25+調節性T細胞的變化，探討其臨床意義。

1資料與方法

1.1　一般資料

選擇2014年1月至2015年1月在江蘇盛澤醫院呼吸科就診的糖尿病合并社區獲得性肺炎者62例(觀察組)，所有患者經臨床檢查、胸部X線及痰病原體培養確診。其中男性36例，女性26例；年齡48～76歲，平均(60.6±10.4)歲；感染病程(11.8±2.5)d。糖尿病診斷按中華人民共和國衛生部2012年糖尿病篩查和診斷行業標準[4]，即空腹血糖(FPG)≥7.0 mmol/L，餐后2 h血糖(2 hPBG)≥11.1 mmol/L。伴社區獲得性肺炎診斷標準[5]，以下1～3項任1項加第4項：(1)原有呼吸道疾病加重伴膿痰，或出現發熱、咳嗽、咳痰等新近癥狀，伴或不伴胸痛；(2)肺實變體征，或伴有濕性啰音；(3)白細胞計數(WBC)>10×109/L或<4×109/L；(4)胸部X線檢查為片狀、斑片狀浸潤性陰影或間質性改變。排除標準：排除肺水腫、嚴重心臟病、腎臟疾患、慢性肝病、腫瘤、自身免疫性疾病及伴有器官衰竭者。另選取同時期健康體檢者30例為對照組，其中男性10例，女性10例；年齡48～72歲，平均(61.7±10.7)歲。兩組年齡、性別等一般資料可比性(P>0.05)。

1.2　檢驗方法

患者入院后視個體情況，使用胰島素、控制飲食、抗感染及相關治療，觀察8周。對照組于體檢時，觀察組于入院時及治療8周后，抽取清晨空腹外周靜脈血2 mL，加入肝素抗凝管。取25 μL外周血分裝于流式管中，依次加入熒光標記CD4-FITC-CD8-PE-CD3-PE-Cy5抗體、CD4-PE抗體、CD25-FITC抗體及同型對照試劑鼠抗人免疫球蛋白IgG1-FITC-IgG1-PEIgG1-PE-Cy5、IgG1-PE、IgG1-FITC各5 μL，室溫避光孵育20 min，所有試劑購自美國貝克曼庫爾特公司。隨后加入紅細胞裂解液0.5 mL/管，溶血機(美國貝克曼公司)渦旋混勻，流式細胞儀(美國貝克曼公司)檢測。

1.3　觀察指標

檢測觀察組入院時及入院8周后血CD4+T細胞、CD4+CD25+調節性T細胞水平，對照組以相同檢測法檢測上述指標。觀察組患者治療8周后，依據治療效果分為治愈組、顯效組、無效組，比較3組之間CD4+T細胞、CD4+CD25+調節性T細胞水平，及FPG、2 h PBG控制水平。觀察CD4+、CD4+CD25+T細胞與FBG及BG2h之間的相關性。血糖控制標準：FPG<7.22 mmoL/L，2 h PBG<8.33 mmoL/L。

1.4　統計學分析

2結果

2.1　兩組入院前及入院8周后血CD4+、CD4+CD25+調節性T細胞比較

入院前后，觀察組血漿CD4+細胞水平顯著低于對照組、CD4+CD25+調節性T細胞水平及CD4+CD25+/CD4+比值顯著高于健康對照組(P<0.05或P<0.01)；8周后觀察組CD4+細胞水平較入院前升高，差異具有無統計學意義(P<0.05)。CD4+CD25+調節性T細胞水平及CD4+CD25+/CD4+比值較入院前降低(P<0.01)，見表1。

表1　對照組與觀察組血CD4+、CD4+CD25+調節性T細胞比較

2.2　8周后治愈組、顯效組、無效組CD4+、CD4+CD25+T細胞及血糖水平比較

治療8周后觀察組痊愈27例(治愈組)，X線示胸部炎癥基本消失，復查痰培養陰性；有效20例(有效組)，癥狀緩解，X線示胸部炎癥少量陰影；治療無效13例(無效組)，表示癥狀未緩解或加重、病灶未吸收或增加。

治愈組血糖控制者19例(70.37%，19/27)，顯效組11例(55.00%，11/20)，無效組3例(23.08%，3/13)，3組控制率比較差異具有統計學意義(P<0.05)。

治療8周后，CD4+水平隨療效的增加而增加，CD4+CD25+、CD4+CD25+/CD4+比值、FPG及2 h PBG水平隨療效的增加而降低，3組比較差異具有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2　8周后治愈組、顯效組、穩定組CD4+、CD4+CD25+T細胞及血糖水平比較

2.3　CD4+、CD4+CD25+T細胞與FPG及BG 2 h之間的相關性

Spearman相關分析表明，CD4+T細胞水平與2 h PBG水平呈顯著負相關(r=-0.522，P<0.05)。CD4+CD25+T細胞與FPG及BG 2 h水平均無相關性。

3討論

糖尿病患者容易并發社區獲得性肺炎，與機體胰島素缺乏、長期高血糖等導致機體免疫功能紊亂有關[6-7]：機體促炎細胞因子過度生成，抗炎性細胞因子生成不足，體內炎癥平衡失調，呼吸道黏膜防御能力降低，可以引起反復的細菌、病毒感染，較難治愈[8]。

CD4+T淋巴細胞(Th)活化后，Th1輔助細胞主要分泌促炎細胞因子，如IL-2、TNF-α、γ-IF等，主要介導細胞免疫反應，對抗自身免疫性疾病、異體移植排斥反應及機體感染；Th2輔助細胞主要分泌抗炎細胞因子，如IL-4、IL-10等，介導體液免疫反應，對抗機體過敏反應[9]。CD4+CD25+調節性T細胞通過分泌Th2型細胞因子，發揮免疫抑制功能，其數量、比例及功能決定了其對CD4+T細胞的抑制能力[10-11]。研究發現糖尿病合并社區獲得性肺炎患者體內，CD4+CD25+T細胞可通過抑制CD4+T細胞活性，降低抗感染免疫的敏感性，從而抑制過度的免疫反應[12]。一些細胞因子、細菌及其產物可上調CD4+CD25+T細胞表面效應物質表達，促進其增殖，增強免疫抑制功能。有報道顯示CD4+CD25+調節性T細胞也會抑制感染者體內B細胞活化增殖[13]，這可能也是造成體液免疫功能紊亂，導致糖尿病合并社區獲得性肺炎難治的原因之一。

本研究顯示，入院前觀察組CD4+T細胞水平顯著低于健康對照組(P<0.01)、CD4+CD25+調節性T細胞數量及比值顯著高于后者(P<0.01)，表明觀察組體內抗感染免疫作用被抑制。治療8周后，CD4+水平增加，CD4+CD25+水平及CD4+CD25+/CD4+比值降低，提示隨著感染控制，糖尿病患者機體免疫功能也得到一定程度的恢復，但總體仍然呈抑制狀態。與李洪等[14]的研究一致。

同時，本研究觀察發現血糖控制后，機體免疫功能亦恢復，且CD4+T細胞與BG2 h呈顯著負相關。結果提示血糖水平，尤其是餐后血糖水平與糖尿病患者機體免疫功能密切相關，與蕭正華等[15]的研究一致。因此對糖尿病患者有效地降低血糖，有助于機體免疫功能的恢復，可一定程度上預防和治療社區獲得性肺炎的發生和發展。

綜上所述，通過檢測CD4+T細胞、CD4+CD25+調節T細胞變化，可全面客觀評價糖尿病合并社區獲得性肺炎時免疫功能。對糖尿病合并社區獲得性肺炎患者，一方面控制血糖，另一方面可補充新鮮的CD4+T細胞，可調節炎癥失衡，促進機體康復。

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(學術編輯：蔣莉)

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Clinical significance of plasma CD4+cell and CD4+CD25+regulatory T cell changes in patients with diabetes mellitus combined with CAP

WANG Yi-jiang

(DepartmentofRespiratory,JiangsuShengzeHospitalAffiliatedtoNanjingMedicalUniversity,Suzhou215228,Jiangsu,China)

【Abstract】Objective：To explore the changes of plasma CD4+、CD4+CD25+regulatory T cells and their significance in patients with diabetes mellitus combined with community-acquired pneumonia (CAP).Methods：A total of 62 patients with diabetes mellitus combined with CAP were selected as observation group and treated with corresponding hypoglycemic and anti-infection treatment after being hospitalized. Plasma CD4+、CD4+CD25+T cell levels before hospitalization and 8 weeks after treatment were observed to explore their relationship with controlling level of blood sugar. And another 30 healthy examiners served as control group.Results：Before and after hospitalization, observation group was evidently lower in observation group CD4+cell level than control group, but markedly higher in CD4+CD25+and CD4+CD25+/CD4+ratio than control group (P<0.05, P<0.01). Compared with treatment before, 8 weeks after hospitalization, CD4+cell level increased obviously (P<0.05) while CD4+CD25+and CD4+CD25+/CD4+ratio decreased significantly in observation group (P<0.01). Observation group was divided into recovery group, effective group and non-effective group, according to therapeutic efficacy. CD4+cell level increased while CD4+CD25+and CD4+CD25+/CD4+ratio decreased along with efficacy, and there were significant differences among 3 groups (P<0.05). And CD4+cell level was in negative association with plasma blood glucose level 2 h after meal (2 h PBG) (r=-0.522,P<0.05). Conclusion：Detecting CD4+cell level and CD4+CD25+regulatory T cell changes can objectively evaluate the immunological function of patients with diabetes mellitus combined with CAP.

【Key words】Diabetes mellitus; Community-acquired pneumonia; CD4+; CD25+; Regulatory T cell

作者簡介：張耿(1971-)，男，海南海口人，副主任醫師，從事老年醫學方面研究。E-mail: 2956098144@qq.com

收稿日期：2015-08-19

doi：10.3969/j.issn.1005-3697.2015.06.24

【中圖分類號】

【文章編號】1005-3697(2015)06-0827-03R587.1

【文獻標志碼】A