摘要:云芝與靈芝等都是“芝”類中藥,本草記載“芝”能“益氣,久食輕身延年”。其云芝為多孔菌科真菌,又名千層蘑、多色牛肝菌、紅見手等,是最具藥用價值的真菌之一。而野生云芝品質受自然環境的影響較大,且混雜的種屬也對云芝品質造成一定影響,加之野生云芝生長周期長,其產量無法滿足人們的實際需求,故現多以人工栽培和液體發酵培養的方法獲取云芝菌絲體,進而提取具有抗腫瘤、增強免疫功能等藥理活性的云芝多糖,以達到提高云芝產量,更好滿足社會需求的目的。本文以提高云芝產量、品質為出發點,就云芝的生長特性、栽培技術及云芝多糖功效應用等方面作以探究。
關鍵詞:云芝 栽培技術 云芝多糖 功效應用
中圖分類號:O63 ? 文獻標識碼:A??文章編號:1672-3791(2015)08(b)-0000-00
云芝為多孔菌科真菌,又名千層蘑、多色牛肝菌、紅見手等,其具有較高的藥用價值,可以治療肝炎、腫瘤、免疫功能失調等多種病患,同時又能燥濕祛痰、祛風除濕。在臨床使用中,常將云芝與抗癌藥物同時使用以降低抗癌藥物對病人的損傷性。經研究,云芝菌絲體中的糖肽類物質是主要活性成分。我國對于云芝多糖新藥的研制歷時了15個年頭,填補了國內這類藥物的空白。但因野生云芝生長及其容易受到自然環境變化的影響,并且野生云芝種屬混雜,很難保證品質,故現多采用人工栽培及液體發酵培養獲取云芝菌絲體,相對具有周期短,品質有保證,產量大的特點,越來越受到人們的廣泛關注和深入研究[1]。筆者以提高云芝產量及品質為出發點,圍繞云芝的生長特性、栽培技術及云芝多糖功效應用研究等方面做以探究。
1 云芝的生長特性及研究歷史
1.1 云芝的生長特性
云芝多見于闊葉樹的枯立木、枯枝及衰老的活立木上,偶見生于落葉松、黑松等針葉樹腐木上。全年均可采收,除雜,曬干。在我國,從北至南21個省份均有云芝的分布,東北是主要產區。
1.2 云芝的研究歷史
20世紀70年代,繼東北師范大學研究人員第一次將云芝制成中成藥后,人們對云芝的關注與研究程度逐日上升。日本首先將其研發成抗癌藥Krestin(PSK),至1984年,我國通研究發現用酒精分部沉淀法所獲云芝結合蛋白多糖,具有改善食欲和鎮痛的效果,使人們對于云芝的研究跨入了一個新的階段,因為此前就此方面的研究尚無報道。為此,將提取的成分稱為“云芝糖肽”(PSP)。1987年1月,PSP通過了科研成果鑒定,打破了日本Krestin的國際壟斷,填補了我國這類藥物的空白。直至1999年,PSP獲準進入《上海市公費、勞保醫療人員藥品報銷范圍》,PSP的新藥研制基本完成,歷時15個年頭。
2 云芝的栽培技術
由于地域及環境因素對野生云芝的生長和品質影響較大,且野生云芝的產量也難以滿足社會需求。加之云芝菌種的多樣性和云芝子實體的難辨性,也導致云芝品種混雜,從而影響質量。因此,現多采用人工栽培、培養的方法獲得云芝子實體、菌絲體。
2.1 人工栽培
2.1.1 栽培方法
云芝為營腐生生活。人工栽培時主要采用代料栽培、架構式栽培、畦床覆土式栽培。盡管方式方法各異,基本原理相同。
母種復壯: PDA斜面營養培養基對云芝母種進行活化、復蘇;
原、栽培種:把菌種常規法接種至經配制得到的原種、栽培種的培養瓶內。接種后在27 ℃左右的培養箱培養10天左右備用;
制袋接種:在無菌條件下,將培養瓶中的菌種轉至經高溫滅菌并冷卻后的菌袋中,移至培養室,并需要注意在接種1周后仔細檢查有無染菌菌袋,若有,須清除。接種兩周后,需將菌袋通氣,以助菌絲生長。
出芝:待菌袋表面長出菌蕾后將菌袋轉移到出芝場地,并控制出芝場的溫度、濕度、光照等環境條件;
采收加工:云芝成熟后,要及時徒手或用刀具在云芝子實體的幾部采摘,將其放在潔凈環境中晾干或者烘干。
2.1.2注意事項
云芝人工栽培法的注意事項主要有以下幾個方面:
溫度:菌袋發菌溫度控制在25-28 ℃為宜,不能超過35 ℃;云芝生長發育的環境溫度應在18-30 ℃;云芝子實體形成后的溫度應控制在14-26 ℃。在栽培過程中培養溫差不宜過大,溫度過高容易導致云芝死亡
水分:當云芝菌絲進入生長階段,其生長基質的水分應為60%-70%,生長環境的相對濕度則需在70%左右。當子實體進入生長發育后,其濕度需要控制在85-90%的范圍內,因為過高、過低都不利于子實體生長,且容易引起子實體死亡。
空氣:云芝具有好氣性,在菌絲體階段對氧氣的需求較小,但在子實體階段需要保證空氣流通、氧氣充足;
pH值:云芝生長的pH值是5.5±2,pH為6±0.5最適生長;
光照:在云芝菌絲生長階段無需光照,子實體時期需要3000 Lx以上強度的光照。
2.2菌絲培養
有試驗得出土豆粉、葡萄糖與花生粉餅、黃豆粉、蛋白胨是適宜的碳、氮源,Vitamin和鉀、磷等元素是營養成分。王曉然[2]采用人工栽培方法研究表明,液體發酵的最佳組合為pH4、溶氧20%、培養T=30 ℃、放罐時間72小時。同條件下,共進行3個批次試驗,試驗顯示:云芝菌絲體得率為21.94~24.066 g/L、云芝糖肽糖得率為1.82~2.16 g/L;51.4%左右的重均分子量≥40 kDa,符合國家標準。又有實驗者發現培養液酸堿度適宜為6、T=27.5±2.5 ℃、每分鐘135±15轉、接種量\搖瓶量=1:10。
3 云芝多糖的功效應用
(1)調節免疫功能 云芝多糖(簡稱PSK)具有明顯免疫增強作用,是一種免疫調節劑。其可通過對多種細胞因子誘生或促誘作用來增強免疫應答。有試驗證實其能增強巨噬細胞的活性而發揮調節免疫的作用[3]。
(2)抗癌 PSK可明顯抑 制癌細胞,且不損傷正常細胞。在預防和治療如肝、胃、食道、大腸、頭頸部癌變及乳腺、婦科等多種癌癥方面有明顯效果。因其還能夠降低放化療毒副反應,故可將其作為輔助藥品,用于治療癌癥。
有證實,其能抑制大鼠腳趾的畸形,小鼠纖維瘤的產生,控制大鼠的肝癌發生裸鼠鼻咽癌的生長,并對控制同基因B16細胞小鼠的腫瘤生長有劑量-效應關系。
(3)鎮痛 PSK在不同原因引起的急、慢性和體內、外疼痛上有減輕疼痛的作用。電刺激大鼠甩尾法實驗證實PSK有中樞性的鎮痛作用,另發現云芝糖肽可抑制藥物所致的小鼠痛覺過敏。
(4)保肝 有實驗發現云芝多糖能抑制四氯化碳引起的ALT升高,恢復肝組織內的AST水平。沈明等[4]實驗顯示其有益于結核患者因拮抗藥物而致的肝損害。
(5) 抗衰老 有研究者通過每日喂飼小鼠每千克體重0.1 g云芝多糖,發現其確實能延緩衰老;另有發現云芝多糖有近似VC的清除超氧陰離子自由基作用,能清除·OH、DPPH·。
(6) 其他 云芝多糖在水里的溶解性、抗熱穩定性等自然屬性,使得其可以被開發為治療艾滋病的藥物,并可增強放、化療病人的食欲助提升療效。
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4 結束語
真菌藥物是我國的寶貴資源,云芝作為最有藥用價值的真菌之一,有著較好的抗癌、抗衰老、增強免疫等功用,應得到更加廣發的關注和進一步全面而深入的研究。針對野生云芝生長周期長,其品質容易受到自然環境及種屬等因素影響的客觀問題,可以采用人工栽培及液體發酵培養等方式方法獲取云芝菌絲體,既可以確保云芝種屬,又能夠提高云芝產量。同時,可以積極對云芝進行栽培技術探索和工業發酵條件的優化,以提高糖肽產量和質量,從而更好地滿足社會需求。
參考文獻
[1]胡晶, 陸震鳴, 徐國華, 趙輝, 史勁松, 許正宏. 云芝發酵菌絲體的營養成分分析[J]. 食品工業, 2014, 35(11): 268-269
[2] 王曉然. 云芝糖肽高產菌株的選育及其發酵工藝研究[D]: [碩士學位論文]. 上海:上海師范大學, 2013
[3] Ishihara Y, Lijima H, Matsunagak N Conmbufion of eyto kines on the suppression of lung metastasis[J]. Biotherapy, 1998, 11: 267-275
[4] 沈明, 趙攀, 錢春芳. 云芝胞內糖肽治療抗結核藥物致肝損害的臨床觀察[J]. 臨床肺科雜志, 2012(10): 1912-1913