血清心型脂肪酸在急性缺血性腦血管病鑒別診斷中的應用

論著

血清心型脂肪酸在急性缺血性腦血管病鑒別診斷中的應用

朱曉娟張月娥趙炎李玉蘭張會娣張國華

作者單位： 071000河北省保定市第一中心醫院(朱曉娟、張月娥、趙炎、李玉蘭、張會娣)；河北醫科大學第二醫院(張國華)

E-mail:whxzlxw@163.com

【摘要】目的通過觀察H-FABP在急性腦梗死患者、短暫性腦缺血發作(TIA)患者和健康人群血清中血清心型脂肪酸結合蛋白(heart fatty acid binding protein，H-FABP)含量及區別表達，為臨床短暫性腦缺血發作和急性腦梗死的早期鑒別診斷做指導。方法隨機選取門診腦血管病住院患者130例，其中急性腦梗死(ACI)組80例，短暫腦缺血(TIA)組30例，正常對照組20例，所有實驗對象于發病3、12及24 h抽取靜脈血，健康組于門診3、12及24 h抽取靜脈血，使用ELISE法檢測血清中H-FADP的含量。結果在腦梗死后3 h血漿H-FABP濃度開始升高，急性腦梗死后12 h血漿H-FABP濃度達高峰，急性腦梗死后24 h血漿H-FABP濃度顯著降低，在3個時間點ACI組與TIA組之間比較差異有統計學意義(P<0.05)，正常對照組與ACI比較差異有統計學意義(P<0.05)，正常對照組與TIA組比較，差異無統計學意義(P>0.05)。梗死面積越大，其血清H-ABP濃度越高，且持續時間長。ACI組H-FABP的敏感性為66.2%(53/80),TIA組H-FABP的敏感性為6.7%,2組比較差異有統計學意義(P<0.01)。結論血清H-FABP可能成為早期評估TIA及急性腦梗死診斷及鑒別診斷的有效血清學標記物。

【關鍵詞】心型脂肪酸結合蛋白；急性腦梗死；短暫性腦缺血發作

doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2015.20.021

通訊作者:張月娥，071000河北省保定市第一中心醫院;

【中圖分類號】R 743

收稿日期：(2015-04-07)

短暫性腦缺血發作(transient ischemic attack,TIA)與急性腦梗死是臨床常見的急性缺血性腦血管病變。當腦組織缺乏充足的血液灌注,發生循環障礙，腦組織出現缺血、缺氧、壞死,血腦屏障被破壞，導致腦細胞內的一些生物化學因子及小分子蛋白外滲到體液及血液中，從而啟動一系列病理生理學機制加劇了疾病的發生發展過程。脂肪酸結合蛋白(FABP)存在于人體不同的組織和器官中,近年來,人們越來越多的關注和研究心型脂肪酸結合蛋白(H-FABP)在急性心肌梗死診斷中的應用[1,2]。許多研究發現在腦組織中H-FABP有一定數量的表達。細胞缺血缺氧損傷后能引起H-FABP的滲漏,使其血清的濃度顯著高于正常。本研究擬通過采用ELISA法對缺血性腦血管患者的血清中H-FABP的表達及含量進行檢測。使用統計學軟件對其在TIA和急性腦梗死患者血清中的濃度進行比較，從而在臨床上指導短暫性腦缺血發作和急性腦梗死的早期診斷。

1資料與方法

1.1一般資料選取2010年12月至2011年11月河北醫科大學第二醫院神經內科住院治療及門診就診的急性腦梗死、TIA患者以及健康查體者共130例，其中急性腦梗死為80例，TIA為30例,20例健康人作為正常對照組。40歲≤年齡<85歲。見表 1。

表1　一般資料

1.2納入標準(1)男性或女性，40歲≤年齡<85歲的急性缺血性腦卒中(發病≤3 h)及短暫性腦缺血發作(發病≤3 h)患者。(2)與1995年第四屆全國腦血管病學術會議制定的《腦血管病診斷標準》中的腦梗死診斷要點相符合，并且被頭顱CT、MRI檢查證實為腦梗死。(3)符合美國心臟學會(AHA)/美國腦卒中協會(ASA)2009年在新的指南中，對TIA的臨床定義。(4)正常對照組為同期來我院門診的健康體檢者20例。40歲≤年齡<85歲。

1.3排除標準(1)不符合以上入組標準組。(2)腦栓塞及血液系統、自身免疫性疾病導致的腦梗死患者。(3)重度炎性反應性疾病繼發感染，伴有其他主要器官功能衰竭的患者，接受類固醇激素、免疫抑制劑或其他抗炎癥性藥物治療的患者。(4)所有患者均排除腫瘤、肝臟病變，近期無重大外傷、手術史。

1.4方法所有試驗對象均進行頭顱CT及血管彩超，或頭MRI、MRA、DWI、血糖、血脂、CRP、心電圖等相關檢查。

1.4.1標本采集與處理：急性腦梗死組、TIA組分別于發病3、12、24 h采集肘靜脈血5 ml(正常對照組在門診同樣時間抽血)，分別留置于EDTA抗凝管中，混合10～20 min，于標本采集完成后30 min內在2～8℃的條件下離心15 min(2 500 r/min)，離心結束后抽取上清液，置于Ep管中。

1.4.2檢測方法:Elecsys2010全自動電化學發光分析儀(Roche公司)，人H-FABP檢測試劑盒(上海朗頓生物制劑有限公司)，采用雙抗體夾心酶聯免疫法，檢測時間90 min。具體操作步驟詳見說明。

2結果

2.13組血清中H-FABP濃度比較在腦梗死后3 h血漿H-FABP濃度開始升高，12 h達高峰，24 h有所降低：急性腦梗死組與TIA組之間比較，差異有統計學意義(P<0.05)；正常對照組與急性腦梗死組比較，差異有統計學意義(P<0.05)，而與TIA組比較差異無統計學意義(P>0.05)；本結果所選擇病例均排除了患者再次發生腦梗死。見表2。

表23組血清中H-FABP濃度比較

組別3h12h24hTIA組(n=30)3.25±1.194.88±1.241.35±0.79正常對照組(n=20)1.68±0.551.43±0.242.16±1.19急性腦梗死組(n=80)12.60±4.77*#14.47±4.34*#11.14±3.86*#

注：與TIA組比較，*P<0.05；與正常對照組比較，#P<0.05

2.2不同梗死灶大小、時間與H-FABP濃度在發病3 h、12 h、24 h時,梗死面積越大，其血清H-ABP濃度越高，且持續時間長；12 h時各梗死組血清H-FABP濃度顯著高于對照組(P<0.01)。見表3。

表3　不同梗死灶大小、時間與H-FABP濃度關系　 ±s

注：與正常對照組比較，*P<0.01

2.3TIA組與急性腦梗死組發病12小時H-FABP敏感性的檢測以正常對照組均值的95%可信區間確定為正常,高于其上限即為增高。H-FABP的濃度上限為2.5296 ng/ml,據此TIA組H-FABP的敏感性為6.7%，急性腦梗死組H-FABP的敏感性為66.2%(53/80)，2組H-FABP的敏感性比較差異有統計學意義(P<0.01)。

3討論

目前，缺血性腦血管病的診斷依賴于病史、體檢、頭顱CT、核磁共振成像。尤其是急性腦梗死治療有明顯的治療時間窗,故早期診斷(尤指發病后 6～8 h內)非常之重要。目前急性腦梗死的診斷主要依據神經系統查體及影像學檢查,但大多數患者的影像學改變出現較晚，甚至于病后10～ 24 h才能顯示病灶。因此，多年來許多學者一直致力于尋找高敏感性及強特異性的新型血清生化標志物。H-FABP作為可簡單快速測定的血清學指標，最初是由Ockner等學者在研究脂肪酸腸吸收時發現的，在體內的主要作用是通過與脂肪酸的結合，進而來調節脂肪酸在細胞內的代謝。H-FABP主要存在于心肌細胞的胞質中，為心肌的收縮來提供能量[3]。William等[4]研究，H-FABP在腦細胞受損后2～3 h內開始釋放入血,6～8 h 達高峰,24 h 降為正常。國外Wunderlich等[5]研究發現H-FABP的濃度在腦梗死早期也相應升高,并指出血漿H-FABP含量在腦缺血的早期評估,揭示其嚴重程度等方面具有重要的臨床實用價值,可作為急性腦梗死早期診斷生物學指標。在本實驗中，我們對TIA及腦梗死患者發病的3、12、24 h 3個時間段的血清H-FABP進行測定，發現它在發病后3 h內開始釋放入血,12 h達高峰,24 h 開始下降，與上述研究的實驗結果基本一致。因此，我們可以認為，H-FABP對于缺血性腦血管病早期診斷有特異性。

H-FABP在不同程度的腦梗死患者中，其濃度不同，梗死程度越重，其值越高[6]。孫楊等[7]選擇 65例 ACI患者,急性腦梗死組入院24 h、第 7天的血清 H-FABP均明顯高于對照組 (P<0.01);此時間點大梗死灶、中梗死灶、小梗死灶3組間的血清 H-FABP差異有統計學意義(P均<0.01)。結果顯示腦梗死病灶大小與血清 H -FABP水平有密切關系,且與CI程度和預后有關。出血早期血清H-ABP水平越低其神經功能恢復越好，臨床預后越好。本試驗中，我們發現，在發病3 h、12 h、24 h時,梗死面積越大，其血清H-ABP濃度越高，在發病12 h的大梗死灶，其血漿H-FABP濃度為(18.45±4.41)，且持續時間長；且12 h時各梗死組血清H-FABP濃度顯著高于對照組(P<0.01)，與上述研究結果近似，可能與大面積梗死時的細胞損傷數量有關，故我們推測其可以作為腦梗死早期判斷腦損傷面積較為合適的、且價值的檢測指標。

目前，血清S-100β蛋白用來作為判斷急梗死神經功能缺損程度的有效血清學指標[8]，而Pelsers等[9]在研究微小的腦損傷時，通過實驗得出H-FABP和B-FABP比目前使用的腦損傷標志物S100蛋白B(S100B) 具有更高的敏感性。國內張黎軍等[10]研究對100例急性腦梗死患者在發病后1 d、7 d、14 d，進行血清B-FABP動態檢測,發現在病程早期均有不同程度增高,尤以發病后24 h內增高最明顯(P<0.01)，其中早期異常靈敏性達68%。在本試驗中，我們對80例腦梗死患者血清H-FABP濃度檢測，其24 h時的敏感性達到了66.2%，結果與之前試驗研究近似，微差別可能是由于取樣時間差異所致。本結果推測血漿H-FABP含量在腦缺血的早期評估,在腦梗死早期診斷中有重要意義，可作為急性腦梗死早期診斷的生物學指標，同時，還可用來鑒別診斷腦梗死與TIA。

雖然，在本試驗中，我們檢測到H-FABP是靈敏性較高的缺血測定指標，在腦梗死早期即可測定，可作為腦梗死的早期診斷，并推測其可有效改善患者預后、減少病死率和致殘率，其敏感性、特異性均明顯優于影像學。但由于H-FABP其在人體組織中分布較為廣泛，如當腦梗死患者同時合并心臟疾病時，其敏感性及特異性均較差，所以，在作為評價H-FABP的臨床應用價值時，我們不僅考慮它的來源和釋放時間，還要考慮患者在合并心臟及腎臟等其他疾病時，綜合考慮患者的一般情況后，對疾病作出診斷及鑒別診斷。

參考文獻

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3董瑨堃,孟舒.血清H-FABP濃度心肌型脂肪酸結合蛋白——組織損傷的新型標志物.醫學綜述,2012,18:659-662.

4William W,Mei-Chiun T.PhD Blood Biomarkers in the Diagnosis of Ischemic Stroke.Stroke,2008,39:2902-2909.

5Wunderlich MT,Hanhoff T,Goertler M,et al.Releaseof brain-type andheart-typefattyacid-bindingproteins inserumafteracuteis-chaemic stroke.J Neurol,2005,252:718-724.

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7孫楊,孔岳南.心型脂肪酸結合蛋白在急性腦梗死早期診斷中的臨床價值.山東醫藥,2010,50:63-64.

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9Pelsers MM,Hanhoff T,Vander Voort D,et al.Brain-and heart-type fatty acid-binding proteins inthebrain:tissue distributionand clinical utility.Clin Chem,2004,50:1568-1575.

10張黎軍,邱晨紅,王鋒,等.腦型脂肪酸結合蛋白在急性腦梗死檢測方面的臨床意義.卒中與神經疾病,2011,18:215-218.