陜北地區丙型肝炎病毒基因型對抗病毒治療的影響 *

陜北地區丙型肝炎病毒基因型對抗病毒治療的影響*

劉娜徐光華吳殿磊李春霞尚丹鶴武瓊

(延安大學附屬醫院感染病科， 陜西 延安716000)

【摘要】目的了解陜北地區丙型肝炎病毒(HCV)基因型流行狀況，探討HCV基因型對抗病毒治療的影響。方法對丙型肝炎患者的血清進行HCV RNA定量及基因型檢測, 采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)方法結合Taqman技術；對聚乙二醇化干擾素α 2a (PEG-IFN α-2a)與干擾素α-2b治療24周結束時, 取得病毒學應答(RVR)的丙型肝炎患者進行24周隨訪觀察。結果在85例HCV RNA陽性的患者中，基因1型30例(35.3%)，實現RVR的患者有25例(83.3%)，復發有7例(23.3%)；非1型55例(64.7%)，其中全部實現RVR，復發有4例(7.3%)。結論病毒基因型與丙型肝炎干擾素治療后的病毒復發有顯著相關性。

【關鍵詞】丙肝病毒； HCV RNA； 基因型； 應答指導治療

【中圖分類號】R 512.6`+3

【文獻標志碼】A

doi：10.3969/j.issn.1672-3511.2015.10.021

Abstract【】ObjectiveTo understand hepatitis C virus (HCV) genotype in Northern Shanxi prevalence and explore the effect of HCV genotype to antiviral therapy.Methods HCV RNA quantitative and genotypes of patients with hepatitis C were detected with real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (FQ-PCR) method based on Taqman Technology. The patients were treated with pegylated interferon a 2a (PEG-IFN a-2a)and interferon a-2b for 24 weeks. The patients with virological response were followed-up for 24 weeks.ResultsOf 85 cases with positive HCV RNA, there were 30 cases with 1 genetype (35.3%), 25 cases (83.3%) of them with RVR and 7 cases (23.3%) with recurrence. There were 55 cases (64.7%) with 1 non type, all of them with RVR and 4 cases (7.3%) with recurrence.ConclusionsThere is correlation between hepatitis C virus genotype and viral relapse after interferon treatment.

基金項目：延安大學研究生創新基金(11YJ08)

收稿日期：( 2014-05-07； 編輯： 陳舟貴)

Effect of genetype of hepatitis C virus on treatment in Northern Shanxi areaLIU Na，XU Guanghua，WU Dianlei，etal

(TheAffiliatedHospitalofYan’anUniversity，Yan’an716000，Shanxi,China)

【Key words】Hepatitis C virus； HCV RNA； Genotype； RGT

丙型肝炎病毒(HCV)感染后約20%的患者發展為急性肝炎，而近80%的患者慢性化，其中約30%的患者在感染后的20～30年可進展為肝硬化甚至肝癌。抗病毒治療是控制疾病進展的關鍵環節。但由于HCV基因的高度變異,導致了變異病毒之間不同的生物學特性,包括病毒的復制能力和致病能力。本研究通過對經過抗病毒治療的85例丙型肝炎患者進行追蹤研究， 旨在探討丙型肝炎患者經干擾素治療后影響療效的相關因素。

1資料與方法

1.1病例選擇及治療85份血清標本獲自2010年07月～2011年12月來我院感染科就診的丙肝患者。診斷符合2004年我國《丙型肝炎防治指南》的標準,年齡20～71歲；HCV RNA>100IU/ml；ALT<10倍正常值；除外其他肝臟疾病(所有標本抗HAV IgM抗體、HBV M、抗HDV、抗HEV抗體均陰性)。隨機分為聚乙二醇化干擾素α-2a (PEG-IFNa-2a, 上海羅氏制藥有限公司產品)治療組31例和普通IFNa-2b(天津華立達生物公司產品)治療組54例。PEG-IFN a-2a組患者每周1次皮下注射135～180μg;IFN-a-2b組患者，每周注射3次, 每次3～5MU。所有患者均聯合利巴韋林治療，按體重0.8～1.2g/d 兩組患者均治療48周, 隨訪24周。

1.2檢測指標與方法各型病毒性肝炎血清學標志/抗體用ELISA方法檢測,試劑由上海科華生物工程股份有限公司提供。HCV RNA定量及基因型檢測儀器為美國PE公司Gene AmP7500定量檢測系統,試劑由上海之江生物科技股份有限公司提供的熒光定量HCV-PCR檢測試劑盒,具體按說明書進行。治療1月、3月、6月、1年后停藥半年進行血清學標本采集。快速病毒學應答(rapid virological response,RVR)為治療4周時血清HCV RNA檢測<最低檢測限，或定量檢測降低2個log以上。復發(Relapse)為治療結束時HCV RNA轉陰，但是停藥后HCV RNA定量出現陽轉。

1.3統計學分析采用SPSS 17.0統計軟件進行不同組之間觀察指標的χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1HCV感染者感染方式分布狀況陜北地區HCV感染者在輸血傳播、吸毒、其它所占的比例為45.9%(39/85)、42.4%(36/85)、11.8%(10/85)。

2.2HCV感染者病毒基因型分布及不同基因RVR發生和復發率85例HCV RNA陽性的丙肝患者中，1型30例占35.3%，非1型為55例占64.7%。基因非1型患者的RVR率(100.0%)明顯高于1型(83.3%), 差異有統計學意義 (χ2=9.74，P=0.004)。基因1型患者的復發率(23.3%)明顯高于非1型(7.3%), 差異有統計學意義 (χ2=4.44，P=0.046)，見表1。

表185例HCV基因型的分布及不同基因RVR發生和復發率[n(×10-2)]

Table 1　RVR and recurrence of different genotype

3討論

我國2004年制定的《丙型肝炎防治指南》中在HCV感染后有50%～85%發展為慢性丙型肝炎[1]。有報道，HCV感染后20年有10%～15%發展為肝硬化；HCV相關的肝細胞癌(Hepatoceallualar carcinoma，HCC)的發生率在感染30年后為1%～3%[2]。另外，由于HCV 的基因變異性較大，體內產生的中和抗體難以應付不斷出現的大量新病毒，所以丙型肝炎的預防尚無疫苗可用。目前能夠有效控制HCV感染的病程進展及提高患者的生存質量,最有效的措施是實施抗病毒治療方案-干擾素(IFN) 與利巴韋林(RBV)聯合應用,其治療的目標是獲得持續病毒學應答率(sustained virological response,SVR)。因此，積極加強對HCV基因型的研究，不斷提高治愈率，才能延緩及減少肝硬化和肝癌的發生。

輸血曾是丙肝的主要傳播途徑，輸血后肝炎70%以上是丙型肝炎。隨著篩查方法的改善，我國從1993年開始對獻血者做抗-HCV檢測，使輸血相關性HCV的感染率明顯降低。我國部分地區輸血傳播HCV的殘余風險為1/6萬～1/4萬[3,4]。但隨著吸毒人數的增多, 靜脈注射毒品逐漸成為H CV傳播的主要途徑。靜脈吸毒者往往共用注射器, 從而導致各種經血液傳播病毒在吸毒者之間傳播, 容易產生HCV、HBV和HIV的共同感染。據報道，靜脈吸毒>5年者中,50%～90%的人感染了HCV, 從而更增加了新靜脈吸毒者的感染幾率[5]。本研究42.4%的丙肝患者就由吸毒感染所致，可見遠離毒品是降低丙肝發病率的重要方式。雖然大部分學者認為HCV可以通過性接觸傳播, 提示人類的體液及分泌物可以排泄HCV，因為在一些患者的體液, 如唾液、精液中能夠檢測HCV RNA, 如職業暴露(像針刺傷)、紋身、穿耳、皮膚劃痕等, 也有潛在傳播HCV的可能醫源性傳播，本研究中11.8%的患者感染HCV可能與此有關。

HCV基因組呈現高度異質性,根據HCV基因組核苷酸序列的差異程度,可將HCV分為6種基因型和多種亞型[6]。基因型的分布存在地區差異，其中，基因1型呈全球性分布，占HCV感染的70%以上。在我國主要為1b和2a，其中以1b型為主，2a型次之。本研究結果顯示，1型30例占35.3%，非1型為55例占64.7%。由于HCV基因的高度變異,導致了變異病毒之間存在不同的生物學特性,包括病毒的復制能力和致病能力。本研究發現，基因型1型患者的復發率(23.3%)明顯高于非1型(7.3%), 差異有統計學意義。表明I型患者的成功治愈率低于非I型，提示HCV基因型是影響IFN治療后病毒復發的重要因素。陜北地區以非I型為主，提示陜北地區丙型肝炎患者易取得較好的抗病毒治療效果。基因1型患者對IFN的高復發率原因尚不清楚,可能的原因是與1b型HCV的糖蛋白高變區異質性程度及病毒復制能力較強有關。故有報道基因型是治療應答最重要的基線預測因子[7],基因2、3型的持續應答率較基因1、4型高, 基因2、3型者療程24周的持續應答率與療程48周相當, 而基因1、4型則必須使用48周, 否則過早停藥導致復發率增高[8,9]。“IL-28B基因型”是更重要、更獨立的SVR預測因素。在健康人群的隨機抽樣調查表明,rs-12979860 CC基因型在亞洲人種很最普遍,此基因型的高表達率與以往報道的亞洲人種抗HCV的高應答率似乎是一致的[10]。

慢性丙型肝炎病情隱匿, HCV感染是導致肝硬化及肝細胞癌等終末期肝病的主要病因之一, 抗病毒治療能延緩病情進展。但由于HCV基因組的高度變異性及普通干擾素血清濃度波動大, 使丙型肝炎抗病毒治療過程中病毒反彈, 或治療結束后出現復發。本研究有HCV 1型的患者7例出現復發，故應采用足量、長療程應用干擾素及利巴韋林進行抗病毒治療可能會提高SVR率, 以達到提高丙型肝炎治療療效、降低復發率的目的。

根據患者治療過程中病毒學應答情況來預測患者的療效并相應調整治療方案(應答指導治療),已成為抗病毒治療的研究熱點。目前對SVR 預測價值最高的病毒學應答預測指標為RVR，其預測意義不受患者HCV基因型影響,在獲得RVR的患者中,有89%基因1型患者、70%～95%基因2/3型患者與86%基因4型患者達到SVR[11]。本研究發現，基因型為非1型患者的RVR率(100.0%)明顯高于1型(83.3%),且差異有統計學意義，與以往報道一致，可見RVR不僅可指導RGT通過個體化治療,提高SVR率,更重要的意義在于能預測復發率。

4結論

病毒基因型與丙型肝炎干擾素治療后的病毒復發呈顯著相關，是指導治療的重要依據；對不同基因型的患者采取分層管理，對提高丙型肝炎治療療效、降低復發率具有重要的臨床意義。

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