新生兒產ESBLs肺炎克雷伯菌檢測方法研究

摘要：目的 對比新生兒室產ESBLs肺炎克雷伯菌檢測方法，了解新生兒肺炎克雷伯菌的醫院感染狀況及耐藥狀況，為臨床醫學提供依據。方法 采用回顧性的方法，對新生兒產ESBLs肺炎克雷伯菌檢測方法進行研究。結果 新生兒產ESBLs肺炎克雷伯菌感染在新生兒病房感染性疾病中占很高的比例。早產兒，低體質量兒，器械通氣為新生兒感染的易患因素。結論 肺炎克雷伯菌特別是ESBLs菌株，已成為新生兒室病房感染的主要病原菌，及時準確的檢測方法尤為重要。

關鍵詞：新生兒 ESBLs；檢測方法；分析

肺炎克雷伯菌特別是ESBLs菌株，已成為新生兒病房感染的主要病原菌，其比例增高以及耐藥性增強應引起高度重視。該菌的耐藥性不斷增加，對大多數青霉素、頭孢菌素類抗生素耐藥。由于新生兒特別是早產兒、極低體質量兒的免疫功能低下及侵入性操作的不斷開展，新生兒很容易感染該菌。給臨床抗感染治療造成極大困難，導致病程延長和死亡率升高。所以快速檢測該菌并能給臨床提供準確的藥敏結果已迫在眉睫。利用紙片法和儀器法結合，使檢測該菌的時間縮短8h，準確率提高至98%。預防和減少了產ESBLs肺炎克雷伯菌醫院感染的發生，為搶救患者贏得了寶貴時間。

痰培養用一次性吸痰管吸取，大部分標本取自器械通氣患兒管插管導管內。血標本取自嚴格消毒皮膚的股靜脈，穿刺入80ml血液需氧瓶中。咽拭子、分泌物標本用生理鹽水棉拭子取樣。呼吸道標本接種血平板、巧克力平板、沙保弱瓊脂平板、中國藍瓊脂平板，血標本置ESP血培養儀中進行連續培養和檢測，報陽性后，接種血平板。其余分泌物接種血平板、巧克力平板、沙保弱瓊脂平板、中國藍瓊脂平板。37℃孵育18～24h，該菌在血平板、中國藍平板上生長良好，在沙保弱平板上不生長，挑取菌落革蘭氏染色，顯微鏡下觀察為革蘭陰性桿菌，挑取菌落于營養瓊脂平板劃線，貼藥敏紙片頭孢他碇、頭孢他碇/克拉維酸復合試劑、頭孢噻肟/拉維酸復合試劑，37℃孵育，兩者中任一抗生素在加克拉維酸后抑菌圈擴大5mm以上時，即判定ESBL陽性。挑取菌落，用TDR-300C全自動細菌鑒定儀及配套的GNI卡進行鑒定。見表1、表2。

目前，臨床上大范圍應用第3代頭孢菌素，導致產ESBLs肺炎克雷伯菌檢出率逐年升高。臨床研究指出，產ESBLs肺炎克雷伯菌對臨床上常用的青霉素類、氨曲南以及頭孢均素類抗生素均有較高耐藥性。分析原因主要與產ESBLs株不僅攜帶ESBLs質粒，也攜帶氨基糖甙類、耐喹諾酮類等多種耐藥基因[2]，因此產ESBLs肺炎克雷伯菌會出現多重耐藥表現。本組資料顯示，對環丙沙星的耐藥率為0，這可能與此類藥物在新生兒病房很少應用有關。這一現象也證明了廣譜抗生素高頻用于治療感染會對致病菌產生選擇壓力，并導致其耐藥性增加。

參考文獻：

[1]黃彬，陳茶， 湯曉麗， 等. 肺炎克雷伯菌對喹諾酮類及氨基糖苷類耐藥基因檢測及耐藥機制分析[J]. 中華醫院感染學雜志， 2011， 21（1）：5-7.

[2]吳愛武.臨床微生物學和微生物檢驗[M].第3版.人民衛生出版社，2012.

[3]劉衛國. 肺炎克雷伯菌臨床分布及耐藥性分析[J]. 實用中醫藥雜志， 2011， 27（3）：192-193.

[4]劉運德，主編. 微生物學檢驗[M]. 人民衛生出版社，2003.

編輯/哈濤