ELISA法檢測梅毒假陽性結果分析

摘要：目的 對梅毒酶聯免疫吸附測定（TP-EIISA）法假陽性結果進行分析。方法 采用TP-ELISA法對2924例標本進行梅毒特異性抗體檢測。陽性標本分為吸光度/臨界值比值低值組（1～2）和S/CO（>2）高值組；同時所有標本用TPPA法復檢，對結果進行對比分析。結果 TP-ELISA法與TPPA法2種方法梅毒抗體檢測結果無顯著差別，但S/CO低值組與高值組結果比較差異有統計學意義（P<0.05）。結論 TP-ELISA檢測梅毒特異抗體可行；但對于S/CO低值標本應加用TPPA方法以排除假陽性。

關鍵詞：梅毒；假陽性；分析

梅毒的血清學檢測是診斷梅毒的重要依據之一，它在梅毒的診斷、治療及研究方面均有重要意義[1]。目前檢測梅毒螺旋體感染的血清學方法主要是酶聯免疫吸附實驗（ELISA），但常常遇到出現假陽性。梅毒螺旋體明膠凝集試驗（treponema pallidum particle assay，TPPA）特異性好、靈敏度高，是日前公認的梅毒血清確證試驗[2]。本研究通過以TPPA法與EIISA結果對比，試圖對ELISA檢測假陽性結果進行分析。

1資料與方法

1.1一般資料 2012年1月～2014年12月在兵團第七師人民醫院住院做輸血前篩查的患者血清標本2924例，其中男1778例，女1146例，年齡17～75歲。均采用常規靜脈采血。

1.2 儀器和試劑 TP-ELISA試劑由珠海麗珠試劑有限公司提供，TPPA試劑為日本富士株式會社產品。酶標儀，Anthos 2010型（奧地利生產）。洗板機，Anthos fluido 24200型（奧地利生產）。試劑檢測臨界值（cutoff）為0.20+陰性對照平均吸光度值，使用Wellscan MK3酶標儀讀取吸光度值，以吸光度/臨界值比值[吸光度/臨界值（absorbance of sample/cut-off rate，S/CO）]為判定標準，S/CO≥1為陽性，S/C0<1為陰性。每例標本用2種試劑同時檢測，兩法按說明書操作。

1.3 統計學處理 應用SPSS 17.0軟件包進行統計學分析。

2 結果

以TP-EIISA與TPPA檢測2924例標本結果對比，相對于TPPA，TP-ELISA的靈敏度達100%（109/109），特異度達99.9%（2812/2815），差異無統計學意義（P>0.05），見表1。112例ELISA陽性標本中，按S/CO分成S/CO低值組（1～2）和高值組（>2）兩組。其中S/C0低值組38例，S/CO高值組74例，兩法差異有統計學意義（P<0.05），見表2。

3討論

血清學檢測一直是梅毒診斷的主要方法，目前常用的酶聯免疫吸附試驗和梅毒螺旋體抗體明膠凝集試驗具有高敏感性的特點。但是在臨床工作中，經常遇見假陰性與假陽性，需要仔細分析研究。造成檢驗結果出現假陽性或假陰性的原因是多方面的，包括實驗室操作、試劑、檢驗方法等。為提高檢驗結果的真實性和可靠性，需要患者、臨床醫生、實驗室醫生甚至患者家屬的密切配合。

實驗室對梅毒螺旋體特異性抗體檢測最常用的檢測方法是TP-ELISA和TPPA（或梅毒螺旋體血細胞凝集試驗TPHA）。TPPA（或TPHA）已被美國疾病控制中心（CDC）定為確診方法，而TP-ELISA對IgM和IgG都具有很好的檢測能力，并且具有靈敏度高、價格低、結果客觀的優點，易于自動化操作已被廣泛使用[3]。酶聯免疫吸附法（ELISA）對IgG、IgM都有很好的檢測能力，因其靈敏度高、價格低廉、操作方便、結果客觀在國內廣泛使用。梅毒抗體假陽性的主要原因有：①生物學假陽性反應。由非密螺旋體疾病的病原體和其它致病因素所引起的反應素反應。如急性傳染病中的瘧疾、巨細胞病毒性肺炎。慢性傳染病中的已型肝炎、麻風或免疫系統疾病中的系統性紅斑狼瘡等。②標本因素：血液標本溶血、離心處理不徹底、細菌污染引起的假陽性[4]。鑒于篩檢試驗對靈敏度的要求高于特異度的特點，TP-ElISA法替代TPPA法作為日常梅毒抗體篩選是可行的[5]。

本文通過2924例梅毒抗體檢測結果分析還表明，158例TP-ELISA陽性標本經過TPPA復檢有3例呈陰性，且均出現在S/CO低值組。證實在在此組標本中2種方法檢測結果差異有統計學意義。因此我們認為：為提高梅毒檢測的準確性，在做梅毒抗體檢測時，可以先用TP-ELISA法，若為陽性再用TP-PA法確認，這樣既減少了醫療支出，又減少了因假陽性帶來的隱患，避免不必要的醫療糾紛。

綜上所述，為提高實驗室檢驗結果的準確性，我們應該加強以下方面的工作：①作為實驗室的工作人員應嚴格檢查試劑、儀器等確保能夠掌握能夠正常工作，杜絕認為操作因素導致的檢驗結果的錯誤。②強烈呼吁臨床醫生在對患者進行相關實驗室檢查前，對患者進行詳細的檢查及相關病史及服藥情況的詢問。③呼吁患者要嚴格遵醫囑，比如：檢查前空腹、停藥等。只有三方共同努力，密切配合，才能降低實驗室檢查結果的假陽性與假陰性率。才能為臨床診斷的可靠依據。

參考文獻：

[1]龍振華.梅毒血清學與臨床[J].中華內科雜志，1994，42（7）：438-439.

[2]孔麗蕊.3種梅毒血清學檢測方法的評價[J].檢驗醫學與臨床，2008，5（18）：1119-1120.

[3]黃冬梅，鄒雪松，楊慧敏，等.血清梅毒螺旋體抗體酶聯免疫吸附試驗假陽性結果分析[J].中國綜合臨床，2013，29（13）：37-38

現代實用醫學雜志，2006，18（2）：127-128.

[4]邰平，王進江.ELISA法檢測梅毒抗體假陽性原因分析及其對策[J].江蘇預防醫學，2010，3（21）：56-57.

[5]王露楠，鄧巍.李金明.梅毒螺旋體感染不同血清學診斷方法的臨床評價[J].中華檢驗醫學雜志，2002，25（6）：353.

編輯/王海靜