液基薄層細胞制片技術在胸腹水標本中的有效運用

摘要：目的 分析和探討液基薄層細胞制片技術在胸腹水標本中的有效運用。方法 收集我院病理科2010年10月～2014年5月的胸腹水標本380例，然后分別采取傳統涂片技術和液基薄層細胞制片技術對胸腹水標本進行細胞學檢查，最后對檢查的結果進行對比和分析。結果 傳統涂片技術的腫瘤細胞檢出率為11.32%；液基薄層細胞制片技術腫瘤細胞檢出率為22.63%，而且差異均有統計學意義（P<0.05）。結論 液基薄層細胞制片技術腫瘤細胞檢出率比較高，可以進行臨床推廣應用。

關鍵詞：液基薄層細胞制片技術；胸腹水標本；運用 胸腹水脫落細胞學檢查由于對患者損傷較小，操作方法簡單，檢查周期較短，已成為診斷腫瘤的重要方法[1]。由于多種因素的影響，傳統的涂片技術的腫瘤細胞檢出率并不是很高，因此使很多疾病不能得到及時有效的治療。隨著細胞學技術的不斷進步，液基薄層細胞制片技術作為一種新的細胞學檢查方式克服了傳統涂片技術的缺點，逐漸成為細胞學病理技術的研究熱點。本次研究選擇我院2010年10月～2014年5月的胸腹水標本380例，然后分別采取傳統涂片技術和液基薄層細胞制片技術對胸腹水標本進行細胞學檢查，并對最終的結果進行回顧性比較分析，現總結報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料 選擇我院2010年10月～2014年5月的胸腹水標本380例，其中胸水275例，腹水105例，分別采取傳統涂片技術和液基薄層細胞制片技術對胸腹水標本進行細胞學檢查。其中，男210例，女170例，年齡為22～89歲。

1.2方法

1.2.1傳統涂片技術 取新鮮胸腹水置于2個10 mL 離心管內，每管8 mL，2000 r/min，離心10～15 min，棄上清液，然后把沉淀物仔細涂抹在涂片上（血性標本取紅細胞沉淀與上清液之間的細胞層），通常涂片的數量以3張為宜，接下來使用濃度為95%的乙醇對涂片進行固定，大約10 min以后再進行巴氏染色，中性樹膠對涂片進行封固，最后將處理好的涂片送至顯微鏡下進行觀察。

1.2.2液基薄層細胞制片技術 取新鮮胸腹水置于2個10 mL 離心管內，每管8 mL，2000 r/min，離心10～15 min，棄去上清液，保留管底有用細胞，再加入大約細胞團體積3倍的細胞基液。在漩渦混勻器上混勻10 s后，用移液器吸取15 ml在脫脂載玻片上涂片，涂片面積直徑為1.5 cm。涂片干燥后用95% 乙醇固定30 min，巴氏染色，中性樹膠封固，最后將處理好的涂片送至顯微鏡下進行觀察。

1.3診斷方法 采取傳統涂片技術和液基薄層細胞制片技術對胸腹水標本進行細胞學檢查以后，由同一組細胞學專家來進行閱片，對涂片的細胞進行相應的分級和分型。本次實驗研究采用3級診斷法，將實驗的結果分為陽性、陰性和可疑。檢出率=陽性的例數/總例數×100%。

1.4統計學分析 采用SPSS 13.0統計學軟件，計數資料采用χ2檢驗，差異有統計學意義（P<0.05）。

2結果

傳統涂片技術的腫瘤細胞檢出率為11.32%；液基薄層細胞制片技術腫瘤細胞檢出率為22.63%，因此液基薄層細胞制片技術腫瘤細胞檢出率比傳統涂片技術的腫瘤細胞檢出率高，且差異均有統計學意義（P<0.05），見表1。

3討論

液基薄層細胞制片技術通過薄層細胞處理來對細胞進行保存，這種技術的操作過程比較簡單，同時它在細胞標本的采集和制片方面也比傳統涂片技術有了明顯的進步[2]。某腫瘤患者的細胞傳統涂片和液基薄層細胞制片，見圖1、圖2。一般情況下，外傷和腫瘤等都會引起胸腹腔出現積液，而胸腹水是很好的培養基，即使將胸腹水抽出體外以后，仍然能夠在較長的時間內保持細胞的原有形態。為了保持細胞的原有形態，胸腹水應當及時送檢并進行制片，假如胸腹水不能及時送檢和制片，可以采用低溫保持和加入適量酒精的方法來保持細胞的原有形態，使胸腹水細胞的質量能夠滿足診斷的要求。巴氏染色是一種符合細胞學質控要求的染色方法，它最大的優點是能夠對細胞核的結構進行精確清晰的顯示[3]。

圖1 某腫瘤患者的細胞傳統涂片 圖2 某腫瘤患者的液基薄層細胞制片

肺癌、乳腺癌、淋巴瘤和胃腸道腫瘤等是胸腹水中最為常見的幾種轉移癌類型[4]。在進行胸腹水細胞的制片過程中，深紅色和暗紅色的樣本對制片的最終效果有更加明顯的影響，且此類樣本用于制片中的量以16～30 ml為宜[5]。一般情況下，中間層為腫瘤細胞的聚集區域[6]。所以胸腹水細胞的制片過程的最關鍵的步驟在于中間層細胞的提取，此時必須把握好離心力，高速離心能夠使樣本中的細胞達到良好的分層效果。在實際的操作過程中，胸腹水液基細胞學診斷有三個要素，①在形態學上盡量對良惡性進行區分，②與病史密切結合，③利用IHC對細胞塊進行輔助診斷。大量的研究應用證實，液基薄層細胞制片技術可以有效避免涂片的厚薄不均現象，并且能夠及時清除雜質的干擾，提高涂片的質量，保證了樣本細胞的完整性，液基薄層細胞制片技術增強了診斷時細胞結構的辨識度。因此，液基薄層細胞制片技術可以大大提高腫瘤的確診率，使遺漏率降低。

本次實驗研究的結果表明，傳統涂片技術的腫瘤細胞檢出率為11.32%；液基薄層細胞制片技術腫瘤細胞檢出率為22.63%，因此液基薄層細胞制片技術腫瘤細胞檢出率比傳統涂片技術的腫瘤細胞檢出率高，且差異均有統計學意義（P<0.05）。

綜上所述，液基薄層細胞制片技術腫瘤細胞檢出率比較高，可以進行臨床推廣應用。

參考文獻：

[1]任宏，紀濱英，郭玉珍，等.液基薄層細胞制片技術在腦脊液檢查中的臨床應用[J].中國醫藥指南，2013，35（4）：75-76.

[2]李崢嶸，李沛隆.液基薄層細胞制片技術在胸腹水標本中的應用價值[J].河南醫學研究，2014，03（3）：85-87.

[3]孫雁，金壽同，陳淑云.膜式液基薄層細胞制作技術[J].工企醫刊，2012，04（5）：54.

[4]王守梅，楊秋紅，魏靜靜，等.比較胸腹水液基細胞學剩余標本制作細胞塊的3種方法[J].第二軍醫大學學報，2013，02（4）：160-163.

[5]馬博文，楊凡.液基薄層細胞制片技術在非婦科標本中的應用[J].診斷病理學雜志，2010，01（3）：63-66.

[6]江濤，馬世婧，張程，等.一種適用于胸腹水細胞診斷的液基薄層制片技術[J].臨床與實驗病理學雜志，2012，11（2）：1292-1293.

編輯/張燕