結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)在肺結(jié)核、肺外結(jié)核及潛伏性結(jié)核感染中輔助診斷的臨床運(yùn)用

摘要：目的 分析結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)結(jié)核感染中輔助診斷的臨床意義。方法 分析比較結(jié)核感染T細(xì)胞和傳統(tǒng)的細(xì)菌學(xué)檢測(cè)方法在輔助診斷結(jié)核病方面的效果和檢測(cè)時(shí)間。結(jié)果 結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)在檢測(cè)結(jié)核分歧桿菌感染方面具有較高的靈敏性和特異性，能夠在短時(shí)間內(nèi)幫助快速診斷結(jié)核病，在預(yù)防、控制和輔助診斷結(jié)核病方面具有重要意義。

關(guān)鍵詞：結(jié)核病；T細(xì)胞檢測(cè)；輔助診斷

結(jié)核病是一種感染率較高的慢性傳染性疾病，其病原體能夠在人體內(nèi)持久存在，具有感染人數(shù)多、潛伏感染人數(shù)多、患病人數(shù)多、死亡人數(shù)多和新發(fā)患者多的特點(diǎn)。臨床上最常使用的結(jié)核病檢測(cè)手段為結(jié)核抗體檢測(cè)、痰標(biāo)本涂片的抗酸染色、傳統(tǒng)L-J羅氏培養(yǎng)、BD-960結(jié)核菌快速培養(yǎng)等，和傳統(tǒng)的細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)方法相比，結(jié)核抗體檢測(cè)靈敏度和特異性都較低，痰標(biāo)本涂片的陽(yáng)性率較低，BD-960檢測(cè)時(shí)間縮短了，但陽(yáng)性檢出率仍然較低。本研究主要通過(guò)和傳統(tǒng)的檢測(cè)方法相比較來(lái)分析結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)結(jié)核感染中輔助診斷的臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2013年1月～2014年6月在我院接受治療的結(jié)核病患者360例作為研究對(duì)象，所有患者經(jīng)影像學(xué)診斷均被確診為結(jié)核病。將所有患者隨機(jī)分為痰涂片組（A組）、MGIT液體培養(yǎng)基快速培養(yǎng)組（B組）、L-J羅氏培養(yǎng)組（C組）和T細(xì)胞檢測(cè)組（D組），每組90例。其中住院病例158例，門(mén)診病歷102例；男260例，女100例，年齡8～83歲，平均（51.3±8.2）歲。四組患者兩兩比較，在性別、年齡等方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法 采集所有患者的痰標(biāo)本：患者晨起后漱口，于無(wú)菌痰盒中咳出深部位痰。血樣采集：抽取患者的外周靜脈血，其中2歲以下兒童采集2ml靜脈血，2～9歲兒童為4ml，10歲以上兒童為8ml，成人8ml，將采集到的靜脈血放入含有肝素抗凝劑的采血管中。四組患者分別采用不同的方法進(jìn)行檢測(cè)。A組：痰標(biāo)本抗酸染色法，其中染色液試劑盒來(lái)自于臺(tái)灣貝索生物技術(shù)有限公司；B組：MGIT液體培養(yǎng)基快速培養(yǎng)，MGIT液體培養(yǎng)基來(lái)自于美國(guó)BD公司；C組：L-J羅氏培養(yǎng)（慢培），L-J固體培養(yǎng)基來(lái)自于臺(tái)灣貝索生物技術(shù)有限公司；D組：結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)，試劑盒（免疫斑點(diǎn)法）來(lái)自于上海復(fù)興長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司。記錄比較四組檢測(cè)方法的陽(yáng)性檢出率和檢測(cè)時(shí)間。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 對(duì)記錄所得數(shù)據(jù)使用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料使用（x±s）表示，組間比較進(jìn)行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料使用百分率表示，組間比較進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

四組檢測(cè)法的陽(yáng)性檢出率和檢測(cè)時(shí)間比較具體見(jiàn)表1。

D組的陽(yáng)性檢出率顯著高于A組（P<0.05），檢測(cè)時(shí)間無(wú)顯著差異（P>0.05）；D組的陽(yáng)性檢出率顯著高于B組（P<0.05），檢測(cè)時(shí)間顯著短于B組（P<0.05）；D組的陽(yáng)性檢出率顯著高于C組（P<0.05），檢測(cè)時(shí)間顯著短于C組（P<0.05），提示結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)在陽(yáng)性檢測(cè)率和檢測(cè)時(shí)間的優(yōu)勢(shì)要顯著大于痰涂片法、快速培養(yǎng)和慢速培養(yǎng)法。

3 討論

結(jié)核病是一種由結(jié)核桿菌引起的慢性傳染病，結(jié)核桿菌會(huì)侵入人體的各種器官，但最為常見(jiàn)的是肺臟，即肺結(jié)核。若結(jié)核菌通過(guò)呼吸系統(tǒng)感染使人患肺結(jié)核，或通過(guò)肺部病變通過(guò)血液或淋巴系統(tǒng)傳播到其他臟器發(fā)生肺部以外各部位的結(jié)核病即為肺外結(jié)核[1]。結(jié)核病多發(fā)生于15～35歲的青年人，其發(fā)病率隨著環(huán)境污染和艾滋病傳播愈發(fā)強(qiáng)烈，死亡率也逐年升高。因此對(duì)于結(jié)核感染患者及早進(jìn)行治療則能顯著改善患者預(yù)后，預(yù)防結(jié)核病的傳染，但臨床上對(duì)于診斷早期結(jié)核仍存在一定的困難[2]。目前，結(jié)核病的臨床前診斷的金標(biāo)準(zhǔn)為結(jié)核菌培養(yǎng)，接測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性則表示結(jié)核感染，但未必患病；Ian測(cè)結(jié)果呈陰性則提示無(wú)結(jié)核菌感染，但仍不能完全排除。此外，結(jié)核菌素檢測(cè)缺乏敏感性，在一些較為基層的醫(yī)療機(jī)構(gòu)很難進(jìn)行結(jié)核菌素檢測(cè)，因此在診斷菌因肺結(jié)核、兒童結(jié)合、肺外結(jié)核、無(wú)痰患者時(shí)仍然比較困難，而且肺結(jié)核病的臨床表現(xiàn)復(fù)雜、多變，很容易造成誤診和漏診。因此，建立新的、快速的、準(zhǔn)確的、敏感的檢測(cè)手段則十分必要[3]。

結(jié)合桿菌侵害人體后，人體內(nèi)會(huì)分泌具有特異效應(yīng)的T淋巴細(xì)胞，當(dāng)T淋巴細(xì)胞在體外再次受到結(jié)核桿菌抗原的刺激時(shí)，人體會(huì)分泌釋放IFN-γ，通過(guò)對(duì)IFN-γ進(jìn)行檢測(cè)或者對(duì)分泌IFN-γ的外周血PBMC進(jìn)行計(jì)數(shù)，我們可以了解機(jī)體在感染結(jié)核分歧桿菌后的免疫應(yīng)答狀態(tài)，從而判斷出機(jī)體是否受到結(jié)核分歧桿菌的潛伏感染，從而作為一種輔助手段對(duì)結(jié)核感染進(jìn)行診斷[4]。結(jié)核感染T淋巴細(xì)胞檢測(cè)則是通過(guò)酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)，利用結(jié)核特異性抗原，對(duì)受試者進(jìn)行檢測(cè)，以確定受試者體內(nèi)是否有結(jié)核效應(yīng)的T淋巴細(xì)胞存在，從而對(duì)受試者是否感染結(jié)核桿菌進(jìn)行判斷[5]。

本研究結(jié)果顯示，D組的陽(yáng)性檢出率顯著高于A組（P<0.05），檢測(cè)時(shí)間無(wú)顯著差異（P>0.05）；D組的陽(yáng)性檢出率顯著高于B組（P<0.05），檢測(cè)時(shí)間顯著短于B組（P<0.05）；D組的陽(yáng)性檢出率顯著高于C組（P<0.05），檢測(cè)時(shí)間顯著短于C組（P<0.05），提示結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)在陽(yáng)性檢測(cè)率和檢測(cè)時(shí)間的優(yōu)勢(shì)要顯著大于痰涂片法、快速培養(yǎng)和慢速培養(yǎng)法。此外，該種方法所獲得的檢測(cè)樣本具有靈活性，對(duì)患者造成的創(chuàng)傷小，而且還能對(duì)腦脊液、胸水、腹水、外周血、心包積液等樣本進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)核感染T淋巴細(xì)胞檢測(cè)聯(lián)合影像學(xué)檢查可以對(duì)結(jié)核病進(jìn)行診斷[6]。在診斷兒童結(jié)核病時(shí)，若患者干咳且無(wú)痰，使用其他的方法幾乎無(wú)法檢測(cè)出來(lái)，但結(jié)核感染T淋巴細(xì)胞檢測(cè)能夠進(jìn)行輔助診斷；當(dāng)患者患有活動(dòng)性結(jié)核病且臨床已經(jīng)痊愈，使用改種方法則可以有效控制結(jié)核病的復(fù)發(fā)[7]。

綜上所述，結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)在檢測(cè)結(jié)核分歧桿菌感染方面具有較高的靈敏性和特異性，能夠在短時(shí)間內(nèi)幫助快速診斷結(jié)核病，在預(yù)防、控制和輔助診斷結(jié)核病方面具有重要意義，值得臨床推廣使用。

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編輯/哈濤