杜仲葉醇提物對去卵巢大鼠所致骨質疏松的防治作用

杜仲葉醇提物對去卵巢大鼠所致骨質疏松的防治作用

陳立強趙文杰1王振齊亞靈陳玉強楊宇劉振玉

(佳木斯大學，黑龍江佳木斯154007)

摘要〔〕目的觀察杜仲葉醇提物對去卵巢大鼠骨質疏松(OP)模型的影響，探究杜仲防治OP的作用機制。方法選取10月齡SD雌性大鼠，制作去卵巢大鼠OP模型，分為假手術組、模型組、阿爾法骨化醇(ALF)組、杜仲葉醇組，并觀察各組股骨重量、脛骨抗彎力、血清堿性磷酸酶(ALP)的變化。結果與模型組比較，杜仲葉醇組股骨重量明顯增加，脛骨抗彎力增強，ALP含量增高(P<0.05)；與ALF組無明顯差異(P>0.05)。結論杜仲葉醇提物通過提高血清ALP含量，增加股骨重量，提高脛骨抗彎力等因素防治OP。

關鍵詞〔〕杜仲；去卵巢；骨質疏松；血清堿性磷酸酶

中圖分類號〔〕R683.42〔文獻標識碼〕A〔

基金項目：黑龍江省衛生廳科研項目(2011-425)；佳木斯大學科研項目(S2010-43)；佳木斯大學研究生科技創新項目(LZZ2014_003)

通訊作者：齊亞靈(1967-)，女，醫學博士，教授，博士生導師，主要從事中藥抗衰老研究。

1黑龍江省農墾二院

第一作者：陳立強(1979-)，男，實驗師，在讀碩士，主要從事中藥抗衰老研究。

骨質疏松(OP)是一種全身性骨骼疾病；以骨的組織結構出現退化、骨的重量減輕、骨的脆性增加、易發生骨折為特征；其治療難度大、發病率高〔1〕。機體生理性、退行性的變化導致的OP的發病率隨年齡的增長而增加。本研究觀察杜仲葉醇提物對去卵巢OP大鼠股骨重量、脛骨抗彎力、血清堿性磷酸酶(ALP)的影響。

1材料與方法

1.1實驗動物及主要試劑10月齡SD雌性大鼠(哈爾濱醫科大學實驗動物中心提供)48只，體重(269.2±18.7)g，自由攝食、飲水。阿爾法骨化醇(ALF)(上海寶曼生物科技有限公司)，杜仲葉(佳木斯市寶泰醫藥公司)，血清ALP檢測試劑盒(艾美捷科技有限公司)。

1.2實驗分組與動物模型〔2〕建立將大鼠隨機分成4組，每組12只，即假手術組、模型組、ALF組和杜仲葉醇提物組。成功制作去卵巢大鼠所致OP模型，去卵巢大鼠骨量丟失，出現明顯的OP特征，模型穩定，可靠〔3〕。水合氯醛(0.3 ml/kg)腹腔注射，麻醉后，無菌環境下打開腹腔，模型組、ALF組及杜仲葉醇組摘除雙側卵巢，假手術組不摘卵巢。關閉腹腔并逐層縫合。青霉素(2萬U/只)肌注。

1.3給藥方法術后10 d，ALF組：ALF(0.75 μg/10只)灌胃；杜仲葉醇組：杜仲葉醇提物6 g/kg灌胃。假手術和模型組給予等量蒸餾水灌胃。1次/d，持續90 d。治療結束后頸椎脫臼處死，心臟穿刺抽取0.5~1 ml血液，凝固后10 000 r/min取血清，4℃保存。取股骨、脛骨，剔除骨表面軟組織，稱重。

1.4脛骨抗彎力測定將大鼠脛骨置推拉力計模具上，自中點處下壓，記錄脛骨斷裂時壓力。

1.5ALP活力測定按照試劑盒說明。

1.6統計學方法應用SPSS17.0統計軟件進行單因素方差分析，LSD(L)檢驗。

2結果

2.1各組體重及股骨重量術后各組體重較術前明顯增加，與假手術組比較，模型組體重增加尤為顯著(P<0.01)，股骨重量明顯降低(P<0.01)；與模型組比較，ALF和杜仲葉醇組體重增加不顯著，股骨重量有所增高(P<0.05)，見表1。

2.2各組股骨抗彎力檢測結果與假手術組比較，模型組抗彎力降低(P<0.05)，ALF組和杜仲葉醇組抗彎力上升(P<0.05)；與模型組比較，ALF和杜仲葉醇組脛骨抗彎曲力顯著提高(P<0.01)。ALF組和杜仲葉醇組差異不顯著，見表2。

2.3各組ALP檢測結果與假手術組比較，模型組血清ALP含量明顯降低，ALF與杜仲葉醇組明顯增高(P<0.05)，但ALF組和杜仲葉醇組差異不顯著。

表1　各組體重與股骨重

與假手術組比較:1)P<0.05，2)P<0.01；與模型組比較:3)P<0.05

表2　各組脛骨抗彎力及血清ALP值

與模型組比較:1)P<0.05，2)P<0.01；與假手術組比較:3)P<0.05

3討論

隨增齡，人體的組織、器官發生退化而導致的OP包括老年性OP和婦女絕經后OP，前者主要與衰老有關，后者主要與雌激素不足有關〔2〕。由于杜仲富含酚酸、木脂素和黃酮類等化學物質，杜仲葉醇提物具有類似性激素作用。本研究說明去卵巢后OP大鼠的骨量逐漸減少，骨強度下降；應用ALF和杜仲葉醇提取物治療后，可以通過改善骨的質量，有效防治因雌激素降低而導致的骨質丟失，進而改善OP癥狀。

ALP由成骨細胞產生，當骨受到損傷時，成骨細胞活動增強，致使細胞內的ALP 釋放進入血液中，引起血清 ALP 活性增高〔3~6〕。本文結果表明，杜仲葉醇提物防治OP，與提高去卵巢大鼠ALP含量，促進成骨細胞功能活動有關。

綜上，杜仲葉醇提物通過提高血清ALP含量，增加股骨重量，提高脛骨抗彎力進而改善骨的質量等因素防治OP，其作用機制有待進一步研究。

4參考文獻

1Hubacek JA，Weichetova M，Bohuslavova R，etal.Genetic polymorphisms of TGF-β，PAI-1，and COL1A-1，and determination of bone mineral density in Caucasian females〔J〕.Endoc Regul,2006；40(1)：77-81.

2田茂友，李洪洋.去卵巢大鼠骨質疏松模型研究〔J〕.現代預防醫學，2007；34(12)：2239-41.

3劉曉青，崔燎，吳鐵，等.人參防治去卵巢大鼠骨丟失生化指標的觀察〔J〕.中國老年學雜志，2005；25(3)：299-301.

4陳鄒陽.聯合檢測骨折患者血漿堿性磷酸酶與纖維蛋白原的意義〔J〕.國際檢驗醫學雜志，2012；12(33)：2922-3.

5董華，胡乃武，董清平.骨痛仙膠囊對家兔骨折血清堿性磷酸酶、鈣、磷影響的實驗研究〔J〕.中醫藥學報，2003；31(2)：51-2.

6李建明，張英.血清堿性磷酸酶與骨折愈合的相關性分析〔J〕.新疆醫學，2014；44(1)：8-10.

〔2013-12-19修回〕

(編輯苑云杰)