NOS及NO在分泌性中耳炎引起的感音神經性聾中的作用

NOS及NO在分泌性中耳炎引起的感音神經性聾中的作用

廣州醫科大學附屬深圳沙井醫院耳鼻咽喉科深圳518104

【摘要】目的研究NO及NOS在分泌性中耳炎導致的感音神經性聾中所起的作用或影響。方法選取58例分泌性中耳炎患者，其中29例為單純性分泌性中耳炎患者(A組)，29例為分泌性中耳炎所致的感音神經性聾患者(B組)，分別抽取A、B 2組的中耳積液，試劑盒檢測NO的含量及NOS的活性，探討NO及NOS在分泌性中耳炎導致感音神經性聾中所起的作用。結果A組中耳積液中NO含量為(138.71±40.98)μmol/L，NOS的活性為(74.28±27.00)U，B組耳積液中NO含量為(176.18±42.68)μmol/L，NOS的活性為(98.78±30.02)U，B組NO含量大于A組，差異有統計學意義(P<0.01)；NOS活性比較，B組>A組,差異有統計學意義(P<0.05)；結論NO及NOS在分泌性中耳炎引起的感音神經性聾中發揮著重要作用，可能參與感音神經性聾的炎癥病理發病過程。

【關鍵詞】NO； NOS；中耳炎；感音神經性聾

通訊作者張文淵李遠航姜翠菊殷亞磊蔡永明()

【中圖分類號】R764.43+1

本文就中耳炎引起的感音神經性聾患者耳積液中NOS及NO的含量或活性，探討NOS及NO在分泌性中耳炎引起的感音神經性聾中的作用。

1資料與方法

1.1一般資料選取2014-01—2015-01來我院就診的單純性分泌性中耳炎患者29例為A組，分泌性中耳炎伴隨感音神經性聾的患者29例為B組。A組男21例，女8例；年齡22～46歲，平均36.5歲；平均發病時間12 d；病程≤4周。B組男15例，女14例；年齡21～44歲，平均34.5歲；平均發病時間為11.4 d，病程≤4周； 2組一般資料差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2感音測試2組病患均為單耳，純音聽力測試結果為0.24～7.9 kHz；A組連續頻率鼓導聽閥<30 dB，鼓導平均聽閥<25 dB。B組5例連續頻率鼓導聽閥≥30 dB，鼓導平均聽閥≥25dB，2組鼓室導抗圖均為B型，同側鐙骨肌反射未引出，中耳積液提取量>0.15 mL。2組均無家族性耳聾史，均無服用耳毒性藥物史以及其他遺傳耳病史，無可能導致咽鼓管長期阻塞(如鼻息肉、腺體肥大等)的慢性病史，來院診斷前2個月未使用激素類免疫抑制藥物。

1.3治療方法實驗前均考察A、B 2組病例的病史及用藥情況，并進行純音測試，結果無特殊性后，方可抽取各組病患中耳積液，鼓膜穿刺抽取積液時，向鼓室注射潑尼松龍，并口服抗生素、糖皮質激素等進行治療。

1.41NO含量及NOS活性的測定2組病患均以抽取中耳積液，試劑盒檢測的方法測定NO含量及NOS活性。具體程序為對外耳酒精消毒后，對鼓膜用適量濃度的丁卡因進行表面麻醉，采用1 mL的醫用注射器連接接7號長針頭刺入鼓膜，緩慢抽取中耳積液，體積>0.15 mL，收集積液后密封保存于-20℃備用。檢測方法為用試劑盒檢測NOS的活性，用硝酸還原法測定NO代謝產物含量，最后計算積液中NO含量。

2結果

2.12組治療結果比較見表1。

表1　2組治療前后氣骨導平均聽閾變化比較　

注：與治療前相比，P<0.01

2.22組耳積液NO含量及NOS活性檢測結果比較通過用硝酸還原法測定NO代謝產物NO2-或NO3-的含量計算積液中NO含量，發現B組病例耳積液中NO的含量為(176.18±42.68)μmol/L，A組為(138.71±40.98)μmol/L，與A組比較，B組明顯高于A組，差異有統計學意義(P<0.01)。試劑盒檢測2組病例耳積液中NOS活性，結果發現B組耳積液中NOS的活性為(98.78±30.02)U，A組為(74.28±27.00)U，與A組比較，B組耳積液中NOS活性明顯高于A組，差異有統計學意義(P<0.05)。

3討論

分泌性中耳炎所致的感音神經性聾中，炎性介質在致病過程中起重要作用，但影響機制尚未確定。目前，關于分泌性中耳炎所致的感音神經性聾的發病機制有多種假設，包括病毒及細菌感染、NO機制、除NO外的細胞因子因素以及缺氧因素等。

NO由氧氣、氨基酸、NADPH以及其他輔助因子在不同NO合酶催化下進行生化合成，NO合酶有幾種亞型，包括eNOS、nNOS和iNOS，與eNOS、nNOS被激活的方式不同，iNOS的產生是由多種細胞因子(如TNF-α)進行誘導后由血管內皮產生，當炎癥刺激時，血管內皮釋放大量NO，NO本無毒性，但在與白細胞代謝產物結合時能生成NO2，N2O3等氧化物，這些氧化物有較強的細胞毒性。John等[1]發現，在黏液分泌性中耳炎患者以及化膿性中耳炎患者的中耳積液中NO及NO代謝物的含量有很大差別，黏液分泌性中耳炎患者中耳積液中NO及NO代謝物的含量要明顯高于化膿性中耳炎患者，說明NO參與了分泌性中耳炎的發病機制。此外，研究顯示[2]，伴有感音神經性聾的中耳炎患者與不伴有感音神經性聾的中耳炎患者相比，前者中耳積液中NO及NO合酶的含量遠遠高于后者，說明NO極有可能通過與其他炎性介質共同參與炎癥的局部反應。Yilmazl等[3]通過測定分泌性中耳炎模型豚鼠和對照組豚鼠血紅細胞內的 NO含量及NO合酶活性，結果顯示在模型組中兩種物質的含量均比對照組高，表明NO對細胞及組織具有較強的損傷作用。關于NO的釋放機制，目前尚無明確的結論支持，但有研究發現[4]，IL-1β和TNF-α等細胞因子能刺激分泌性中耳炎患者積液表達iNOS，而大量研究[5-6]也表明許多高表達的細胞因子在分泌性中耳炎患者中耳積液中被檢測到。Kim等[7]研究發現，NOS的活性能顯著影響中耳積液的分泌量，以上研究表明當NOS活性增強時，能促進NO的大量釋放，導致炎性反應增強，患者聽力下降。Popa等[8]曾將內毒素注入小鼠耳內，并發現NO能使耳蝸損傷，還發現使用NO抑制劑能緩解耳蝸損傷程度，這一現象表明NO參與了耳蝸損害的發病機制。此外內耳自身產生的參與炎性反應的細胞因子也是內耳損傷的重要因素[9]，如TNF-α等[10]。

本文結果發現，伴有感音神經性聾的分泌性中耳炎患者中耳積液中NO含量較單純性分泌性中耳炎高，NOS活性也較單純性分泌性中耳炎高，表明NO含量及NOS活性能參與分泌性中耳炎及分泌性中耳炎導致的感音神經性聾的發病機制。通過抑制NOS的活性以及NO的含量，能降低炎癥反應程度，減緩細胞或組織損傷，對治療分泌性中耳炎所致的感音神經性聾提供了一個治療方向，值得推廣及重視。

參考文獻4

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[8]Yamasoba T,Sugasawa M,Kikuchi S,et al.An elec-trocochleographic study of acute low-tone sensorineural hearing loss.Eur Arch Otorhinolaryngol,1993,250:418-422.

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[10]Yilmaz1 A,Uslu C,Akyuz M,et al.Nitric oxide synthase activity and nitric oxide level in erythrocytes of guinea pigs with experimental otitis media with effusion[J].Cell Biochem Funct,2006,24(5):471-473.

(收稿2014-12-01)