某豬場3種重大疫病的抗體檢測分析

張振東，王紅巖，呂 林，胡東方，王 林，王愛國，劉思當

（1.山東農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，山東 泰安，271000；2.勃林格殷格翰(中國)動物保健，北京 100004）

某豬場3種重大疫病的抗體檢測分析

張振東1，王紅巖2，呂 林1，胡東方1，王 林2，王愛國2，劉思當*

（1.山東農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，山東 泰安，271000；2.勃林格殷格翰(中國)動物保健，北京 100004）

為評估某豬場豬瘟、藍耳病及偽狂犬病三大疫病的免疫狀況及感染狀態(tài)，及時發(fā)現(xiàn)潛在風險，為重大疫病的預警防控提供理論依據(jù)，應用中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所豬瘟病毒抗體間接ELISA檢測試劑盒、IDEXX與法國LSI藍耳病抗體檢測試劑盒以及SVANOVIR偽狂犬野毒抗體檢測試劑盒，對采自某豬場各階段豬只的50份血清進行了抗體檢測。結果顯示，該豬場豬瘟、藍耳病、偽狂犬gE抗體總體陽性率分別為92.0%、38.0%(IDEXX)、90.0%(LSI)和42.0%；豬瘟抗體陽性率很高但整體抗體滴度較低且離散度較大，免疫效果一般；2種藍耳病抗體檢測試劑盒的檢測結果在一定程度上具有一致性，指示生長育肥豬藍耳病病毒的感染壓力較大；種豬群偽狂犬gE抗體的陽性率偏高，說明該場偽狂犬野毒感染情況嚴重。通過對抗體的監(jiān)測及其結果的科學分析，能夠及時發(fā)現(xiàn)豬場存在的問題，以便針對性地采取防控措施，指導養(yǎng)豬生產(chǎn)。

抗體檢測；免疫程序；豬病防控

養(yǎng)豬是高風險的行業(yè)，產(chǎn)能嚴重過剩，疾病防控難度以及食品質量安全壓力日益增大，疫病因素成為制約產(chǎn)業(yè)發(fā)展的瓶頸。近段時間以來豬場許多疾病尤其是豬瘟、藍耳病、偽狂犬病等重大疫病進入發(fā)病活躍期，主要表現(xiàn)母豬的繁殖障礙綜合征、保育后期豬只的呼吸道疾病綜合征、新生仔豬神經(jīng)癥狀以及流行性腹瀉。通過抗體檢測，了解豬場免疫水平或感染狀態(tài)，及時發(fā)現(xiàn)疫病風險，為重大疫病的預警、防控提供理論依據(jù)，更好地指導養(yǎng)豬生產(chǎn)，把豬養(yǎng)好，在低迷的行情中保證豬場的健康平穩(wěn)持續(xù)發(fā)展。

1??材料與方法

1.1??材料

1.1.1??樣品信息該豬場為山東某規(guī)模化豬場，存欄經(jīng)產(chǎn)母豬856頭，2014年4月2日采集血樣50份進行送檢，樣品信息情況見表1。

1.1.2??主要試劑及儀器中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所豬瘟病毒（CSFV）間接ELISA抗體檢測試劑盒、IDEXX與法國LSI藍耳病病毒(PRRSV)抗體檢測試劑盒以及SVANOVIR豬偽狂犬病毒gE(PRVgE)抗體檢測試劑盒，Eppendorf移液器、酶標儀。

1.2??方法

1.2.1??檢測方法嚴格按照相應試劑盒的說明書進行抗體檢測。

1.2.2??結果判定1）CSFV：IE值≥10.0%為陽性，阻斷率≤8.0%為陰性，兩者之間為可疑；2）PRRSV(IDEXX)：S/P值≥0.4為陽性，S/P值＜0.4為 陰 性；3）PRRSV(LSI)：IRPC＞20.0為陽性，IRPC≤20.0為陰性；4）PRVgE（SVANOVIR）：ODp＞60.0%為陰性，ODp≤50.0%為陽性，之間為可疑。

2??結果與分析

2.1??抗體檢測結果匯總

經(jīng)檢測，豬瘟、藍耳病、偽狂犬gE抗體總體陽性率分別為92.0%、38.0%(IDEXX)、90.0%(LSI)和42.0%。匯總結果見表1。

2.2??豬瘟抗體檢測結果及分析

中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所豬瘟病毒抗體間接ELISA檢測試劑盒檢測對象為豬瘟病毒E2蛋白多克隆抗體，能精確反映血清中的抗體水平，并可對不同抗體水平的血清進行區(qū)分。該場種豬群豬瘟抗體陽性率為100.0%，商品豬為88.0%，總體陽性率為92.0%，符合我國農(nóng)業(yè)部動物疾病強制免疫計劃70.0%的合格率，但是豬群的整體抗體高度較低且各階段豬只離散度較大（17.5%～70.3%），說明豬群豬瘟的整體免疫效果一般。核心種母豬群各胎次段豬瘟抗體離散度在17.5%～70.3%之間，后備母豬與3～4胎母豬抗體水平相對均勻，但3～4胎母豬IE值相對偏低；結合該場仔豬豬瘟疫苗的免疫程序（30日齡首免，60日齡二免）可知，3～10周齡的變化曲線屬于正常現(xiàn)象；12～14和18～20周齡豬瘟抗體變化曲線降低可能與藍耳病病毒感染引起的免疫抑制有關（根據(jù)本次檢測結果），當然也不能排除其他因素的影響。檢測結果及變化情況見表3、圖1。

表1??樣品信息匯總

表2?抗體檢測結果匯總表

2.3??藍耳病抗體檢測結果及分析

IDEXX藍耳病抗體檢測試劑盒以藍耳病病毒的核衣殼蛋白（N蛋白）為包被抗原，N蛋白不能誘導機體產(chǎn)生對抗病毒的中和抗體，不適用于對疫苗免疫效果的監(jiān)測，但是能夠在一定程度上判斷豬只藍耳病病毒的免疫或感染狀態(tài)，且因其保守性好、敏感性高、結果重復性好，而被廣泛應用；法國LSI藍耳病抗體檢測試劑盒以膜蛋白為包被抗原，該蛋白參與中和抗體的產(chǎn)生，因此既可以檢測野毒感染狀況又可以反映疫苗抗體情況。該場未進行藍耳病疫苗的免疫，因此，通過本次抗體檢測可知：

圖1 豬瘟抗體檢測情況

IDEXX：母豬群1～8胎的抗體陽性率僅為26.7%（4/15）且S/P值并不高，說明母豬群整體可能處于無藍耳病病毒感染壓力或趨于藍耳病凈化狀況；母豬群中低胎次經(jīng)產(chǎn)母豬尤其是1～2胎及后備母豬的抗體陽性率高且S/P值偏高，說明母豬群有藍耳病病毒的感染且該病毒可能處于活躍狀態(tài)，生產(chǎn)中應注意加強對即將進入基礎群的后備豬進行隔離和馴化，以免因后備豬尤其是外來后備豬的并群而引起母豬群藍耳病的活躍甚至暴發(fā)；公豬群整體陽性率為28.6%（2/7），基本無藍耳病感染壓力，但1頭祖代公豬的S/P值較高，可考慮將其淘汰；保育仔豬3～10周齡藍耳病抗體S/P值幾乎都為陰性，說明仔豬在保育后期之前沒有藍耳病野毒循環(huán)感染，也可知N蛋白抗體維持時間較短，從藍耳病角度來看，豬群處于高度健康狀況；生長育肥階段豬只藍耳病抗體較高，說明藍耳病感染壓力較大，可能引起一定程度的或嚴重的呼吸道癥狀和繼發(fā)感染；仔豬下床后藍耳病抗體急速上升，說明仔豬下床前后是藍耳病循環(huán)感染時期且感染壓力較大。

LSI：藍耳病抗體整體陽性率為90.0%，核心種豬群均為100.0%，說明本場通過自然的馴化和感染，種豬群豬只均產(chǎn)生了藍耳病病毒的中和抗體，具備了一定的抵抗力；3～4、5～7與8～10周齡豬只陽性率分別為100.0%、80.0%和40.0%，說明中和抗體維持時間較N蛋白長、母源抗體逐漸下降，變化曲線屬于正常現(xiàn)象；12～14與18～20周齡豬只抗體反而又突然上升，說明在保育后期階段存在藍耳病野毒的感染。2種檢測試劑盒具有一致性。檢測結果及變化圖表見表4、圖2、圖3。

2.4???豬偽狂犬病病毒gE抗體檢測結果及分析

經(jīng)SVANOVIR豬偽狂犬病病毒gE(PRVgE)抗體檢測試劑盒檢測，公豬、母豬及商品豬抗體陽性率分別為 71.4%（5/7）、50.0%（9/18） 和28.0%（7/25），公豬及母豬群野毒抗體陽性率高，說明曾經(jīng)或最近感染過偽狂犬病野毒；3～7周齡陽性率為70%、8～20周齡陽性率為0，從生豬gE值變化曲線一直處于上升可知，整個生長期間（初生--出欄）沒有感染偽狂犬病野毒，而仔豬3～7周齡gE值處于陽性階段是母源抗體所為，不是偽狂犬病野毒感染造成的，8周之后豬只gE抗體全為陰性，也說明偽狂犬病母源抗體可能僅維持7周左右。檢測結果及變化見表5、圖4。

2.5???檢測結果分析總結及處理意見

通過本次抗體檢測以及檢測結果數(shù)據(jù)的統(tǒng)計整理分析，發(fā)現(xiàn)該豬場存在以下4個問題：第一，種豬群偽狂犬病野毒感染嚴重（56.0%），仔豬母源抗體維持時間短；第二，保育后期豬只藍耳病感染壓力較大，在一定程度上可能隨時出現(xiàn)所謂“高熱病”的風險；第三，低胎次尤其是1胎及后備母豬藍耳病抗體S/P值偏高，可能存在藍耳病帶毒或處于感染狀態(tài)；第四，豬瘟抗體滴度整體偏低且離散度較大，豬瘟疫苗免疫效果一般。

表3??豬瘟抗體檢測結果

表4??藍耳病抗體檢測結果?

圖2 藍耳病抗體檢測情況（IDEXX）

圖3 藍耳病抗體檢測情況（LSI）

表5?偽狂犬gE抗體檢測結果??

圖4 偽狂犬gE抗體檢測情況

針對所發(fā)現(xiàn)的問題，建議采取下列措施：第一，暫停偽狂犬病gE抗體陽性種公豬精液的使用，特別加強做好種豬群偽狂犬病疫苗的免疫工作，通過疫苗的逐漸馴化，達到“陽轉陰”的目的；第二，建議商品豬在45日齡左右二免偽狂犬病疫苗，降低7周齡后無母源抗體保護情況下中大豬發(fā)生偽狂犬病的機率；第三，加強留種或引種時的帶毒檢測并做好相關疫病抗體的監(jiān)測工作，并在后備豬進入基礎母豬群前對其進行科學的隔離和馴化；第四，從預防角度建議考慮藍耳病疫苗的免疫，可在7～14日齡免疫藍耳病疫苗，并在呼吸系統(tǒng)疾病高發(fā)的保育期加強飼養(yǎng)管理和進行適當?shù)乃幬镱A防；第五，重視豬瘟疫苗的免疫工作，避免因疫苗運輸、稀釋、不及時使用以及免疫不當而導致免疫失敗的低級錯誤；第六，保證豬場的全進全出，做好豬場的生物安全防護。

3??結語

在豬場疾病防控風險逐漸增大的時代，豬場常見疫病的抗體檢測并不只是集團化規(guī)模豬場的“特權”，中小規(guī)模場尤其是重大疫病不穩(wěn)定的豬場更應該重視豬場疫病的檢查和監(jiān)測，設計科學合理的、能夠反映豬群實際狀況的采血方案，采血后進行重大疫病抗體的檢測并對結果進行科學的分析，以便及時發(fā)現(xiàn)并科學處理豬群中潛在的疫病風險，提高豬群的健康狀況，將豬病尤其是重大疫病扼殺在搖籃之中，使豬場健康可持續(xù)發(fā)展。

2014-04-23）

張振東,男，山東濰坊青州人，在讀碩士研究生，執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師，研究方向為動物臨床病理學。通訊作者:劉思當，教授.E-mail:liusid@sdau.edu.cn