Ki-67在癌前病變及胃腺癌中的表達及意義

·論著·

院副主任醫師，醫學學士，從事臨床病理學研究。

Ki-67在癌前病變及胃腺癌中的表達及意義

賈振軍1，李其海2，曲勇2，周平3，韓紅梅4，周祖平5

(1.山東鋁業公司醫院病理科，山東 淄博 255069；2.山東鋁業公司醫院內科，山東 淄博 255069；3.山東省淄博市第一醫院病理科，山東 淄博 255200；4.山東省淄博市中心醫院病理科，山東 淄博 255000；5.淄博礦業集團中心醫院病理科，山東 淄博 255120)

[摘要]目的分析Ki-67在胃癌前病變及胃腺癌中的表達，探討Ki-67與胃腺癌發生、胃腺癌分化程度和浸潤深度的關系。方法采用SP免疫組織化學方法,對102例慢性胃炎、158例胃黏膜異型增生和130例胃腺癌患者進行Ki-67檢測，分析其相關關系和臨床病理意義。結果Ki-67在胃炎、低級別異型增生、高級別異型增生及胃腺癌中陽性表達率明顯遞增，且隨著病變加重，強陽性表達顯著增多(P<0.05)。130例胃腺癌組織高中分化腺癌Ki-67陽性表達率低于低分化腺癌(P<0.01)。未侵及全層者Ki-67陽性表達率低于侵及全層或突破漿膜者(P<0.01)。結論Ki-67在胃腺癌的發生中發揮重要作用，胃腺癌Ki-67表達與腫瘤分化程度和浸潤深度有關。

[關鍵詞]胃腫瘤；胃炎；Ki-67抗原；免疫組織化學doi:10.3969/j.issn.1007-3205.2015.08.014

[收稿日期]2015-02-06；[修回日期]2015-03-06

[基金項目]山東鋁業公司2014年科技計劃項目(SLYF 2014-3)

[作者簡介]賈振軍(1967-)，男，山東淄博人，山東鋁業公司醫

[中圖分類號]R735.2[文獻標志碼]A

Expression and significance of Ki-67 in precancerous lesion and gastric adenocarcinoma

JIA Zhen-jun1，LI Qi-hai2，QU Yong2,ZHOU Ping3,HAN Hong-mei4,ZHOU Zu-ping5

(1.Department of Pathology，the Hospital of Shandong Aluminum Industry Company,Zibo 255069,China;

2.Department of Internal Medicine,the Hospital of Shandong Aluminum Industry Company,Zibo

255069,China;3.Department of Pathology,the First Hospital of Zibo City，Shandong Province,

Zibo 255200,China;4.Department of Pathology,Central Hospital of Zibo City，

Shandong Province,Zibo 255000,China; 5.Department of Pathology,

Central Hospital of Zibo Mining Group,Zibo 255120,China)

Abstract[] ObjectiveTo analyze the expression of Ki-67 in precancerous lesion and gastric adenocarcinoma and to investigate the relationship between Ki-67 expression and gastric adenocarcinoma,tumor differentiation and invasion depth.MethodsSP immunohistochemical method was applied to detect the expression of Ki-67 in chronic gastritis(102 cases),gastric dysplasia(158 cases) and gastric adenocarcinoma(130 cases) and to analyze its relationship and clinical pathological significance.ResultsImmunohistochemical results showed that the rates of positive expression of Ki-67 in chronic gastritis,gastric low grade dysplasia,high grade dysplasia and gastric adenocarcinomas showed obviously progressive increase with lesion degree(P<0.05).In 130 cases with gastric adenocarcinoma,the positive expression rate of well-differentiated adenocarcinoma of Ki-67 was lower than that of poor-differentiated adenocarcinoma(P<0.01).The positive rate of Ki-67 in not invaded full-thickness was lower than that in invaded full-thickness or breakthrough of serous membrane(P<0.01).ConclusionKi-67 plays important roles in gastric carcinogenesis.The positive expression of Ki-67 in gastric adenocarcinoma related with the tumor differentiation and invasion.

[Key words]stomach neoplasms；gastritis；Ki-67 antigen；immunohistochemistry

胃腺癌是最常見的消化道腫瘤之一，主要與遺傳、自身免疫、幽門螺桿菌感染、生活環境和飲食等多種因素有關，其確切病因還不完全清楚。胃腺癌的發生是一個漫長的過程，胃黏膜細胞癌變通常認為經歷淺表性胃炎→萎縮性胃炎→腸上皮化生→低級別異型增生→高級別異型增生→腺癌等衍變階段。在腫瘤的形成過程中，異型增生是顯微鏡下第1個可以發現的解剖學改變[1]。低級別異型增生，多發生在黏膜表面,細胞核緊密排列在基底，染色質密集深染，核增大,分裂象較少，細胞核常位于細胞的一半或2/3以下，保持一定的極性，腺體結構稍不規則，很少出現背靠背及共壁。高級別異型增生，含有腫瘤細胞，通常是立方形，核漿比高，核仁明顯雙嗜性，結構紊亂更明顯，大量核分裂(其中很多呈異型性)，重要的是胞核經常延伸至細胞的胞腔，核極性通常消失。低級別異型增生和高級別異型增生是主要的胃癌前病變，是正常胃黏膜癌變的必經過程，同時伴隨基因的改變。對胃腺癌的有效防治一直是醫學界相關領域研究的重點，對胃腺癌實施針對病因的一級預防比較困難，因此，對胃癌前病變的研究就成了胃腺癌二級預防的重要內容之一。對胃癌變過程不同階段Ki-67基因表達及量異常的研究可能為病變的進展提供預測指標。Ki-67為目前較為肯定的核增殖標志基因，多用于判斷腫瘤的良、惡性及惡性程度，也用于探討細胞增殖活性、細胞周期與腫瘤的分化程度、浸潤深度、復發及轉移等，在胃腺癌的發生發展中起到了重要的作用，分化程度、浸潤深度都是影響胃癌患者預后的主要因素，應用免疫細胞化學技術檢測不同分化程度胃腺癌組織中Ki-67的表達情況，分析其在胃腺癌的發生和胃腺癌分化程度、浸潤深度中的意義至關重要。報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料2009年1月—2014年1月共收集慢性胃炎102例，男性57例，女性45例，年齡28～79歲，平均(47.50±3.42)歲；胃黏膜異型增生158例，男性91例，女性67例，年齡31～79歲，平均(49.52±2.85)歲；胃腺癌根治標本130例(其中山東鋁業公司醫院病理科收集胃腺癌組織標本60例、淄博市中心醫院病理科收集胃腺癌組織標本29例、淄博市第一醫院病理科收集胃腺癌組織標本20例、中國人民解放軍第一四八醫院病理科收集胃腺癌組織標本11例、淄礦集團中心醫院病理科收集胃腺癌組織標本10例)，男性78例，女性52例，年齡35～65歲，平均(51.50±1.41)歲，腺癌腫物直徑1.00～13.50 cm,平均(4.50±2.53) cm。選擇胃腺癌標本均為分化型腺癌，所有患者均未經化療。胃腺癌組織未侵及漿膜42例，侵及或突破漿膜88例；高中分化腺癌43例，低分化腺癌87例。上述標本均經原單位取材后，收集到山東鋁業公司醫院病理科，統一取材進行免疫組織化學染色，由課題組2名副主任醫師閱片，確定診斷。3組性別、年齡比較差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2免疫組織化學方法所有標本均經10%中性甲醛固定，常規脫水、浸蠟、包埋，3 μm連續切片。常規HE染色，觀察胃癌組織的的病理形態。單克隆抗體Ki-67及PV6000 檢測試劑盒均購自北京中杉金橋生物技術有限公司，免疫組織化學染色采用SP二步法。陽性對照為已知的陽性組織切片，以PBS代替一抗作為陰性對照。

1.3免疫組織化學結果判斷方法取3個400倍高倍鏡視野，計算陽性細胞所占細胞百分比的平均值，Ki-67陽性為細胞核著色，呈棕黃色，陽性細胞數<10%為陰性(-),陽性細胞占10%～25%為陽性(+),陽性細胞占>25%～75%為陽性(++),陽性細胞>75%為陽性(+++)。

1.4統計學方法應用SPSS 13.0軟件包對數據進行分析。計數資料比較采用χ2檢驗；等級資料比較采用秩和檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1Ki-67在胃炎、低級別異型增生、高級別異型增生及胃腺癌中的表達Ki-67在胃炎、低級別異型增生、高級別異型增生及胃腺癌中陽性表達率明顯遞增，且隨著病變加重，強陽性表達顯著增多(P<0.05)，見表1。Ki-67表達分級情況見圖1～4。

2.2Ki-67在不同胃腺癌分化程度和浸潤深度中的表達130例胃腺癌組織高中分化腺癌Ki-67陽性表達率低于低分化腺癌，差異有統計學意義(P<0.01)。未侵及全層者Ki-67陽性表達率低于侵及全層或突破漿膜者，差異有統計學意義(P<0.01)。見表2。

表1　Ki-67在胃癌衍變過程中的表達

* P<0.05與胃炎比較　# P<0.05與低級別異型增生　△ P<0.05與高級別異型增生(χ 2檢驗)

3討論

Ki-67是目前公認的重要核增殖標志基因，可以作為一種評估惡性腫瘤治療與預后的分子靶標[2],其表達量的高低對胃腺癌的分化程度及浸潤深度有著重要的臨床意義,其定位于10號染色體,是從霍奇金淋巴瘤細胞系L428的粗核成分免疫鼠中制備分離出的抗體[3]，在增殖細胞的G1、S、G2和M期表達，G0期不表達。Ki-67的表達與細胞增殖狀態密切相關，是反映細胞增殖的主要生物學指標，很多關于胃腺癌分化程度、淋巴結轉移、浸潤深度、腫瘤大小、年齡、性別等生物學行為以及判斷其危害性具有重要意義的研究，結論并不完全一致。

本研究結果顯示，Ki-67在胃炎、低級別異型增生、高級別異型增生和胃腺癌中的陽性表達率明顯遞增(P<0.05)。這與苗龍等[4]和陳昊等[5]的研究結果相符合。王彩霞等[6]研究表明胃腺癌細胞的增殖活性遠遠大于非腫瘤性胃黏膜。目前的研究已發現在多種實體惡性腫瘤中Ki-67的表達遠高于正常組織[7]及良性病變組織，顯示Ki-67有可能成為確定癌前人群高危個體的生物標志物[8]。

有研究顯示Ki-67的陽性表達與組織學分化程度和淋巴結轉移無關，但與臨床分期和浸潤深度有關[9]。也有資料顯示Ki-67陽性表達與胃腺癌是否轉移之間有顯著相關性，Ki-67 在低分化組的陽性表達率高于中高分化組[10]。本研究結果顯示，Ki-67在胃高中分化腺癌的陽性表達率低于低分化腺癌，在未侵及全層者的陽性表達率低于侵及全層或突破漿膜者，差異有統計學意義(P<0.01)。Ki-67為敏感的細胞核增殖標記物，常用于判斷腫瘤的增殖活性。Ki-67表達陽性率隨著腫瘤分化程度的下降而升高，隨腫瘤浸潤深度的增加而逐漸升高[11]。有研究指出，癌細胞分化程度越低，伴有淋巴結轉移者Ki-67表達越強[12]。國外資料顯示,在胃鏡活組織檢查標本與胃癌切除標本中進行免疫組織化學檢測差異無統計學意義[13]，胃鏡活組織檢查標本可以進行Ki-67檢測。

綜上所述，Ki-67在胃腺癌的發生發展中發揮著重要作用，且在胃腺癌分化程度和浸潤深度中具有重要意義。因此，檢測胃鏡活組織檢查組織中Ki-67在胃低級別異型增生組織、高級別異型增生組織中的表達,對鑒別癌變的發展趨勢具有重要意義，有利于對胃腺癌活組織檢查標本患者的浸潤深度進行評估，可幫助胃腺癌患者選擇治療方案，Ki-67高表達提示更易出現胃腺癌浸潤深度增加，更表現為低分化，惡性程度更高，其表達水平高低對判斷和估計患者的預后將具有重要的參考作用。(本文圖見封三)

[參考文獻]

[1]Fenoglio-Preiser CM.胃腸病理學[M].3版.回允中，主譯.北京：北京大學醫學出版社，2011：242. CM.胃腸病理學[M].3版.回允中，主譯.北京：北京大學醫學出版社，2011：242.

[2]Koc N,Sahin D,Ayas S.Reevaluation of negative cone biopsy results after a positive cervical biopsy finding[J].J Low Genit Tract Dis,2013,17(2):154-159.

[3]Stein H,Mason DY,Gerdes J,et al.The expression of the Hodgkin's disease associated an tigen Ki-1 in reactive and neoplasticlym phoid tissue: evidence that Reed-Sternberg cells and histocytic malignancies are derived from activated lymphoid cells[ J].Blood,1985,66(4):848-858.

[4]苗龍,黃曉俊.Ki-67和PCNA在胃癌中的表達及其臨床診斷價值[J].臨床內科雜志，2011,28(2):95-98.

[5]陳昊,李玉民,何明彥，等.胃不典型增生和癌組織中Ki67和PTEN蛋白的表達及意義[J].中國普外基礎與臨床雜志,2007,14(3):304-307.

[6]王彩霞,王曉,吳慶田，等.MMP-26和Ki67在胃癌組織中的表達及臨床意義[J].黑龍江醫藥科學,2012,35(4):83-84.

[7]栗一帆,王曉娟,馬晉峰.胃腺癌組織中NET-1、FHIT及Ki-67的表達及其臨床意義[J].中國腫瘤外科雜志,2013,5(1):26-29.

[8]賀宇宏,李春輝,王敏，等.p16、Ki67及cyclinD1基因在胃癌中表達的研究進展[J].職業與健康,2011,27(3):331-333.

[9]葉斌,王西川,雷蕾，等.p53和Ki67在胃癌中的表達及其臨床意義[J].中國醫藥指南,2013,11(20):69-71.

[10]張艷紅，呂曉軍，馬香穩，等.Ki-67在胃癌組織浸潤和轉移中的作用[J].中國優生與遺傳雜志,2011,19(1):33-34.

[11]孔東方,何慶泗,孫國瑞，等.胃癌組織中Ki-67及CD34 的表達及其臨床意義[J].中國現代普通外科進展,2012,15(6):451-454.

[12]李梅，姚樂，惠起源．Livin、Ki-67蛋白在胃癌中的表達及意義[J]．現代腫瘤醫學，2011，19(2)：302-304.

[13]Yoshida H,Yamamoto N,Taniguchi H,et al.Comparison of HER2 status between surgically resected specimens and matched biopsy specimens of gastric intestinal-type adenocarcinoma [J].Virchows Arch,2014,465 (2 ):145-154. N,Sahin D,Ayas S.Reevaluation of negative cone biopsy results after a positive cervical biopsy finding[J].J Low Genit Tract Dis,2013,17(2):154-159.

[3]Stein H,Mason DY,Gerdes J,et al.The expression of the Hodgkin's disease associated an tigen Ki-1 in reactive and neoplasticlym phoid tissue: evidence that Reed-Sternberg cells and histocytic malignancies are derived from activated lymphoid cells[ J].Blood,1985,66(4):848-858.

[4]苗龍,黃曉俊.Ki-67和PCNA在胃癌中的表達及其臨床診斷價值[J].臨床內科雜志，2011,28(2):95-98.

[5]陳昊,李玉民,何明彥，等.胃不典型增生和癌組織中Ki67和PTEN蛋白的表達及意義[J].中國普外基礎與臨床雜志,2007,14(3):304-307.

[6]王彩霞,王曉,吳慶田，等.MMP-26和Ki67在胃癌組織中的表達及臨床意義[J].黑龍江醫藥科學,2012,35(4):83-84.

[7]栗一帆,王曉娟,馬晉峰.胃腺癌組織中NET-1、FHIT及Ki-67的表達及其臨床意義[J].中國腫瘤外科雜志,2013,5(1):26-29.

[8]賀宇宏,李春輝,王敏，等.p16、Ki67及cyclinD1基因在胃癌中表達的研究進展[J].職業與健康,2011,27(3):331-333.

[9]葉斌,王西川,雷蕾，等.p53和Ki67在胃癌中的表達及其臨床意義[J].中國醫藥指南,2013,11(20):69-71.

[10]張艷紅，呂曉軍，馬香穩，等.Ki-67在胃癌組織浸潤和轉移中的作用[J].中國優生與遺傳雜志,2011,19(1):33-34.

[11]孔東方,何慶泗,孫國瑞，等.胃癌組織中Ki-67及CD34 的表達及其臨床意義[J].中國現代普通外科進展,2012,15(6):451-454.

[12]李梅，姚樂，惠起源．Livin、Ki-67蛋白在胃癌中的表達及意義[J]．現代腫瘤醫學，2011，19(2)：302-304.

[13]Yoshida H,Yamamoto N,Taniguchi H,et al.Comparison of HER2 status between surgically resected specimens and matched biopsy specimens of gastric intestinal-type adenocarcinoma [J].Virchows Arch,2014,465 (2 ):145-154.

(本文編輯：趙麗潔)