兔動脈硬化模型建立及斑塊病理與超聲影像的對比研究

班 琦梁文波* 翁文采喬鋒利韓 野

（1 遼寧省大連市大連大學附屬中山醫院，遼寧 大連 116000；2 吉林省長春市吉林大學中日聯誼醫院，吉林 長春 130000）

兔動脈硬化模型建立及斑塊病理與超聲影像的對比研究

班 琦1梁文波1* 翁文采1喬鋒利2韓 野2

（1 遼寧省大連市大連大學附屬中山醫院，遼寧 大連 116000；2 吉林省長春市吉林大學中日聯誼醫院，吉林 長春 130000）

目的對兔動脈硬化模型建立及斑塊病理與超聲影像的對比進行分析研究。方法選取15只雄性純種新西蘭大白兔，采用球囊損傷和高脂（1%膽固醇）喂養建立動脈硬化模型，斑塊部位轉染攜帶p53基因的重組腺病毒載體，然后進行藥物觸發，形成斑塊破裂和血栓。分別于藥物觸發前后對家兔進行血管內超聲檢查，并與病理學檢查結果做對比。結果以組織病理學檢查為基準，血管內超聲（intravenous ultrasound， IVUS）檢查診斷斑塊破裂及血栓的敏感性為85.7%，特異性為75%；IVUS與病理學測量的血栓長度上高度相關（r=0.78，P＜0.05），測量血栓的面積無相關性（r=0.16，P＞0.05）。結論血管內超聲識別斑塊破裂及血栓形成的準確性較高。

兔動脈硬化模型；斑塊病理；藥物觸發

斑塊破裂、血栓形成導致的冠狀動脈閉塞是急性冠狀動脈綜合征的主要發病機制，粥樣斑塊破裂是急性冠狀動脈綜合征發生的重要環節[1]，IVUS可顯示管腔、管壁斑塊的大小、組成及分布情況，在冠心病的診斷方面頗具優勢，被公認為診斷冠心病的金標準[2-3]。由于缺乏理想的動物模型，因而對IVUS診斷斑塊破裂及血栓的準確性方面現有研究報道，本文以15只雄性純種新西蘭大白兔為研究對象，對兔動脈硬化模型建立及斑塊病理與超聲影像的對比進行分析研究，報道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象：以15只雄性純種新西蘭大白兔為研究對象，體質量1.6～2.5 kg，平均（2.0±0.2）kg。

1.2 方法：Galaxy型血管內超聲檢測儀（美國Boston Scientific公司），探頭頻率40 MHz，攜帶人野生型p53基因的復制缺陷型重組腺病毒載體Ad5-p53（滴度1.5×1010pfu/mL）。

兔動脈粥樣硬化模型建立：采用高脂飼料（含1%膽固醇）喂養雄兔，每天120～140 g，連續喂養10周，采用3%戊巴比妥鈉30 mg/kg麻醉雄兔后穿刺右股動脈，將球囊導管（長15 mm，內徑3.5 mm）送入降主動脈20 cm，充盈球囊約8個大氣壓，回拉至髂動脈，反復操作3次致腹主動脈內膜受損。

斑塊基因轉染及藥物觸發：采用3%戊巴比妥鈉30 mg/kg麻醉雄兔，打開腹腔，充分暴露腹主動脈，高頻線陣探頭引導下尋找右腎動脈至髂總動脈血管段中的斑塊最大處作為轉染部位，結扎轉染部位上下兩端的血管10 min，向管腔中注入Ad5-p53重組病毒載體，恢復血供，縫線標記結扎部位，關閉腹腔，予以抗生素預防感染。基因感染兩周后給予魯塞爾蝰蛇毒（RVV）0.15 mg/kg和組胺藥物觸發。

IVUS檢查：分別于藥物觸發前后進行IVUS檢查，采用4F穿刺針穿刺左側股動脈，插入5F鞘管固定，靜注肝素100 U/kg抗凝，沿鋼絲插入血管內超聲探頭導管，穿過狹窄病變至血管遠端，緩慢回撤導管，記錄斑塊近端、遠端圖像。

1.3 觀察指標：①斑塊破裂及血栓形成的發生率；②病變部位血管外彈力膜面積（EEMA）、斑塊面積（PA）、最小管腔面積（LA）、血栓面積（TA）=EEMA-LA-PA，測量血栓長度。將結果與病理學檢測相對比。

1.4 統計學處理：采用SPSS17.0軟件進行統計分析，計量資料應用均數±標準差（）表示，采用方差分析，計數資料以%表示，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 IVUS檢查斑塊破裂及血栓形成與病理學檢查的符合情況：IVUS檢查發現，15只雄兔中13只（86.7%）共發生19處斑塊破裂、血栓形成，病理學檢查結果顯示，15只雄兔中13只共發生21處斑塊破裂、血栓形成，斑塊破裂處血栓呈白色圓柱狀，緊貼于管壁，兩端附有小段紅色血凝塊，疏松附著于管壁，與組織學檢查比較，IVUS檢查診斷斑塊破裂及血栓的敏感性為85.7%（18/21），特異性為75%（3/4），見表1。

表1 IVUS檢查斑塊破裂及血栓形成與病理學檢查的符合情況（處）

2.2 IVUS與病理學測量血栓長度、面積的對比：IVUS與病理學測量的血栓長度上高度相關，測量血栓的面積無相關性，見表2。

表2 IVUS與病理學測量血栓長度、面積的對比（）

表2 IVUS與病理學測量血栓長度、面積的對比（）

注：aP＜0.05；bP＞0.05

檢查方法 血栓長度(mm) 血栓橫截面積(mm2) IVUS 6.48±2.46a 8.28±2.18b病理學 5.01±2.02 6.82±2.48 r 0.78 0.16

3 討 論

斑塊破裂及血栓形成的診斷一直是IVUS顯像方面的難題，一直以來存在爭議[4]。本實驗采用基因工程技術建立動物動脈粥樣硬化模型，斑塊部位轉染攜帶p53基因的重組腺病毒載體，然后進行藥物觸發，形成斑塊破裂和血栓，經檢查，本組研究斑塊破裂和血栓形成率為86.7%，高于相關文獻報道[5]，分析其中原因，可能與合并應用p53與藥物觸發有關。以組織病理學檢查為基準，血管內超聲（IVUS）檢查診斷斑塊破裂及血栓的敏感性為85.7%，特異性為75%，與相關研究報道相符[6]，IVUS與病理學測量的血栓長度上高度相關，但測量血栓的面積無相關性，可能與血栓邊界不清，難以判斷有關。此外，通過表2可以看出，病理學檢查測量值均小于血管內超聲檢查，可能與動物死后組織回縮相關。綜合上述，血管內超聲識別斑塊破裂及血栓形成的準確性較高。對臨床治療急性冠狀動脈綜合征具有重要的指導意義。

[1]陳文強,張運,張梅,等.血管內超聲和病理學分析對比研究動脈粥樣硬化兔不穩定斑塊的破裂和血栓形成[J].中華超聲影像學雜志,2004,13(10):777-779.

[2]倪祝華,朱天剛,胡大一,等.應用血管內超聲顯像對正常和動脈粥樣硬化血管的研究[J].中華超聲醫學雜志,2000,16(3):161-164.

[3]李麗,高志凌,蓋魯粵.血管內超聲-診斷和指導冠狀動脈粥樣硬化及其介入治療的“金標準”[J].心血管病進展,2009,30(1):139-143.

[4]馬驍,黎莉,張薇,等.實驗性高膽固醇血癥與家兔腹主動脈粥樣硬化的關系研究[J].中國心血管雜志,2012,7(5):311-312.

[5]張華巍,楊庭樹,李云芝,等.血管內超聲檢驗兔動脈粥樣硬化斑塊的研究[J].嶺南心血管病雜志,2013,19(1):84-86.

[6]蔣明東,彭志平.兔腹主動脈粥樣硬化模型的建立[J].動物醫學進展,2005,26(9):46-49.

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1671-8194（2015）01-0057-02

*通訊作者