醫院制劑“平喘固本膠囊”質量標準的研究

敬玉錫 馮仔駒 賈天貴 周瑞君 周 姍 陳圣堂

（廣元市中醫醫院，四川 廣元 628000）

醫院制劑“平喘固本膠囊”質量標準的研究

敬玉錫 馮仔駒 賈天貴 周瑞君 周 姍 陳圣堂

（廣元市中醫醫院，四川 廣元 628000）

目的研究建立醫療機構專科新制劑“平喘固本膠囊”的質量標準。方法采用理化鑒別、顯微鑒別、TLC、HPLC四個方面對其進行質量控制。結果經試驗建立的質量標準，方法簡便可行，重現性好。結論可很好地控制平喘固本膠囊的內在質量。

平喘固本膠囊；質量標準；薄層色譜；高效液相色譜

平喘固本膠囊是廣元市中醫醫院制劑室新研制的中藥成分制劑，由五味子、沉香、白果、蛤蚧、熟地等22味中藥加工制成，對于慢性阻塞性肺氣腫的病患有很好的治療效果。為有效地控制其內在質量，在制備工藝確定的基礎上，需要對其質量標準的起草和制定進行系統研究，最終對處方中原粉入藥的中藥建立了理化鑒別、顯微鑒別項；對處方中提取部分的中藥采用TLC、HPLC法建立質量標準項，這里介紹對樣品中黃芪、甘草、熟地黃進行的薄層色譜鑒別和對其主要藥味丹參所含的成分丹酚酸B的含量測定。

1 材料與方法

試驗用樣品由廣元市中醫醫院制劑室提供，方法學研究樣品為121122、121225、130517、130620、130722、130821。

2 黃芪的薄層鑒別

采用黃芪甲苷為對照品（中檢所110781-200613），進行薄層色譜鑒別研究。

2.1 樣品處理：取本品6 g，加水50 mL超聲提取30 min，離心，取上清液濾過，濾液加水飽和正丁醇萃取3次，每次20 mL，合并正丁醇液，用60 mL氨試液洗滌3次，取正丁醇液蒸干，殘渣加20 mL甲醇溶解，濾過，濾液加在中性氧化鋁柱上，用100 mL 40%甲醇洗脫，洗脫液蒸干，殘渣加0.5 mL甲醇溶解，作為供試品溶液。

2.2 陰性對照處理：取按處方比例及制備工藝制備的不含黃芪的陰性對照樣品，同法制成陰性對照溶液。

2.3 對照品溶液：取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1 mg/mL的溶液。

2.4 展開劑：三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）的下層溶液。

2.5 顯色劑：10%硫酸乙醇溶液，105 ℃加熱至斑點顯色清晰，日光與紫外光燈（365 nm）下檢視。

2.6 點樣：考察不同薄層板情況。實驗結果：供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，日光與紫外光燈（365 nm）下顯相同顏色斑點，顯色清晰。而陰性對照溶液無此斑點。此條件下，分離度好，耐用性好。

3 甘草的薄層鑒別

采用甘草對照藥材為對照品（中檢所120904-200512），進行薄層鑒別研究。

3.1 樣品處理：取本品5 g，加水20 mL，使溶解，離心，取上清液過濾，濾液通過DA-201型大孔吸附樹脂柱（內徑l cm，柱高12 cm，濕法裝柱），用水50 mL洗至近無色，再用30 mL 60%乙醇洗脫，洗脫液蒸干，殘渣加2 mL甲醇溶解，上清液作為供試品溶液。

3.2 陰性對照處理：取按處方比例及制備工藝制備的不含甘草的陰性對照樣品，同法制成陰性對照溶液。

3.3 對照品溶液：取甘草對照藥材0.5 g，加水30 mL，加熱回流30 min，濾過，濾液濃縮至20 mL，同法制成對照藥材溶液。

3.4 展開劑：正丁醇-乙醇-濃氨（10∶4∶3）。

3.5 顯色劑：10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加熱至斑點顯色清晰，在日光燈及紫外光燈（365 nm）下檢視。

3.6 點樣：考察不同薄層板情況。實驗結果：供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，日光與紫外光燈（365 nm）下顯相同顏色斑點，顯色清晰，而陰性對照溶液無此斑點。分離度好，耐用性好。

4 熟地黃的薄層鑒別

采用熟地黃對照藥材為對照品（中檢所121196-200804），進行薄層鑒別研究。

4.1 樣品處理：取本品4 g，加40 mL水，煎煮30 min，放冷后濾過，濾液用60 mL乙酸乙酯提取2次，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL溶解，作為供試品溶液。

4.2 陰性對照處理：取按處方比例及制備工藝制備的不含熟地黃的陰性對照樣品，同法制成陰性對照溶液。

4.3 對照品溶液：取熟地黃對照藥材2 g，同法制成對照藥材溶液。

4.4 展開劑：甲苯-乙酸乙酯（1∶1）。

4.5 顯色劑：105 ℃加熱至斑點顯色清晰，在日光燈下檢視。

4.6 點樣：考察不同薄層板情況。實驗結果：供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，日光燈下顯相同顏色斑點，顯色清晰，而陰性對照溶液無此斑點。分離度好，耐用性好。

5 樣品中丹酚酸B的含量測定

5.1 儀器及色譜條件。儀器：Agilent1260-DAD檢測器；色譜條件：①色譜柱：Xbridge C18（5 μm，250 mm×4.6 mm）；②流動相：乙腈-0.1%甲酸溶液（22∶78）；③檢測波長：256 nm；④柱溫：30 ℃；⑤流速：1.0 mL/min；⑥進樣量10 μL。

5.2 對照品溶液的制備：取丹酚酸B對照品（中檢所111562-201111，含量98.2%，無需處理）適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含70 μg的溶液，即得。

5.3 供試品溶液的制備：取本品內容物，約2.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率500 W，頻率40 kz）30 min，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

5.4 陰性對照溶液取按處方比例及制備工藝制備的不含丹參的陰性對照樣品，照5.3項下操作，同法制成陰性對照溶液。

5.5 精密度試驗：取同一對照品溶液5 μL，重復進樣6次，測定丹酚酸B峰面積。見表1。試驗結果表明：儀器的精密度良好。

表1 精密度試驗結果（n=6）

5.6 穩定性考察：將新配制的對照品溶液5 μL及新制備的供試品溶液

10 μL，精密進樣，測定峰面積，以后每間隔一定時間測定1次，記錄其色譜峰面積變化。結果見表2、3。

表2 對照品溶液穩定性試驗結果

結果表明：對照品溶液的RSD＜2.0%，說明對照品溶液在24 h內穩定性良好。

表3 樣品溶液穩定性試驗結果

結果表明：樣品溶液的RSD＜2.0%，說明樣品溶液在24 h內穩定性良好。

5.7 重復性考察：取同一批號本品粉末2.5 g，精密稱定，分別取6份，按擬定方法制備并測定含量，見表4。

表4 重復性考察結果

樣品重復測定6次的結果RSD＜2.0%，證明本方法重復性良好。

5.8 加樣回收試驗：精密稱取本品（丹酚酸B含量為1.36 mg/g）2.5 g，共6份，分別精密加入丹酚酸B對照品溶液（濃度為0.1355 mg/mL）1mL，揮干溶劑，按照擬定方法分別制成供試品和對照品溶液，注入對照品溶液5 μL，供試品溶液10 μL，測定含量，計算回收率。見表5。

表5 丹酚酸B加樣回收試驗結果

實驗結果表明：丹酚酸B平均加樣回收率分別為96.3%，RSD為1.47%。說明本方法回收率良好。

5.9 六批樣品含量測定：采用正文擬定的含量測定方法，測定6批平喘固本膠囊樣品中丹酚酸B的含量，結果見表6。六批平喘固本膠囊中丹酚酸B的含量為1.28～1.41 mg/g，考慮大生產中丹參酚酸類成分提取效率不高，以平均值下浮20%計算，暫定本品含丹參以丹酚酸B計不得少于1.0 mg/g。

表6 樣品的含量測定

6 討 論

6.1 平喘固本膠囊是由五味子、沉香等22味藥組成的中藥復方制劑，藥味多，成分復雜，單一的質控標準不足以控制成藥的內在質量，我們采用理化鑒別、顯微鑒別、TLC、HPLC四種方法對其進行質量控制[1]，達成全面控制質量的目的。

6.2 薄層色譜鑒別最好采用硅膠G可裁板，重復性好，使用方便。

6.3 含量測定在選擇被測成分時要根據制作工藝適當選擇，其中丹參的提取是水提，故在樣品中，脂溶性成分丹參酮ⅡA不合適，選擇水溶性成分的酚酸B作為被測成分，結果較為滿意。

[1]國家藥典委員會.中國藥典.2010年版一部[S].北京:中國醫藥科技出版社,2010:1139-1141.

R282

B

1671-8194（2015）01-0053-02