自身抗體在自身免疫性肝病中的診斷價值

趙志鈞 鮑舟君 姚燕珍 李翊衛? 劉華生

自身抗體在自身免疫性肝病中的診斷價值

趙志鈞 鮑舟君 姚燕珍 李翊衛? 劉華生

目的 探討自身抗體檢測在自身免疫性肝病（AILD）中的診斷價值。方法 對22例自身免疫性肝炎（AIH）患者、21例原發性膽汁性肝硬化（PBC）患者和4例重疊綜合征（OS）患者的血清進行自身抗體的檢測。采用間接免疫熒光法和免疫印跡法測定抗核抗體（ANA）、抗線粒體抗體（AMA）、抗平滑肌抗體（ASMA）、抗F-肌動蛋白抗體和LKM-1、LC-1、SLA/LP抗體。結果 AIH患者ANA陽性率為81.8%；PBC患者ANA陽性率為81.0%。與乙型肝炎組（HBV）和正常對照組比較差異有統計學意義（P＜0.05）。AIH組和PBC組ANA以高滴度（＞1：320）為主。PBC組AMA和AMA-M2陽性率分別為76.2%和81.0%，與AIH組比較差異有統計學意義（P＜0.05）。結論 自身抗體檢測對自身免疫性肝病診斷和鑒別診斷具有重要的意義。

自身抗體 自身免疫性肝病 診斷

自身免疫性肝病（AILD）是一組肝臟免疫耐受機制失衡引起的肝細胞或膽管上皮慢性損傷性炎癥疾病，根據其臨床表現、生化、免疫學、影像學和組織病理學特點，可分為以肝實質細胞進行性損傷為主的自身免疫性肝炎（AIH），以膽道系統受累為主的原發性膽汁性肝硬化（PBC）和原發性硬化型膽管炎（PSC），以及重疊綜合征（OS）。AILD起病隱匿，初期癥狀與病毒性肝炎相似，而其治療原則和病毒性肝炎則完全不同。因此早期診斷對AILD的病情監測和預后具有重要價值。本文回顧性分析2012年5月至2014年7月本院收治的47例AILD患者的自身抗體檢測結果，以探討自身抗體檢測對AILD的診斷價值。

1 臨床資料

1.1 一般資料 47例病例診斷均符合美國肝臟學會的診斷依據及國際自身免疫性肝炎組（IAIHG）修訂的評分標準［1］。其中AIH 22例，男1例，女21例；年齡18～69歲，平均（58.0±10.8）歲。PBC 21例，男6例，女15例；年齡40～78歲，平均（56.4±8.0）歲。OS 4例，均為PBC-AIH重疊綜合征，女，年齡50～63歲，平均（55.0±6.3）歲。以HBV感染者和健康體檢者為對照組。其中HBV感染組38例，男5例，女33例；年齡37～76歲，平均（57.1±10.6）歲。健康體檢者30例，其中男6例，女24例；年齡40～72歲，平均（56.0±10.2）歲。所有體檢人員肝、腎、心功能正常，并排除自身免疫性疾病。

1.2 自身抗體檢測 自身抗體檢測包括抗核抗體（ANA）、抗線粒體抗體（AMA）、抗平滑肌抗體（ASMA）、抗F-肌動蛋白抗體。方法為間接免疫熒光法（ⅡF）。試劑由歐蒙（杭州）醫學實驗診斷有限公司提供。選用HEp-2細胞、猴肝和大鼠腎組織冷凍切片作為抗原，將待測血清1：100倍稀釋后同抗原基質孵育30min，經異硫氰酸熒光素標記的羊抗人IgG結合30min后，洗片封片，熒光顯微鏡下觀察，出現黃綠色熒光為陽性。1.3 抗肝抗原譜檢測 抗肝抗原譜檢測包括抗線粒體抗體-M2亞型（AMA-M2），抗肝腎微粒體1型抗體（LKM-1）、抗肝細胞溶質抗原1型抗體（LC-1），抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗體（SLA/LP）。采用免疫印跡法檢測。試劑由德國歐蒙醫學實驗診斷股份公司提供。將待測血清1：100倍稀釋后同抗原基質孵育30min，再用酶標抗人IgG孵育30min，用底物顯色10min。觀察特定區域是否有陽性條帶。

1.4 病毒性肝炎檢測 病毒性肝炎標志物的檢測采用化學發光法，儀器為雅培公司的Abbott-i2000型，試劑和標準品均由雅培公司提供。

1.5 統計學方法 采用SPSS16.0統計軟件。計數資料以n或%表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 ANA及滴度在AILD患者中檢測結果 見表1。

表1 各組ANA抗體滴度檢測結果［n（%）］

2.2 AILD組間ANA核型結果 見表2。

表2 AILD各組間ANA核型比較（n）

2.3 各組間自身抗體和抗肝抗原譜檢出率 見表3。

表3 各組間自身抗體和抗肝抗原譜檢出率的比較［n（%）］

3 討論

目前AIH、PBC診斷的“金標準”是肝組織的病理學檢查，但AILD的肝組織活檢特異性不強，受取材標本局限，對檢查結果影響較大［2］。隨著對自身抗體檢測手段的提高和抗體譜的不斷完善，自身抗體的檢測在AILD患者診斷中的價值越來越受重視。

本資料結果表明，AILD患者以中年女性居多。AILD患者中又以AIH和PBC兩類患者數為多，本資料因缺乏PSC病例，故未做這方面的探討。AIH病因不明、起病隱匿、缺乏疾病特異性臨床表現和相應的病原體［3］，而且病情可以輕至無任何臨床癥狀重至急性發作［4］，隨著臨床實踐經驗的積累和對AIH認識的提高，人們逐漸認識到AIH相關自身抗體在AIH的診斷與分型中的重要作用，并在AIH的診療指南中將AIH相關自身抗體的地位提到與ALP、球蛋白等其他診斷重要指標相同的地位［5］。本資料中，有81.8%的患者ANA為陽性，同時AIH患者ANA抗體滴度高，18例陽性病例中有9例滴度＞1：320。對其中ANA陽性的AIH患者做核型分析顯示，有5例為著絲點熒光模式。另外，ANA陽性率和抗體滴度與AIH相似，其核型以著絲點和胞漿顆粒型多見。但進一步分析表明，兩組在AMA和AMA-M2的陽性率差異有統計學意義，本資料中AIH組和PBC組AMA陽性率分別為13.6%和76.2%，AMA-M2的陽性率為4.5%和81.0%。且AMA在疾病早期即可出現，從而說明AMA對PBC早期診斷具有重要的意義［6］。

本資料中涉及到4例OS病例，均為AIH-PBC OS，其并非是單純PBC與AIH在生物化學和病理等方面疊加，正確認識、診斷PBC-AIH OS非常必要。本資料亦顯示4例OS病例ANA均陽性，有3例滴度＞1∶100，核型分析有3例為≥2種的熒光模式，自身抗體檢測中4例患者均AMA-M2陽性。

1 Czaja AJ, Freese DK． Diagnosis and treatment of autoimmune hepatitis ．Hepatology, 2002, 36(2):479～497．

2 劉燕京． 自身抗體在自身免疫性肝病中的表達及臨床價值． 中國實用醫藥, 2013, 8(28):102～103．

3 Malnick S, Duek G, Melzer E, et al． The treatment of autoimmune hepatitis． Curr Clin Pharmacol, 2012, 7(4):318～327．

4 Peng M, Li Y, Zhang M, et al． Clinical features in different age groups of patients with autoimmune hepatitis． Exp Ther Med, 2014, 7(1):145～148．

5 Rigopoulou EI, Zachou K, Gatselis N, et al． Autoimmune hepatitis in patients with chronic HBV and HCV infections: patterns of clinical characteristics, disease progression and outcome． Ann Hepatol, 2013～2014, 13(1):127～135．

6 蔡曉燕, 董光富, 崔陽． 原發性膽汁性肝硬化63例． 實用醫學雜志, 2011, 27(12):2208～2210．

316000 浙江省舟山醫院

*通訊作者