中草藥對壩上長尾雞公雞睪丸微觀結構及生殖激素分泌的影響

劉海斌， 劉海珍， 陳 亮， 李亞琪， 張立永， 趙月平

（1.河北北方學院牧業研究所，河北張家口 075000；2.陽原縣農牧局，河北陽原 075800）

壩上長尾雞作為地方蛋肉兼用型品種目前群體數量較少，大多集中在張家口和承德地區，為農村放牧零星飼養，未形成規模，數量逐漸減少，其主要品種特征是尾羽較長，公雞有2～3根大翹尾，大約長45 cm，最長的有時可達60多 厘米，一般6～7月齡達到性成熟（李枝隆等，1965）。性成熟晚導致公雞的利用率較低，是造成種質流失的重要原因之一。研究表明，中草藥含有多種有效成分，可顯著影響下丘腦—垂體—性腺軸功能，通過受體功能調節神經內分泌，促進性腺發育和性激素分泌，從而促進性成熟（馬紅霞等，2009）。本試驗研究適宜中草藥組方對壩上長尾公雞性成熟的影響，以期為中草藥添加劑的開發利用，解決壩上長尾公雞性成熟期長、繁殖率低的難題，促進壩上長尾雞養殖業的發展提供參考。

1 材料與方法

1.1 中草藥組方及用法 將黃芪、當歸、淫羊藿、枸杞子、熟地、杜仲、赤芍等中草藥按一定比例磨碎混勻，按1%的比例添加在日糧中。

1.2 分組與飼養 選取體重基本一致、健康的110日齡壩上長尾公雞30只，隨機分為2組，每組設3個重復，每個重復5只雞。三階梯籠養，自由采食和飲水，光照13 h，室內溫度保持18～25℃。

1.3 睪丸切片的制作和觀察 分別于110、120、130日齡每組取公雞2只空腹宰殺，快速取出睪丸，固定于10%甲醛溶液中，制作睪丸組織切片，HE染色，觀察睪丸組織學變化 。

1.4 激素水平的測定 分別于120、130日齡采血，制備血漿，采用放射免疫法測定睪酮（T）、促卵泡素（FSH）和促黃體素（LH）激素水平。

1.5 統計分析 試驗數據用SPSS 17.0統計軟件進行統計分析。

2 結果

2.1 睪丸曲細精管組織變化 由表1可知，對照組壩上長尾公雞110日齡曲細精管直徑為（103.32±3.64）μm，管腔空洞，管腔液較少，精原細胞單層排列，靠近基膜，出現較多的初級精母細胞和次級精母細胞，精子細胞較少，無精子產生；120日齡曲細精管直徑為（111.80±2.92）μm，精原細胞增多，產生大量的次級精母細胞和精子細胞，且聚集在管腔中央，無精子產生；130日齡曲細精管直徑達到（126.80±4.60）μm，可見有大量的初級精母細胞和次級精母細胞，精子細胞大量增殖，集中于管腔，可見有少量精子產生，且游離于管腔。試驗組壩上長尾公雞110日齡睪丸曲細精管直徑比對照組長1.22%，但差異不顯著（P＞0.05），管腔中有管腔液，精原細胞排列整齊，靠近基膜，出現較多的初級精母細胞和次級精母細胞，精子細胞較少，無精子產生；120日齡曲細精管管徑變粗，管腔直徑比試驗組長18.78%（P＜0.01），初級精母細胞增多，且移向管腔中央，產生大量的次級精母細胞和精子細胞，可見少量精子產生；130日齡曲細精管迅速增粗，管腔直徑比對照組長16.25%（P＜0.01），產生大量的初級精母細胞和次級精母細胞，精子細胞隨處可見，精子存滿管腔中央，基膜上除了有精原細胞和支持細胞外，還附有少量的初級精母細胞和精細胞。

表1 中草藥添加劑對公雞睪丸曲細精管直徑的影響 μm

2.2 中草藥對壩上長尾雞公雞外周血生殖激素分泌的影響 由表2可知，外周血漿LH和T含量隨著青年公雞日齡的增加而提高，FSH隨日齡的增加而降低。120日齡和130日齡FSH濃度試驗組比對照組分別提高79.69%（P＜0.05）和24.59%（P＞0.05）；120日齡和130日齡T濃度試驗組比對照組分別提高203.70%和178.95%（P＜0.01）。

表2 中草藥添加劑對壩上長尾雞公雞生殖激素分泌的影響

3 討論

本試驗表明，試驗組公雞睪丸曲精細管管徑、生殖上皮細胞等組織發育明顯優于對照組。公雞睪丸曲細精管的發育過程是育成雞達到性成熟的主要特征。伴隨著曲細精管的發育，處于不同發育階段的精細胞出現。曲細精管的管壁由復層上皮組成，其中有支持細胞和不同發育時期的生精細胞，由外向里依次是精原細胞、初級精母細胞、次級精母細胞、精子細胞和精子。精原細胞緊靠曲細精管基膜，細胞呈圓球形，或橢圓形，著色深；初級精母細胞體積大于精原細胞，細胞呈圓球形，位于精原細胞的內側；次級精母細胞體積較小，胞核圓形，著色較深，但較少見。精子細胞靠近腔面，體積小，圓形，核著色深。精子呈桿狀，著色深，位于管腔面或靠近基膜外的生精細胞之間。睪丸的發育和促性腺激素的分泌活動具有一定的相關性，性成熟期，精原細胞在家禽睪丸內曲細精管中分裂增殖，最終形成精子（Decuypere 和 Scanes，1983）。

精子的發生受下丘腦—垂體—睪丸軸的調控。丘腦下部分泌促性腺激素釋放激素（GnRH）作用于垂體，刺激FSH及LH的分泌，FSH作用于睪丸組織的生精細胞和支持細胞，啟動精原細胞分裂增殖，并刺激精母細胞的發育。LH與睪丸間質細胞上的LH受體結合，促進睪丸間質細胞合成及分泌T（張慶茹，2007）。T的增加促進精子發育成熟，并促進公雞第二性征的出現。本研究結果表明，試驗組壩上長尾公雞外周血漿FSH、LH和T濃度均高于對照組，說明中草藥作用于公雞的腺垂體和睪丸組織，促進腺垂體分泌LH和FSH，提高睪丸支持細胞分泌T的能力。熟地、杜仲等中草藥含有鋅、銅、鐵、鉀、鈣等微量元素，這些營養成分在一定程度上能促進性腺的發育 （李炳如和佘運初，1984）。林春驛（2005）在公雞日糧中添加2%用黃芪、黨參、淫羊藿、菟絲子、蛇床子、甘草等中草藥組成的飼料添加劑，結果試驗組體重、睪丸重量、精液生成時間、精液品質與對照組相比差異顯著。秦緒光等（2006）在后期種公雞日糧中添加由淫羊藿、補骨脂、茯苓、牡丹皮、澤瀉、甘草、肉桂、黃芪等組成的中草藥，能顯著提高種公雞的精液量和精子活力，以及血漿中睪酮、促黃體素、促卵泡素濃度，降低精子畸形率。血漿T濃度與血漿LH、FSH濃度呈顯著正相關。

公雞一般12周齡就具有精細胞，具有成熟的精子，但是，壩上長尾雞生長在寒冷的壩上地區，經過多年對環境的適應，生長速度較慢，性成熟較晚，因此，精子的形成也相對較晚，表現在110日齡精子還沒有發育成熟。因此，添加該中草藥能夠改變下丘腦—垂體—性腺軸功能，從而促進性腺發育，有利于壩上長尾雞性成熟。

4 結論

本試驗結果表明，黃芪、淫羊藿、杜仲等組成的中草藥組方能夠促進壩上長尾公雞睪丸發育和生殖激素分泌，從而促進其性成熟。

[1]李炳如，佘運初.補腎藥對下丘腦-垂體-性腺軸功能影響[J].中醫雜志，1984，25（7）：63～64.

[2]李枝隆，朱元照，胡一化.壩上長尾雞調查報告[J].河北農學報，1965，4（3）：23～26.

[3]林春驛.中草藥飼料添加劑對種公雞性成熟的影響[J].中獸醫學雜志，2005，46（6）：2～3.

[4]馬紅霞，賴毛華，黃婉怡，等.中醫藥促卵泡發育成熟的研究思路[J].湖南中醫藥大學學報，2009，29（4）：8～10.

[5]秦緒光，劉福柱，牛竹葉.中草藥復方添加劑對繁殖后期種公雞精液品質及血漿生殖激素濃度的影響[J].西北農林科技大學學報（自然科學版），2006，34（6）：36～40.

[6]張慶茹.動物生理學[M].北京：中國農業科學技術出版社，2007.300～318.

[7]Decuypere E，Scanes C G.Variation in the release of thyroxine，triiodothyronine and growth hormone in response to thyrotrophin releasing hormone during development of the domestic fowl[J].Acta Endocrinol，1983，102：220～223.