董新玉,謝鳳琦,張金蓮,王 軍
(1.大理州農業科學推廣研究院糧食作物研究所,云南 大理 671000;2.大理州農業科學推廣研究院藥用植物與新技術研究所,云南 賓川 671600;3.大理州農業科學推廣研究院經濟作物研究所,云南 賓川 671600)
甘薯組培苗簡易生產技術
董新玉1,謝鳳琦2,張金蓮3,王 軍2
(1.大理州農業科學推廣研究院糧食作物研究所,云南 大理 671000;2.大理州農業科學推廣研究院藥用植物與新技術研究所,云南 賓川 671600;3.大理州農業科學推廣研究院經濟作物研究所,云南 賓川 671600)
甘薯 [Ipomoeabatatas(L.)Lam.]又稱紅薯、地瓜、山芋、紅苕等,是世界第7大作物。在植物分類上屬旋花科(Convolvulaceae)甘薯屬蔓生草本植物。隨著生產的發展和農業產業結構的調整以及人們膳食結構的改變,甘薯作為集能源、糧食、飼用、食品加工、保健等功能于一身的糧食作物,種植面積日益擴大。甘薯屬無性繁殖作物,在種植過程中,很容易感染病毒,病毒在體內不斷增殖積累,并代代相傳,使病情逐代加重,最終導致甘薯品種種性退化,產量下降、品質變差。文章利用植物組織培養技術,生產健壯無病的甘薯組培苗,利用甘薯組培苗繁育無病毒植株,有利于提高甘薯產量。
1.1 甘薯藤莖尖外植體的預處理
在田間選取健壯不帶病的甘薯藤植株,用1‰高錳酸鉀溶液浸泡過的剪刀剪取甘薯藤。將剪好的甘薯藤帶回試驗室,用自來水沖洗5~8 min,用現配制的1‰優氯凈溶液浸泡已清洗干凈的甘薯藤2 min,浸泡結束后將甘薯藤攤晾于事先消毒好的塑料筐內備用。
將攤晾于塑料筐內的甘薯藤用被1‰高錳酸鉀溶液浸泡過的剪刀剪成帶3~4個節或3~4個葉片的莖段(剪去最上端的莖尖),將剪好的甘薯藤莖尖扦插在大棚苗床或育苗盤上進行培養,澆足水。大約14 d后扦插的甘薯藤將長出新的甘薯腋芽。
1.2 組培用甘薯外植體的消毒、接種、培養
用1‰高錳酸鉀溶液浸泡過的剪刀剪取新長出的甘薯腋芽作為組培甘薯的外植體,剪好的甘薯腋芽放入培養瓶中用自來水沖洗5 min放到超凈工作臺上,在無菌條件下用3‰砷汞溶液浸泡30~40 min,浸泡之后用無菌水清洗4~5次。將已消毒滅菌好的甘薯腋芽剪成帶1個生長點的莖段,接種于準備好的培養基上,通過前期培養基篩選試驗,筆者獲得甘薯藤莖尖組培的較優配方,誘導培養基配方:MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+白糖30 g/L+瓊脂7 g/L,pH值5.8;增殖培養基配方:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+白糖30 g/L+瓊脂7 g/L,pH值5.8;生根培養基配方:MS+6-BA 1.05 mg/L+IBA 0.35 mg/L+白糖30g/L+瓊脂7g/L,pH值5.8。培養溫度:23~25℃,光照強度2 000 LX。在培養過程中丟棄感菌的甘薯材料。
2.1 甘薯塊根外植體的預處理
選取健壯無病而且休眠期已過的甘薯塊根作為外植體,用自來水沖洗,毛刷輕刷,洗凈甘薯表面雜質,放入已消毒的塑料筐內攤晾2~3 d;用0.5‰優氯凈溶液浸泡晾干的甘薯塊根5~8 min,繼續攤晾1 d,移入催芽室內高溫催芽,催芽室內用石英爐加熱,保持溫度38~40℃,用滅菌好的牛皮紙覆蓋遮光。15 d以后,甘薯塊根將長出新芽。
2.2 甘薯塊根外植體的消毒、接種、培養
用1‰高錳酸鉀溶液浸泡過的剪刀剪取甘薯塊根上長出的不定芽,放入培養瓶中,移入超凈工作臺上,在無菌條件下用3‰砷汞溶液浸泡10~15 min,浸泡完后用無菌水清洗4~5次。將已消毒滅菌好的不定芽剪成帶1個生長點的芽段,接種于準備好的培養基上,經筆者篩選獲得較適宜的誘導培養基配方:MS +6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.01 mg/L+白糖30 g/L+瓊脂7 g/L+肌醇100 mg/L+活性炭1 g/L,pH值5.8,培養溫度為23~25℃,光照強度2 000 LX。甘薯塊根作外植體的增殖、生根培養基配方與用甘薯藤莖尖培養的相同。在培養過程中丟棄感菌的甘薯材料。
將已生根且健壯的甘薯組培苗開蓋置于培養間內1~2 d,移入育苗棚內假植于育苗盤上,育苗盤基質設計為腐殖葉∶紅土=1∶3,澆足水,待甘薯組培苗成活后,及時移入育種棚內作生產用種薯的繁育材料。
2014-04-20