高血壓腎功能損害患者血清中轉化生長因子β1含量檢測及其臨床價值分析

王 恭 云 輝 曾學平

高血壓腎功能損害患者血清中轉化生長因子β1含量檢測及其臨床價值分析

王 恭①云 輝①曾學平②

目的：研究高血壓腎功能損害患者血清中轉化生長因子β1(TGF-β1)含量檢測及其臨床價值。方法：篩選150例原發性高血壓患者，根據病情將其分為3組：①原發性高血壓未合并靶器官功能損害的患者為對照組(50例)；②原發性高血壓合并腎功能損害Ⅰ期的患者為腎功能Ⅰ期組(50例)；③原發性高血壓合并腎功能損害Ⅱ期的患者為腎功能Ⅱ期組(50例)。比較3組受試者的血清TGF-β1含量以及腎功能指標。結果：3組受試者的血肌酐(Scr)和血尿素氮(Urea)水平相比，無統計學差異；腎功能Ⅰ期組、Ⅱ期組患者的內生肌酐清除率(Ccr)低于對照組；TGF-β1水平高于對照組，差異有統計學意義(F=23.523，P＜0.05)；TGF-β1水平與Ccr呈負相關關系。結論：當腎功能損害為Ⅰ期、Ⅱ期時，TGF-β1水平發生明顯改變，且與菊粉清除率(Cin)水平具有良好的相關性，是反應腎功能的理想指標。

高血壓；腎功能損害；轉化生長因子β1；內生肌酐清除率

[First-author’s address] Department of Out-Patient, No.187 Hospital of PLA, Haikou 571159, China.

原發性高血壓常常合并靶器官功能損害，而腎臟是最常見的受累靶器官，故在臨床實踐中，治療方案的制定有賴于疾病的早期發現和診斷[1]。血肌酐和血尿素氮是臨床上用于檢測腎功能的常用指標，但只有當腎功能損害＞50%時，以上兩項指標才會發生變化，這無疑延誤了疾病的診斷和治療[2]。內生肌酐清除率(creatinine clearance rate，Ccr)是反應腎功能的金標準，能夠早期發現腎功能的損害，但檢測步驟繁瑣、需要使用外源性的標志物，難以被患者接受。因此探尋檢測更為便捷、反應腎功能更為靈敏的指標具有現實的臨床意義。轉化生長因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)是具有廣泛生物學功能的細胞因子，在腎臟功能損害的病理生理過程中發揮了重要作用[3]。本研究分析探討高血壓腎功能損害患者血清中TGF-β1含量及其臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年8月至2013年9月在解放軍第187醫院心內科和腎內科門診就診的150例原發性高血壓患者，根據病情將其分為3組：①原發性高血壓未合并靶器官功能損害的患者為對照組(50例)，其中男性32例，女性18例，年齡(57.9±7.2)歲；②原發性高血壓合并腎功能損害Ⅰ期的患者為腎功能Ⅰ期組(50例)，其中男性30例，女性20例，年齡(59.4±6.9)歲；③原發性高血壓合并腎功能損害Ⅱ期的患者為腎功能Ⅱ期組(50例)，其中男性34例，女性16例，年齡(57.3±7.8)歲。3組受試者在年齡、性別、血壓水平以及口服降壓藥情況相比無差異，具有可比性。

1.2 納入與排除標準

(1)納入標準：①明確的原發性高血壓診斷；②檢測Ccr，對照組患者Ccr為80～120 ml/min，腎功能損害Ⅰ期組Ccr為60～80 ml/min，腎功能損害Ⅱ期組Ccr為40～60 ml/min；③取得患者及家屬知情同意，愿意參加所有受試項目的檢測。

(2)排除標準：①繼發性高血壓患者；②合并明顯心功能損害以及腎功能損害Ⅲ期、Ⅳ期患者；③未能堅持參加所有受試項目檢測。

1.3 檢測方法

1.3.1 TGF-β1檢測

采集3組患者外周靜脈血5 ml，離心后采用酶聯免疫吸附法檢測TGF-β1含量。檢測步驟：①反應板每孔各加入標準品或待測樣品100 ul，充分混勻后在37℃水浴箱中靜置120 min；②用洗滌液將反應板充分洗滌4～6次，并在濾紙上印干；③每孔中加入第一抗體工作液100 ul。將反應板充分混勻后置37 ℃ 60 min，洗滌4～6次；④每孔加酶標抗體工作液100 ul，將反應板置37 ℃ 30 min，洗滌4～6次；⑤每孔加入底物工作液100 ul，置37 ℃暗處反應15 min，每孔加入100 ul終止液混勻；⑥于30 min內用酶標儀在450 nm處測吸光值。比較3組受試者的血清TGF-β1含量以及腎功能指標。

1.3.2 腎功能檢測

采集3組患者外周靜脈血5 ml，離心后采用電化學發光儀檢測肌酐和尿素氮水平；測定菊粉清除率(inulin clearance rate，Cin)來反應腎小球的濾過功能。

檢測步驟：早晨給予留置導尿，取10 ml尿液和4 ml靜脈血作為空白對照；將5 g菊粉溶于150 ml生理鹽水中，15 min內靜脈推注完成，然后用含5 g菊粉的生理鹽水400 ml維持滴注，30 min后夾閉導尿管，20 min后取靜脈血4 ml，測定血液中菊粉含量；排空膀胱，測定尿量和尿菊粉含量(公式1)：

Cin=尿菊粉含量÷(血漿菊粉含量×稀釋倍數)×尿量(ml/min) (1)

1.4 統計學方法

采用SPSS 18.0軟件對計量資料進行方差分析、計數資料進行卡方檢驗；相關性分析采用以TGF-β1為自變量、Ccr為應變量的單因素回歸分析。檢驗標準以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組受試者資料比較

(1)對照組：收縮壓為(142.4±16.2)mm Hg，舒張壓為(92.5±12.4)mm Hg；口服一種降壓藥19例，口服兩種降壓藥20例，口服三種降壓藥11例。

(2)腎功能Ⅰ期組：收縮壓為(144.8±15.9)mm Hg，舒張壓為(93.4±15.9)mm Hg；口服一種降壓藥17例，口服兩種降壓藥21例，口服3種降壓藥12例。

(3)腎功能Ⅱ期組：收縮壓為(145.4±16.0)mm Hg、舒張壓為(93.3±11.2)mm Hg；口服一種降壓藥15例，口服兩種降壓藥22例，口服3種降壓藥13例。

2.2 血液學指標

3組受試者的血肌酐、血尿素氮水平的差異無統計學意義(F=0.894，F=0.587；P＞0.05)；3組受試者Ccr的差異有統計學意義(F=13.874，P＜0.05)；經過LSD法兩兩比較表明，腎功能Ⅰ期組、Ⅱ期組患者的Cin低于對照組(見表1)。

2.3 TGF-β1水平

對照組患者TGF-β1水平為(24.7±4.4)ng/ml、腎功能Ⅰ期組患者TGF-β1水平為(42.8±7.3)ng/ ml、腎功能Ⅱ期組患者TGF-β1水平為(75.5±10.3) ng/ml。經方差分析可知，3組受試者內生Ccr的差異有統計學意義(F=23.523，P＜0.05)；經過LSD法兩兩比較可知，腎功能Ⅰ期組、Ⅱ期組患者的TGF-β1水平高于對照組，其差異顯著。

2.4 TGF-β1與Cin的相關性

以TGF-β1為自變量、Ccr為應變量進行單因素回歸分析可知，TGF-β1水平與Ccr呈負相關關系，回歸方程為Y=-1.2716X+144.26，決定系數r2=0.8344，t=16.984，P＜0.05。

3 討論

高血壓是臨床最常見的慢性疾病，血壓水平異常可導致腎臟血流動力學改變，腎臟入球小動脈痙攣、管腔狹窄、腎小球灌注不足，進而導致腎小球濾過功能受損，表現為血肌酐和血尿素氮水平升高[4]。臨床上常用血肌酐和血尿素氮水平作為反應腎功能的指標，但對于判斷早期腎功能損害具有較大的局限性。由于腎臟本身具有較強的代償能力，當發生腎小球灌注不足時，可通過腎臟入球小動脈的收縮和舒張來調節血液灌注，使得腎臟的濾過功能維持在正常范圍[5]。只有在腎功能損害＞50%時，血肌酐和血尿素氮水平才會發生明顯改變，此時腎功能衰竭已發展至Ⅲ期、Ⅳ期，不利于疾病的早期發現和早期診斷[6]。本研究結果發現，腎功能Ⅰ期、Ⅱ期患者的血肌酐和血尿素氮水平與對照組相比無明顯差異，表明這兩項指標無法在腎功能損害的早期診斷疾病。

表1 3組受試者血液學指標比較

內生Ccr是判斷腎功能情況的金標準，能夠準確反應腎小球率過濾，臨床上多通過Cin的測定來反應內生Ccr，但是Cin的測定需要給予外源性標志物，操作步驟繁瑣，患者和家屬多無法接受，因而不易推廣使用[7-8]。在臨床中，準確判斷腎小球濾過功能、早期發現腎功能損害有利于針對高血壓合并腎功能損害給予及時的治療措施。因此，探尋更為便捷、準確、靈敏的腎功能檢測指標具有現實的臨床應用價值[9]。TGF-β1是一類具有極為廣泛生物學作用的多肽類細胞因子，參與體內的細胞增殖、細胞外基質聚積、血管新生以及損傷后修復等各種病理生理學過程，在高血壓患者發生腎功能損害的各個階段中，TGF-β1均發揮了重要作用[10-12]。

國內外學者近年來的研究顯示，TGF-β1在腎臟局部的主要作用為：①通過旁分泌、自分泌的方式作用于腎臟入球小動脈，經過一系列信號轉導途徑促進膠原蛋白、纖維蛋白及層粘連蛋白等的合成，進而造成腎小球內細胞外基質聚集，發生腎小球硬化和間質纖維化；②抑制纖溶系統的活性，進而加重細胞外基質聚集的情況，導致腎小球硬化和間質纖維化不斷發展；③募集成纖維細胞和單核巨噬細胞，介導入球小動脈內膜的炎癥反應，導致動脈痙攣、腎小球灌流量減少[13-14]。

本研究通過比較3組受試者的血清TGF-β1水平顯示，腎功能Ⅰ期組、Ⅱ期組患者的TGF-β1水平高于對照組，表明TGF-β1水平在腎功能損害的早期已發生改變，預期可作為判斷腎功能情況的理想指標。Ccr是反應腎功能的金標準，而Cin在檢測時的步驟較為繁瑣，因此判斷腎功能的理想指標應該具有取材方便、檢測步驟簡單的特點，并且能夠與Cin存在較好的相關關系[15]。通過單因素回歸的方法分析TGF-β1與Ccr的相關性可知，TGF-β1水平與Ccr呈負相關關系，決定系數達到了0.8344，表明Ccr的變化有83.44%可以用TGF-β1的變化來解釋。同時說明血清TGF-β1能夠準確反應腎小球濾過情況，在臨床實踐中，可以通過血清TGF-β1水平的檢測來反應腎功能。

綜上所述，當腎功能損害Ⅰ期、Ⅱ期時，TGF-β1水平發生明顯改變，且與Ccr水平具有良好的相關性，是反應腎功能的理想指標。

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The levels of TGF-β1 in hypertensive renal function impairment patients and its clinical value analysis

WANG Gong, YUN Hui, ZENG Xue-ping
China Medical Equipment, 2015,12(6):112-115.

Objective: To detect the levels of TGF-β1 in hypertensive renal function impairment patients and its clinical value. Methods: Primary hypertension patients with no target organs damage were enrolled in control group, primary hypertension patients with renal function stageⅠand stage Ⅱ were enrolled in renal function stage Ⅰ group and stage Ⅱ group. Serum TGF-β 1 levels and renal function indices of three groups were compared. Results: There were no significant difference of serum creatinine and blood urea nitrogen of three groups(F=23.523, P＜0.05); endogenous creatinine clearance rate of renal functionⅠand Ⅱgroups were lower than that of control group, TGF-β1 levels of renal functionⅠandⅡ groups were higher than of control group; TGF-β1 levels were negatively correlated with creatinine clearance rate. Conclusion: TGF-β 1 level is an ideal index to reflect renal function for its level significantly changes in renal damage stageⅠ, Ⅱ and has good correlation with Cin.

Hypertension; Renal function impairment; Transforming growth factor-β1; Endogenous creatinine clearance rate

王恭,男,(1968- ),本科學歷，主治醫師。解放軍第187醫院門診部，從事心血管內科工作。

1672-8270(2015)06-0112-04

R544.14

A

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2015.06.034

2014-12-10

①解放軍第187醫院門診部 海南 海口 571159

②解放軍第187醫院輸血科 海南 海口 571159